范冰冰 赵夏苗 郭晏华 张 旭*

（辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600）

基线等比增减法优选麸煨木香活性单体抗腹泻作用的最佳配比

范冰冰 赵夏苗 郭晏华 张 旭*

（辽宁中医药大学药学院，辽宁 大连 116600）

目的寻找麸煨木香的止泻作用物质基础，探索木香烃内酯和去氢木香内酯伍用抗腹泻的最佳配比方案。方法以番泻叶复制小鼠腹泻模型，采用基线等比增减设计法拟定木香烃内酯/去氢木香内酯组合配比，小鼠腹腔注射混合液0.05 mL/10g，测定不同比例组合的混合液对腹泻小鼠的影响。结果二者的比例为0.67时，其抗腹泻作用最强，是有效成分的最佳配比。结论木香烃内酯和去氢木香内酯伍用协同抗腹泻作用优于单品，且存在最佳配比。

木香；木香烃内酯；去氢木香内酯；腹泻指数

木香为菊科植物木香Aucklandia lappa Decne.的干燥根，气香特异、味微苦，归脾、胃、大肠、三焦、胆经，常用于胸胁、脘腹胀痛，泻痢后重，食积不消，不思饮食[1]。古籍《本草发挥》[2]记载木香煨熟可止泻痢，能实大肠，可治泄泻。课题前期实验结果已证明木香麸煨品较生品抗腹泻作用增强，其抗腹泻活性部位为挥发油成分组。挥发油中主含倍半萜类成分，以木香烃内酯和去氢木香内酯含量居多。复方具有多药物、多靶点多药效指标，而单味药也具有多成分、多靶点多药效指标。基线等比增减法适用于药效物质基础相对明确，药味相对较少的小复方，以主要效应和次要效应为评价指标，进行各配比的优化筛选[3]。因此，本实验以中医药理论为指导，借鉴“中药复方配伍入药的学术思想”，设想“单味药中活性成分配伍与药效具有相关性”。因此采用基线等比增减设计法筛选麸煨木香活性单体抗小鼠腹泻最佳成分配比方案，为探讨麸煨木香抗腹泻作用机制提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物：雄性SPF级昆明种小鼠，体质量18～22 g，由辽宁长生生物技术有限公司提供，动物许可证号: SCXK（辽）2010-0001。恒温、恒湿适应性喂养一周。

1.1.2 试剂和药品：木香烃内酯对照品（批号：111524-200503，纯度≥98%）、去氢木香内酯对照品（批号：111525-200706，纯度≥98%）均购自中国药品生物制品检定所。番泻叶购自大连沙河口区普惠大药房；盐酸洛哌丁胺胶囊（西安杨森制药有限公司），批号H10910085；生理盐水（西南药业股份有限公司），批号06070067。滤纸。

1.2 方法

1.2.1 木香烃内酯/去氢木香内酯组合配比，见表1。

表1 基线等比增减设计木香烃内酯/去氢木香内酯组合配比

1.2.2 木香烃内酯/去氢木香内酯组合配比对腹泻小鼠的影响

1.2.2.1 分组：将健康雄性小鼠按体质量随机分为阳性药对照组、模型组以及木香烃内酯/去氢木香内酯不同组合配比的11个实验组，每组10只。

1.2.2.2 供试药液制备：阳性药盐酸洛哌丁胺混悬液：取2.00 mg溶于10.00 mL生理盐水，配成0.20 mg/mL混悬液。番泻叶水煎剂：取40.00 g番泻叶，加90 ℃400.00 mL水浸泡10 min，纱布过滤，浓缩至40.00 mL，制成浓度为1.00 g/mL番泻叶水煎剂。木香烃内酯和去氢木香内酯组合配比混合液：分别精称木香烃内酯和去氢木香内酯对照品各10.00 mg，用生理盐水配制成2.00 mg/mL溶液各5 mL，按表1进行组合配比。

