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Ras同源物基因家族成员B对肾透明细胞癌细胞生长及迁移能力的影响

2017-04-21陈伟浩徐衍盛欧阳昀王希友吴意光张新宇周茂军赵豫波关维民刘萃龙

转化医学杂志 2017年2期
关键词:生长能力

陈伟浩,徐衍盛,欧阳昀,王希友,吴意光,张新宇,王 毅,周茂军,赵豫波,关维民,刘萃龙

Ras同源物基因家族成员B对肾透明细胞癌细胞生长及迁移能力的影响

陈伟浩,徐衍盛,欧阳昀,王希友,吴意光,张新宇,王 毅,周茂军,赵豫波,关维民,刘萃龙

目的研究干扰Ras同源物基因家族成员B(Ras homolog gene familymember B,RhoB)表达后对肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)细胞生长及迁移能力的影响。方法检测RhoB在RCCC细胞中的蛋白表达水平,采用脂质体转染方法转染RhoB真核表达载体pcDNA3.0-Flag-RhoB和沉默RhoB的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)即si-RhoB序列及相应空载体和对照序列,应用Western Blot法检测转染后RhoB的蛋白表达情况,通过3-(4,5-二甲基吡啶-2-基)-5-(3-羧基甲氧基苯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium,MTS]法、平板克隆和Transwell小室细胞迁移实验检测细胞生长和细胞迁移能力的变化。结果RhoB在RCCC细胞中表达降低。与转染空载体组比较,转染pcDNA3.0-Flag-RhoB重组质粒组RhoB的蛋白表达水平明显上调;与转染对照组比较,si-RhoB转染组RhoB的蛋白表达水平明显下调。在RCCC细胞786-O和Caki-1中,上调RhoB的表达后,在4、5、6 d经MTS法测定光密度值明显降低(P<0.05);在786-O细胞中上调RhoB表达后细胞克隆数明显减少;转染48 h后Transwell细胞迁移数明显减少(P<0.05)。而下调RhoB表达后,细胞生长和Transwell细胞迁移数没有明显变化。在相对高表达RhoB的正常人肾小管上皮细胞中下调RhoB表达后细胞生长和细胞迁移数明显增多。结论 过表达RhoB后明显抑制RCCC细胞生长和迁移能力。

Ras同源物基因家族成员B;肾透明细胞癌;细胞生长;迁移

肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一,其发病率仅次于膀胱癌,其中60%~85%的病理分型为肾透明细胞癌(renal clear cell carcinoma,RCCC)[1]。……

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