王林建，郭振华，乔松林，陈鑫鑫*，张改平*

(1.河南农业大学 生命科学学院，河南 郑州 450002； 2.河南省农业科学院 河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点开放实验室，河南 郑州450002)

河南地区NADC30-like PRRSV毒株的增殖特性与遗传进化分析

王林建1,2，郭振华2，乔松林2，陈鑫鑫2*，张改平1,2*

(1.河南农业大学 生命科学学院，河南 郑州 450002； 2.河南省农业科学院 河南省动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点开放实验室，河南 郑州450002)

为研究河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点和遗传变异情况，采集河南省滑县地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)发病猪场中的病料，经研磨、稀释、离心处理后将悬液上清接种于原代猪肺泡巨噬细胞，进行病毒分离培养，结果显示，PAM出现典型细胞病变效应，将得到的分离株命名为HNhx。应用PRRSV N蛋白的特异抗体进行间接免疫荧光(IFA)试验，结果表明，接种HNhx分离株的PAM出现特异性荧光，证明该分离株为PRRSV。应用RT-PCR技术对Nsp2区进行扩增分析，根据扩增目的产物大小推测HNhx分离株为NADC30-like毒株。遗传分析发现，与其他参考毒株相比，HNhx毒株的ORF3、ORF4和ORF5基因与NADC30毒株的同源性最高。基于ORF3、ORF4和ORF5序列构建进化树,系统进化分析的结果表明，HNhx归于NADC30-like亚群。

猪繁殖与呼吸综合征病毒； 分离； 鉴定； 序列分析

猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS),是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起的以妊娠母猪流产和各年龄段猪呼吸障碍为主要特征的传染病。上世纪80年代，该病首先出现在美国和加拿大，然后在全球范围内传播，成为全球猪病控制上的一大难题[1-2]。……