张月 李海涛 刘荣梅 高继国

（东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030）

苏云金芽胞杆菌cry2Ab34基因的克隆、表达和杀虫活性分析

张月 李海涛 刘荣梅 高继国

（东北农业大学生命科学学院，哈尔滨 150030）

旨在对苏云金芽胞杆菌cry2Ab34基因进行分子鉴定和生物活测定，从杀虫活性高的Bt BJH500 菌株中提取基因组DNA，通过 PCR 法克隆得到cry2Ab34基因（GenBank 登录号为KX357382）。这个基因序列已被国际Bt基因命名委员会正式命名为 cry2Ab34，结果显示，对cry2Ab34基因进行表达，获得大小约70 kD的表达产物，将该基因在大肠杆菌E.coli BL21中表达之后进行生物活性测定，结果表明对鳞翅目害虫小菜蛾（Plutella xyllostella）和棉铃虫（Helicoverpa armigera）都具有一定的杀虫活性，其校正死亡率10 μg/mL为31.25 %，100 μg/mL为62.5 %和校正死亡率10 μg/mL为29.4%，100 μg/mL为52.9 %。

苏云金芽胞杆菌；cry2Ab34基因；杀虫晶体蛋白；杀虫活性；小菜蛾；棉铃虫

苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis，Bt）是一种能够产生多种杀虫晶体蛋白（Cry）的土壤细菌［1，2］，其形成芽胞的过程中，形成一个或多个伴胞晶体（parasporal crystal）。大多数这种伴胞晶体具有杀虫活性，所以又称杀虫晶体蛋白（ICPs）或 δ-内毒素（δ-endotoxin）。该菌具有高效、对人畜和环境安全且对标靶寄主特异性强的特点，是化学杀虫剂的重要替代品之一［3］，已成为目前世界上开发产量最大、时间最长、应用最广的生物杀虫剂，总占生物杀虫剂量的90% 以上，已有60多个国家登记了120多个品种，期间取得了巨大的经济、生态和社会效益［4］。Bt 蛋白杀虫活性对非靶标生物无害，因此被制成生物杀虫剂广泛地应用于农业、林业以及卫生害虫的防治［5，6］。Bt的cry基因已成功转入很多主要农作物包括玉米、棉花、番茄等，使它们具有抗虫特性［7-10］。……