王 改 王志华 段红年 徐 欢 马江涛 刘鑫惠 刘佳琪 李 宁 常春鹏 郝京霞

保定市儿童医院重症监护病房1(071051) 河北省儿童医院重症监护病房2

乌司他丁对过氧化氢诱导的肠上皮屏障损伤的保护作用

王 改1*王志华1段红年1徐 欢1马江涛1刘鑫惠1刘佳琪1李 宁1常春鹏1郝京霞2

保定市儿童医院重症监护病房1(071051) 河北省儿童医院重症监护病房2

背景：肠上皮细胞间紧密连接的破坏及其所致的肠黏膜屏障功能受损在一系列胃肠道疾病的发生、发展中起重要作用。目的：探讨乌司他丁对过氧化氢(H2O2)诱导的肠上皮屏障损伤的保护作用。方法：以Caco-2细胞体外培养制备肠单层上皮屏障模型，将其分为空白对照组(不予干预)、H2O2组(500 μmol/L H2O2)和低浓度(500 U/mL)、高浓度(3 000 U/mL)乌司他丁治疗组并予相应处理。检测丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性，以跨上皮细胞电阻(TEER)和荧光素钠透过率评估上皮屏障功能，蛋白质印迹法和免疫荧光法检测紧密连接蛋白ZO-1、occludin的表达和定位，透射电镜观察紧密连接超微结构。结果：与空白对照组相比，H2O2组Caco-2细胞单层上皮MDA水平、荧光素钠透过率明显升高，SOD活性、TEER、ZO-1和occludin蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。透射电镜观察和免疫荧光法检测显示H2O2组细胞刷状缘受损，细胞间连接模糊，ZO-1、occludin蛋白分布断续不完整，荧光强度低。乌司他丁治疗组上述指标均较H2O2组显著改善(P<0.05)，高浓度组改善更为明显。结论：乌司他丁对H2O2诱导的肠单层上皮屏障损伤有一定保护作用，其机制可能与其抗氧化活性以及调节紧密连接蛋白表达和分布有关。

乌司他丁； 过氧化氢； 肠黏膜屏障； 上皮细胞； 紧密连接部

肠黏膜屏障是机体最重要的防御屏障之一，其能选择性吸收维生素、氨基酸、离子等营养物质，并阻止细菌、毒素等有害物质透过肠黏膜进入血液循环和其他组织器官。肠黏膜上皮细胞间完整的紧密连接(tight junction)是肠黏膜屏障的解剖基础，zonula occludens-1(ZO-1)、claudins、occludin蛋白作为紧密连接的重要组成部分，对于肠黏膜屏障功能的维持至关重要[1-2]。……