刘旭东，李静 ，柳太云

(1遵义市第一人民医院，贵州遵义563000；2贵州省人民医院)

羟基酪醇对H2O2损伤的神经细胞株PC12凋亡影响及其机制

刘旭东1，李静1，柳太云2

(1遵义市第一人民医院，贵州遵义563000；2贵州省人民医院)

目的观察羟基酪醇对过氧化氢(H2O2)损伤的神经细胞株PC12凋亡的影响，并探讨其作用机制。方法将第5代对数期PC12细胞分为对照组、H2O2组、观察组进行培养；对照组不加H2O2和羟基酪醇，H2O2组加H2O2，观察组加H2O2及羟基酪醇。细胞培养24 h，采用CCK8比色法测算各组细胞存活率，同时测定各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)和ROS，Hoechst 33258 荧光染色法测算细胞凋亡率，实时荧光定量PCR检测各组细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA，免疫印迹试验检测各组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白 ，酶联免疫吸附测定法测定各组IL-1β和TNF-α。结果与对照组相比，H2O2组细胞存活率降低(Plt;0.05)、细胞凋亡率上升(Plt;0.05)；与H2O2组相比，观察组细胞存活率上升(Plt;0.05)、细胞凋亡率降低(Plt;0.05)。与对照组相比，H2O2组LDH释放率和ROS水平升高(P均lt;0.05)；与H2O2组相比，观察组LDH释放率和ROS水平降低(P均lt;0.05)。与对照组相比，H2O2组Bax mRNA相对表达量升高(Plt;0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量降低(Plt;0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量升高(Plt;0.05)；与H2O2组相比，观察组Bax mRNA相对表达量降低(Plt;0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量升高(Plt;0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量降低(Plt;0.05)。与对照组相比，H2O2组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白表达量增加(P均lt;0.05)；与H2O2组相比，观察组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白表达量减少(P均lt;0.05)。与对照组相比，H2O2组TNF-α和IL-1β的水平升高(P均lt;0.05)；与H2O2组相比，观察组TNF-α和IL-1β的水平降低(P均lt;0.05)。结论羟基酪醇可抑制H2O2损伤的PC12细胞凋亡，其作用机制是防止LDH从细胞中释放并清除ROS、反向调节相关凋亡基因的表达，同时减少炎症靶蛋白和炎症因子的表达。

羟基酪醇；PC12细胞；神经细胞；……