张万利,梁新红,孙俊良,冉军舰,莫海珍

离子交换层析分离纯化甘薯β-淀粉酶

张万利,梁新红,孙俊良,冉军舰,莫海珍

（河南科技学院食品学院,河南新乡453003）

应用新型离子交换柱层析分离甘薯中β-淀粉酶.采用HiTrap Capto Q强阴离子柱对甘薯β-淀粉酶进行分离纯化,纯化的样品经SDS-PAGE分析纯度.结果表明：pH值为6.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液条件下纯化效果最佳,分离色谱图显示洗脱液在280 nm的紫外吸收值最大,为496.32 mAU,蛋白峰面积最大,为225.55；洗脱液经SDS-PAGE分析为单一条带；经HiTrap Capto Q柱分离纯化后,β-淀粉酶比活力提高至96 885 U/mg,纯化倍数为15.32,酶回收率为18.30%.研究表明HiTrap Capto Q柱层析纯化能够快速高效地纯化甘薯β-淀粉酶,纯化工艺过程简单、快速、高效.研究对工业生产中运用此技术提高β-淀粉酶的分离纯化效率具有理论及实践意义.

离子交换层析；纯化；甘薯；β-淀粉酶

甘薯是我国重要的粮食作物之一,其种植面积和总产量分别占世界的42.65%和71.22%,居世界首位,单产比世界平均水平高67%[1].近年来中国甘薯产后淀粉加工比例达到70%～80%[2-3].据报道,中国每年因生产甘薯类淀粉排放的废液约1 650万t,造成较严重的环境污染[4].而甘薯浆中含有大量蛋白,其中甘薯β-淀粉酶是主要的蛋白之一,甘薯中提取的β-淀粉酶是植物β-淀粉酶的最佳来源[5-6].从甘薯制淀粉的废液中提取β-淀粉酶,既节约了生产成本,又大大减少了环境污染.

β-淀粉酶是一种糖苷酶,作用于淀粉时从淀粉链的非还原端开始,外切α-1,4-糖苷键,顺次切下麦芽糖单位[7].β-淀粉酶主要应……