赵艳丽 陈 璐 史彬林 郭晓宇 闫素梅

(内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特010018)

亮氨酸对奶牛乳腺上皮细胞内乳脂合成相关基因和蛋白表达的影响

赵艳丽 陈 璐 史彬林 郭晓宇 闫素梅*

(内蒙古农业大学动物科学学院，呼和浩特010018)

本试验旨在研究亮氨酸(Leu)对泌乳奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)内乳脂合成相关基因和蛋白表达的影响，以探讨Leu对乳脂合成的影响机理。将第3代BMECs随机分为6个处理，每个处理6个重复。6个处理培养液中Leu浓度分别为0.45、0.90、1.80、2.70、3.60和7.20 mmol/L，37 ℃、5% CO2培养48 h后测定BMECs内甘油三酯(TG)的含量及乳脂合成相关基因和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)与固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)蛋白的相对表达量。结果显示：Leu浓度对BMECs内TG含量无显著影响(P>0.05)。适宜浓度的Leu显著促进脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰辅酶A羧化酶A(ACACA)基因的表达(P<0.05)，FASN基因的相对表达量以1.80～2.70 mmol/L Leu处理、ACACA基因的相对表达量以1.80～7.20 mmol/L Leu处理较高。Leu浓度显著影响BMECs内SREBP1基因及蛋白表达(P<0.05)，以1.80 mmol/L Leu的促进效果最好。虽然Leu显著抑制BMECs内脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、脂蛋白脂酶(LPL)、乙酰甘油磷酸脂酰转移酶6(AGPAT6)、线粒体甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)和嗜乳脂蛋白亚家族1成员1(BTN1A1)基因的表达(P<0.05)，但只有高浓度(3.60～7.20 mmol/L)的Leu抑制作用较大。综合来看，Leu浓度影响BMECs乳脂合成相关基因及PPARγ和SREBP1蛋白的表达。Leu浓度为1.80～2.70 mmol/L时，对脂肪酸从头合成相关基因及调控因子SREBP1蛋白表达的促进效果较好，对TG合成及脂滴形成相关基因表达的抑制作用较小。

奶牛；乳腺上皮细胞；亮氨酸；乳脂

牛奶总固形物中乳脂含量高达27%，是构成牛奶的重要物质基础，也是衡量乳品质的重要指标。氨基酸(AA)作为乳蛋白合成的主要前体物，不仅影响乳蛋白合成，对乳脂的合成也有影响[1]，因此，深入研究AA对乳脂合成的影响及其机理对改善乳品质有重要的意义。亮氨酸(Leu)是动物的必需氨基酸，研究发现，小鼠饲粮缺乏Leu后其白色脂肪组织中的脂肪合成受限制，脂肪酸合成酶(FASN)和乙酰辅酶A羧化酶A(ACACA)基因以及固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)和FASN蛋白的表达显著下降，血清游离脂肪酸和甘油的含量也显著下降[2]。体外研究发现，Leu在影响乳蛋白合成的同时，也促进奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)内固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP1)基因的表达和甘油三酯(TG)的合成[3]。这……