郝福星杨雨秋刘 云夏兴建

(1.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300；2.江苏省如皋市丁堰镇畜牧兽医站，江苏如皋 226500)

规模化猪场蓝耳病免疫程序优化

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(1.江苏农牧科技职业学院，江苏泰州 225300；2.江苏省如皋市丁堰镇畜牧兽医站，江苏如皋 226500)

为了探讨一种比较适合规模化猪场的蓝耳病合理免疫程序，本文用不同疫苗和不同免疫方式对仔猪进行免疫接种，然后采集血清，检测其蓝耳病抗体水平。

规模化猪场 蓝耳病 免疫程序

猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS，俗称猪蓝耳病）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起的急性传染病。该病主要造成妊娠母猪流产、死胎等繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病，导致仔猪死亡率升高，生长发育受阻。目前针对该病的防控，疫苗免疫仍然是一个主要的途径之一。蓝耳病疫苗分2种，一种是灭活苗，另一种是弱毒苗。为探讨不同类型猪蓝耳病疫苗对仔猪免疫效果，笔者对高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗与灭活苗免疫效果进行了对比试验。现将试验报告如下：

1 材料和方法

1.1 疫苗与毒株

试验所选用的疫苗为高致病性PRRS（HuN4）弱毒苗和高致病性PRRS（JXA1）灭活苗。HuN4弱毒苗为10头份/瓶，使用前用10ml灭菌的PBS进行稀释，病毒滴度为105.0TCID50/ml；JXA1灭活苗由某生物制品厂生产，强毒株为高致病性PRRS HuN4-F5，病毒滴度为3×105.0TCID50/ml。

1.2 试验设计

1.2.1 不同疫苗的免疫

试验选用4～5周龄的健康断奶仔猪25头随机分为3组（见表2.1），第1组5头为对照组，第2组10头为HuN4弱毒苗组，第3组10头为JXA1灭活苗组，HuN4弱毒苗组免疫方式为每头肌注1头份（1ml），JXA1灭活苗组免疫方式为每头肌注2 ml，免疫后21d，3个组全部进行攻毒，攻毒方式为每头滴鼻3ml。

试验开始前采集所有猪的血液，分离血清并储存于-20℃备用。实验开始后，分别于免疫后1、3、5、7、10、14、21d和攻毒后1、5、9、14、21d采集血液并分离血清，冻于-20℃备用。用于检测血清中PRRSV特异性抗体水平。

1.2.2 不同免疫方式的免疫

32 头仔猪分成4组，30日龄首免，58日龄二免。实验分组免疫情况（详见表1）。实验猪定期采血（58日龄、90日龄、165日龄前腔静脉采血）后分离血清，采用间接ELISA法检测蓝耳病抗体水平。蓝耳病抗体按试剂盒说明进行判定（IRPC值大于20为阳性）。抗体合格率大于等于70%为合格（农医发〔2010〕48号文件规定）

表1 仔猪分组免疫情况

1.3 数据分析

每组血清PRRSV特异的抗体水平IRPC值均以平均值±标准误（Means±SEM）表示。不同处理组的比较用单因素方差分析的LSD多重比较分析。P＜0.05为比较结果差异显著，P＜0.01为比较结果差异极显著。

2 结果与分析

2.1 不同疫苗免疫后血清中PRRSV特异性抗体的检测结果

HuN4弱毒苗组免疫后14d检测到抗体，但抗体水平较低，攻毒后抗体水平迅速升高，IRPC值最高达到126，攻毒后1d HuN4弱毒苗组血清中PRRSV特异抗体水平明显高于对照组和JXA1灭活苗组（P＜0.05）；JXA1灭活苗组在攻毒前没有产生抗体，但攻毒后抗体水平迅速升高，IRPC值最高达到141，攻毒后9d JXA1灭活苗组血清中PRRSV特异抗体水平明显高于HuN4弱毒苗免疫组和对照组（P＜0.05）；对照组攻毒后14d检测到抗体，抗体水平较低。

2.2 不同免疫方法蓝耳病抗体合格率

仔猪58、90、165日龄蓝耳病抗体合格率统计（详见表2）。表2说明：4个实验组58日龄、90日龄、165日龄时蓝耳病抗体合格率均未达到合格标准，但1、3组90日龄、165日龄合格率高于2、4组。

表2 猪蓝耳病血清抗体合格率统计表

3 讨论

（1）本实验中，HuN4弱毒苗免疫后14d便可检测到PRRSV特异性抗体，表明HuN4弱毒苗的免疫能够快速有效地激发机体的体液免疫反应，这与Tian等人（2009）的报道一致。JXA1灭活苗组免疫期间没有检测到PRRSV特异性抗体，说明JXA1灭活苗的免疫并不能激发机体的体液免疫反应。Nilubol，Platt和Harris（2004）报道灭活苗免疫后攻毒不能保护仔猪对PRRS病毒的感染，这与本文结果一致，因此灭活苗不适合仔猪免疫。本实验结果证明：HuN4弱毒疫苗免疫产生期快，能够快速有效地激发机体的体液免疫反应，比JXA1灭活苗能更快速有效地激发机体的免疫应答。

（2）4个组蓝耳病抗体水平，在58日龄、90日龄、165日龄时都未达到合格水平，但1、3组抗体水平明显高于2组、4组，说明猪蓝耳病进行2次免疫要好于只做1次免疫。这与华树明报道的蓝耳病抗体在首免后28d合格率为0，蓝耳病疫苗1次免疫的效果不佳，且2次免疫后经较长时间才能产生有效保护力是一致的，所以蓝耳病疫苗应尽可能进行2次免疫。

[1] 梁皓仪.不同蓝耳病疫苗的免疫效果—抗体效价分析[J].养猪，2008，（4）：70-72.

[2] 华树明.高致病性猪蓝耳病疫苗与口蹄疫、猪瘟疫苗同时分点注射对口蹄疫、猪瘟抗体效价的影响试验[J].浙江畜牧兽医，2008，（4）：6-7.