王海华, 王海珍， 史 娜， 王竹青， 王耀军， 周萍萍， 王 静

(1. 皖南医学院1生理学教研室， 2. 临床医学系， 安徽 芜湖 241002)

钠泵功能改变及内质网应激在大鼠离体心脏缺血/再灌注损伤中的作用*

王海华1△, 王海珍1， 史 娜1， 王竹青2， 王耀军2， 周萍萍1， 王 静1

(1. 皖南医学院1生理学教研室， 2. 临床医学系， 安徽 芜湖 241002)

目的：探讨钠泵活性改变及内质网应激(ERS)在大鼠离体心脏再灌损伤中的作用及其机制。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为6组(n=10)：正常对照组(NC组)、缺血/再灌损伤组(I/R组)、哇巴因-缺血/再灌损伤组(OUA-I/R组)、地高辛抗血清-缺血/再灌损伤组(Anti-Dig-I/R组)、Src抑制剂PP2-哇巴因-缺血/再灌损伤组(PP2-OUA-I/R组)、PLC抑制剂U73122-哇巴因-缺血/再灌损伤组(U73122-OUA-I/R组)。建立全心缺血30 min，再灌注120 min的Langendorff大鼠离体心脏缺血再灌损伤模型。检测各组相同时间点心功能恢复率、冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性，心肌中Na+-K+-ATP酶活性和钙离子水平。流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率，Western blot检测心肌钠泵α1亚基、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)及凋亡蛋白Bcl-2/Bax的表达。结果：与I/R组相比，给予哇巴因预处理可使心功能恢复率明显下降，心肌酶漏出增多，Na+-K+-ATP酶的活性降低，心肌细胞内钙水平升高，细胞凋亡率增多，心肌钠泵α1亚基和Bcl-2表达降低，GRP78、CHOP和Bax表达升高；而Anti-Dig-I/R组与I/R组相比各指标均明显改善；给予Src抑制剂PP2或PLC抑制剂U73122后，哇巴因对心肌的损伤作用被部分阻断，表现为心功能恢复率升高，心肌酶漏出减少，Na+-K+-ATP酶的活性明显恢复，Ca2+水平下降，细胞凋亡率下降，心肌钠泵α1亚基和Bcl-2表达增多，GRP78和Bax表达减少。结论：钠泵功能改变和内质网应激共同参与大鼠离体心脏缺血再灌损伤，钠泵通路(Src和PLC)介导内质网应激是引起大鼠离体心脏缺血再灌损伤细胞凋亡机制之一。……