陈嘉兴， 陈智健， 吴礼康， 田亚锋， 鲜 敏， 邹志辉， 余日安△

1广东药科大学公共卫生学院，广州 5103102深圳市宝安区疾病预防控制中心，深圳 518101

Nrf2信号因子在镉所致HEK细胞氧化损伤中的作用*

陈嘉兴1， 陈智健1， 吴礼康2， 田亚锋2， 鲜 敏2， 邹志辉1， 余日安1△

1广东药科大学公共卫生学院，广州 5103102深圳市宝安区疾病预防控制中心，深圳 518101

目的 研究Nrf2信号因子在镉所致人胚肾上皮(HEK)细胞氧化应激中的作用。方法 取对数生长期HEK细胞，分别以终浓度为0、2.5、5、10、20 μmol/L的氯化镉染毒24、48和72 h后，收获细胞，采用荧光定量聚合酶链式反应法检测HEK细胞核因子NF-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2)mRNA相对表达水平，采用免疫印迹法检测HEK细胞Nrf2核蛋白相对翻译水平。结果 HEK细胞在染镉浓度为20 μmol/L下作用48 h，SOD活性和GSH-Px活性显著降低(均P<0.05)，而作用至72 h，GSH-Px活性则有所升高；10 μmol/L和20 μmol/L镉作用72 h，MDA含量均显著高于同时间点对照组和同组24 h时间点(均P<0.05)。在10 μmol/L和20 μmol/L镉作用48和72 h，Nrf2 mRNA相对表达水平均有显著变化(均P<0.05)；在20 μmol/L作用48和72 h，Nrf2核蛋白相对翻译水平显著升高(均P<0.05)。在镉染毒浓度为20 μmol/L下作用于HEK细胞72 h时，HEK细胞内GSH-Px活性、MDA含量均与Nrf2核蛋白相对翻译水平呈正相关关系(均P<0.05)。结论 镉在引起HEK细胞发生氧化应激反应的同时，还能通过诱导Nrf2信号因子的活化来抑制氧化应激损伤，其机制可能是通过促进抗氧化酶表达实现的。

氯化镉； 人胚肾上皮细胞； 氧化应激； Nrf2

镉作为环境污染物和生产性毒物，主要引起慢性肾损伤，而氧化应激是镉所致慢性肾损害的重要机制[1-2]。有研究认为，转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2，Nrf2)是细胞抗氧化应激的中枢调节者，在细胞介导的抗氧化应激防御反应中具有重要的作用[3]。虽然近年来不少报道表明，Nrf2信号通路的活化可通过拮抗氧化应激反应来改善镉致肾损伤[4-5]，但目前Nrf2信号通路在镉引起肾细胞氧化应激反应中的作用机制仍不明确。因此，本研究选用人胚肾上皮(human embryonic kidney epithelial，HEK)细胞，应用荧光定量聚合酶链式反应法(real-time polymease chain reaction，Real-time PCR)和免疫印迹法(Western blot)，研究Nrf2信号因子在镉致HEK细胞氧化损伤中的作用，为进一步研究镉的分子毒理学作用机制以及镉中毒的防治提供实验依据。……