1.2.2.3 腹泻指数测定：实验前禁食不禁水12 h。模型组腹腔注射生理盐水0.05 mL/10g；阳性药对照组盐酸洛哌丁胺灌胃2.00 mg/kg；另11组分别腹腔注射木香烃内酯/去氢木香内酯不同组合配比混合药液0.05 mL/10g。给药0.5 h后以0.20 mL/只番泻叶水煎剂灌胃，将小鼠置于代谢笼中，1 h后按参照文献[4]记录腹泻小鼠的稀便级、稀便率，连续测定5 h，计算各组腹泻指数。

2 实验结果

各组腹泻小鼠的稀便级、稀便率及腹泻指数结果，见表2。

3 讨 论

课题组前期研究结果显示[5]，木香麸煨后，挥发油含量降低，指标性成分木香烃内酯和去氢木香内酯的含量均减少，但二者含量降低程度不同，其含量比例均下降，而现代药理研究很少关注二者配伍变化与其抗腹泻作用的相关性。因此本实验拟定了木香烃内酯/去氢木香内酯不同组合配比，考察其对小鼠腹泻的影响，以探求麸煨木香止泻作用物质基础。当所需药效指标明确而数量较少时，采用直观选择法，即以腹泻指数为药效评价指标，选择二者的比例为0.67时，抗腹泻作用效果最好，在统计学上，与模型组相比具有显著性差异。而分别使用木香烃内酯和去氢木香内酯单品时，去氢木香内酯抗腹泻作用强于木香烃内酯，但腹泻指数均较高，而二者伍用，其抗腹泻效果有所提高。由实验结果推断，木香烃内酯和去氢木香内酯伍用协同抗腹泻作用优于单品，且存在最佳配比。该实验结果提示，中药炮制可通过考察单味药中活性成分配伍与药效的相关性，即活性成分配比的改变来阐述炮制原理，逐步完善成分配伍理论。

表2 各组番泻叶致小鼠腹泻稀便级、稀便率及腹泻指数，n=10)

表2 各组番泻叶致小鼠腹泻稀便级、稀便率及腹泻指数，n=10)

注：*与模型组比较，P＜0.05

组别 剂量/(mg/kg) 稀便级 稀便率 腹泻指数模型组 - 1.16±0.17 0.83±0.16 0.98±027阳性对照组 2.00 1.14±0.19 0.55±0.24 0.62±0.26组1 2.50 1.95±0.38 0.64±0.13 1.26±0.39组2 2.50 1.58±0.50 0.76±0.16 1.19±0.43组3 2.50 1.64±0.45 0.54±0.19 0.91±0.41组4 2.50 1.36±0.39 0.56±0.20 0.81±0.46组5 2.50 1.22±0.15 0.64±0.20 0.77±0.23组6 2.50 1.39±0.34 0.53±0.13 0.72±0.17组7 2.50 1.01±0.45 0.46±0.16 0.46±0.22*组8 2.50 1.31±0.27 0.51±0.12 0.68±0.25*组9 2.50 1.28±0.31 0.62±0.23 0.79±0.31组10 2.50 1.45±0.23 0.57±0.14 0.82±0.23组11 2.50 1.1.56±0.15 0.59±0.18 0.93±0.27

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(2015年版一部)[S].北京:中国医药科技出版社,2015:62-63.

[2] 明•徐彦纯.本草发挥[M].上海:大成书局《薛氏医案》石印本辑录,1922.

[3] 唐志书,郭立玮,王斌.基线等比增减设计法优选PNS/TGCO组分对实验性气虚血瘀型冠心病的影响研究[J].中药材,2010,33(9):1439.

[4] 周干南,胡芝华,汪亚先,等.小鼠腹泻模型的制备与腹泻指数的应用[J].中草药,1994,25(4):195-199.

[5] 张旭,姜潆津子,贾天柱.HPLC法测定不同来源木香饮片中木香烃内酯和去氢木香内酯含量[J].辽宁中医药大学学报,2011,13(2):27-29.

R282.710.7；R442.2

B

1671-8194（2017）08-0014-02

辽宁省自然基金项目（201202153）；高等学校博士学科点专项科研基金项目（20122133120006）

*通讯作者