杨冬萍 杨晓旭 俞 洋,2* .宁夏医科大学中医学院，宁夏 银川 750004；2.回医药现代化省部共建教育部重点实验室，宁夏 银川 740004

实验研究

MTT法与CCK-8法检测兔视网膜色素上皮细胞活性的比较研究

杨冬萍1杨晓旭1俞 洋1,2*
1.宁夏医科大学中医学院，宁夏 银川 750004；2.回医药现代化省部共建教育部重点实验室，宁夏 银川 740004

目的：探讨MTT法和CCK-8法对细胞活性检测的最佳实验条件，并比较二者的优缺点。方法：取传至第5代的兔视网膜色素上皮细胞为研究对象，分别用MTT试剂和CCK-8试剂检测兔视网膜色素上皮细胞的增殖情况。结果：MTT法最佳检测波长为570nm，最佳检测时间在加入试剂后4h，细胞数量在1.25×103～2×104之间检测较好；CCK-8法最佳检测波长在450nm，最佳检测时间在加入试剂4～6h，适宜的细胞检测范围为1.25×103～1×104。结论：MTT法较CCK-8法细胞检测范围更广，孵育时间更短，是一种优于CCK-8法的细胞活性检测方法。

MTT；CCK-8；兔视网膜色素上皮细胞；细胞活性

检测细胞活性与增殖的方法有很多，如乳酸脱氢酶释放法、台盼蓝拒染法、集落形成法、流式细胞仪法、荧光染色法、MTT比色法等，其中，MTT比色法自1983年Mosmann建立以来，由于其简便、快速、经济等优点，现已广泛用于细胞实验，成为定量检测细胞生长和增殖的理想方法[1]。但由于MTT生成的产物Formazan为非水溶性的，需要有机溶剂(DMSO、异丁醇等)才能溶解，且在吸出培养液时可能会因操作不当，丢失部分Formazan，导致结果可重复性差。针对MTT法的不足，研究发现了很多水溶性的四氮唑蓝类：如XTT法[2]、MTS法[3]、Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)法[4]等。本文以兔视网膜色素上皮细胞为研究对象，探讨MTT法和CCK-8法对细胞活性检测的最佳实验条件，并对二者的优缺点做一比较。……