马 伟，王家敏，马桂兰，马 祺，马 花，乔自林，马忠仁，冯玉萍

(1.西北民族大学 甘肃省动物细胞工程技术研究中心，兰州 730030；2.兰州百灵生物技术有限公司，兰州 730010；3.西北民族大学 生物工程与技术国家民委重点实验室，兰州 730030)

Hi5-SF悬浮细胞系的建立及鉴定

马 伟1，王家敏1，马桂兰2，马 祺2，马 花1，乔自林1，马忠仁3，冯玉萍3

(1.西北民族大学 甘肃省动物细胞工程技术研究中心，兰州 730030；2.兰州百灵生物技术有限公司，兰州 730010；3.西北民族大学 生物工程与技术国家民委重点实验室，兰州 730030)

从中国典型培养物保藏中心(CCTCC)引进High Five细胞并对其进行驯化，获得无血清悬浮驯化株(Hi5-SF)。依据《中华人民共和国药典(2010年版三部)》对其进行细胞生物学特性研究、微生物污染、病毒外源因子及细胞致瘤性检测。结果发现，Hi5-SF细胞复苏活力76.3%，生长曲线呈“S”型，最大增殖密度可达3.50×106mL-1，群体倍增时间为26.2 h；细菌、真菌及支原体检查均为阴性；血细胞吸附试验、致细胞病变试验和特异性病毒荧光抗体结合物检查结果均为阴性；致瘤性检查结果也为阴性。说明该细胞株符合兽用疫苗生产用细胞质量要求，可以在疫苗研究与生产中应用。

High five细胞；悬浮培养；质量评价

粉纹夜蛾(Trichoplusiani)卵巢细胞株BTI-TN-5B1-4是20世纪90年代Robert R和李国勋等从粉纹夜蛾卵巢细胞系BTI-TN-5B1克隆得到的新型宿主细胞，Invitrogen公司注册商标为High Five细胞[1-2]。西北民族大学甘肃省动物细胞工程技术研究中心的High Five细胞引自中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，为淋巴母细胞样形态，半贴壁生长，培养液为Grace’s Insect Medium(含φ=10%的FBS)。High Five细胞对多……