余 谨， 赵振宇， 王新光， 刘海浪， 凌 青△

1武汉血液中心，武汉 4300302 华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科，武汉 430030

RhoA/Rho激酶信号通路与先天性尿道下裂发生的相关性研究*

余 谨1， 赵振宇2， 王新光2， 刘海浪2， 凌 青2△

1武汉血液中心，武汉 4300302华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科，武汉 430030

目的 通过构建先天性尿道下裂模型和在体外培养雄性胎鼠尿道海绵体组织来探讨RhoA/Rho激酶信号通路在先天性尿道下裂发生中的作用。方法 通过邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[di-(2-ethylhexyl)phthalate，DEHP]灌胃法建立先天性尿道下裂大鼠模型，处死大鼠获得尿道海绵体组织后，免疫组化检测RhoA和p-RhoA蛋白表达，荧光定量PCR(qPCR)检测各组大鼠尿道海绵体组织中RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA的表达水平，Western blot检测各组大鼠尿道海绵体组织中RhoA，p-RhoA，MLCP(myosin light chain phosphatase)，p-MLCP，MLC(myosin light chain)，p-MLC蛋白的表达情况。同时对胎鼠的尿道海绵体组织进行体外培养，使用RhoA/Rho激酶通路的抑制剂处理培养中的尿道海绵体组织，观察RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA的表达水平。结果 成功构建了大鼠尿道下裂模型。免疫组化结果显示与对照组相比，先天性尿道下裂大鼠阴茎组织中p-RhoA表达明显增加。qPCR结果显示，先天性尿道下裂大鼠尿道海绵体组织中RhoA、ROCK1、ROCK2 mRNA表达水平明显高于对照组(均P<0.05)。Western blot结果显示，先天性尿道下裂大鼠尿道海绵体组织中p-RhoA、p-MLCP、p-MLC蛋白的表达水平较对照组均明显升高(均P<0.05)。体外培养尿道海绵体组织实验发现，RhoA/Rho激酶通路抑制剂可阻碍RhoA/Rho激酶信号通路激活，从而抑制RhoA、ROCK1、ROCK2的表达并减轻DEHP对雄性胎鼠尿道段组织正常发育的抑制作用。结论 RhoA/Rho激酶信号通路激活与先天性尿道下裂的发生有关，抑制RhoA/Rho激酶信号通路激活可降低RhoA、ROCK1和ROCK2表达从而促进尿道海绵体组织正常发育。

RhoA； Rho激酶； 信号通路； 先天性尿道下裂

先天性尿道下裂是一种常见的儿童先天性尿道畸形之一，主要病理改变包括因先天性尿道发育异常而导致的阴茎短小、尿道口异位向阴茎腹侧弯曲、包皮异常等一系列特征[1]。该病多发于新生儿，新生儿发病率高达1/(200～300)到1/51，并呈逐年上升趋势[2-4]，且男性患者多于女性患者[5]。……