王洋，周家华

(1.东南大学 医学院，江苏 南京 210009； 2.东南大学 附属中大医院，江苏 南京 210009)

外周和门静脉血中循环肿瘤细胞在胰腺癌诊治中的研究现状及应用前景

王洋1，周家华2

(1.东南大学 医学院，江苏 南京 210009； 2.东南大学 附属中大医院，江苏 南京 210009)

胰腺癌是恶性程度最高的肿瘤之一，早期诊断率及5年生存率低。目前胰腺癌循环肿瘤细胞检测技术繁多，其灵敏度和特异性不尽相同，外周血和门静脉血中循环肿瘤细胞数量及标志物表达对胰腺癌的诊断、预后具有提示作用。本文作者对外周和门静脉血中循环肿瘤细胞在胰腺癌诊治中的研究现状作一综述。

循环肿瘤细胞; 胰腺癌; 门静脉血; 检测; 预后； 综述

目前胰腺癌(pancreatic carcinoma，PC)是恶性程度最高的肿瘤之一，在西方国家为第四大癌症相关的主要死亡原因，其5年生存率仅为1%～4%，中位生存期为4～6个月[1]。尽管对无淋巴结侵犯的胰腺癌患者行外科手术切除可使其5年生存率提高至20%～25%，但大多数患者就诊时已存在肝脏或腹腔转移。腹部增强CT、磁共振等影像学检查是目前唯一可行的诊断方法，但无法显示<5 mm的微小病灶或转移灶。肿瘤标志物包括CA19- 9、CEA等，其敏感性及特异性均有限[2]，仅具备一定参考价值。而近来出现的循环肿瘤DNA(ctDNA)、外泌体(exosome)等血清学指标仍处于实验阶段，尚未投入临床应用。目前胰腺癌的早期诊断在技术上难以实现，但对肿瘤细胞的早期发现将有利于减缓肿瘤进展及病灶转移，降低患者死亡率。大量研究[3- 6]证实,肿瘤细胞存在于胰腺癌患者的外周血及门脉系统中。循环肿瘤细胞(circulating tumor cells， CTCs)是来源于原发肿瘤或转移灶、获得脱离细胞基底膜的能力并入侵通过组织基质进入血管的肿瘤细胞，其在肿瘤复发和转移过程中的作用逐渐得到重视。随着细胞检测及鉴定技术的发展，对外周血及门静脉中CTCs的检测使胰腺癌的早期诊断、化疗效果评估及预后判断成为可能。现就近年来胰腺癌CTCs的检测技术、研究现状及应用前景进行综述。

1 CTCs检测技术

1.1 分离和富集

CTCs与循环血细胞相比数量极少，在10 ml外周血中可能仅存在1～2个，而在同样体积血液中存在107的白细胞和超过1010的红细胞。因此对CTCs的分离须过滤掉血液中其他细胞的干扰，特定地筛选出这些数量稀少的肿瘤细胞。

1.1.1 物理富集方法

物理富集方法是根据CTCs与血细胞间密度、直径等物理性质不同而进行分离的方法，目前最常用的物理富集方法为密度梯度离心法及滤过膜分离法。……