陈春艳，马晖玲，董文科，杨江伟，李玉珠

(1.甘肃农业大学 草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中-美草地畜牧业可持续发展研究中心，甘肃 兰州 730070； 2.河南科技大学 农学院，河南 洛阳 471003；3.甘肃农业大学 生命科学院，甘肃 兰州 730070)

CPB-LAR-GFP表达载体的构建及其在紫花苜蓿愈伤组织中的表达

陈春艳1,2，马晖玲1，董文科1，杨江伟3，李玉珠1

(1.甘肃农业大学 草业学院/草业生态系统教育部重点实验室/甘肃省草业工程实验室/中-美草地畜牧业可持续发展研究中心，甘肃 兰州 730070； 2.河南科技大学 农学院，河南 洛阳 471003；3.甘肃农业大学 生命科学院，甘肃 兰州 730070)

以无色花青素还原酶编码基因LAR为靶序列，构建携带绿色荧光蛋白GFP和抗除草剂bar基因的双标记选择植物表达载体，通过农杆菌介导法对紫花苜蓿进行遗传转化，经PCR检测和PPT筛选出抗性愈伤组织，转基因紫花苜蓿愈伤组织的缩合单宁含量比对照高30.8%。试验证明重组基因已转化至紫花苜蓿愈伤组织中并发挥生理功能，为研究缩合单宁合成与代谢的分子调控机制和培育具有抗除草剂和抗臌胀病的牧草新品种奠定基础。

甘肃红豆草；无色花青素还原酶；抗除草剂；绿色荧光蛋白；紫花苜蓿；转化

紫花苜蓿(Medicagosativa)叶片中不含有缩合单宁[1,2]，反刍动物采食鲜嫩紫花苜蓿后会引起臌胀病。因此，含缩合单宁苜蓿新品种的培育和饲草组合利用被认为是解决采食紫花苜蓿引起牲畜臌胀病发生的两条途径。选育出遗传稳定的抗臌胀病苜蓿新品种无疑是牧草新品种培育者的首选途径。……