崔丹瑶，孙 溪，高文萱

(1.农业部环境保护科研监测所，天津 300191；2.天津农学院 食品科学与生物工程学院，天津 300384；3. 天津市农副产品深加工技术工程中心，天津 300384)

施肥是对作物管理最具有影响力的方式之一[1]，土壤中不同群类微生物，如氨氧化细菌(Ammonia-oxidizing bacteria，AOB )，均受到不同施肥制度的影响[2]。氨氧化细菌作为土壤硝化作用的主要驱动者[3,4]，通过控制氨单加氧酶(amoA)的活性来影响硝化作用的亚硝化过程[5]，该过程是硝化作用的限速步骤[6]。硝化作用是土壤氮素循环的主要方式，也是氮素流失的潜在途径之一[7]，所以研究施肥对氨氧化细菌的影响是土壤微生物生态学的重要组成部分，氨氧化细菌也被称为土壤生态学的模式生物[8]。研究不同施肥条件下，土壤中氨氧化细菌群落结构多样性对于检测土地质量及作物的生产水平是极为重要的。

由于土壤中99%的微生物无法在实验室中培养[9]，所以学者们越来越热衷于通过分子生物学的方法来研究土壤中微生物的群落多样性。1997年Rotthauwe等[10]用PCR法扩增amoA基因,对氨氧化细菌的群落结构进行了研究。2012年，王亚男等[11]通过对amoA基因TRFLP-PCR与qPCR技术相结合的方法，研究了不同处理下AOB的群落组成和丰度的变化，得出了施肥类型和土壤层次均是影响AOB群落丰度和结构组成的重要因素的结论。2015年，周志成等[12]通过建立amoA克隆文库，研究在红壤蔬菜田上施加无机肥与有机肥等AOB和AOA的多样性，结论为有机肥比无机肥提高了AOB与AOA的多样性。

牛场肥水中含有大量的氮素资源[13]，而这些氮素资源常常得不到再循环利用，而是被排放到地下水中，造成水资源污染。……