王玉海，田艳群，吕啟忠

(1.湖南省张家界市永定区动物疫病预防控制中心，湖南张家界427000；2.湖南省张家界市永定区动物卫生监督所，湖南张家界427000)

近年来我省禽流感防控形势依然严峻，2016年我省发生14例H5疫情，2017年3月我省出现H7禽流感变异株和鸡感染H7禽流感疫情，与此同时，全国和我省H7N9人感染病例数、死亡数、流行范围不断增加，这使的活禽市场又被推上风口浪尖[1]。不管是出现人间H7N9流感病例，或是暴发家禽疫情，还是在实验室发现该病毒病原学阳性情况，兽医部门都需要开展紧急流感病学调查[2]。

为掌握永定区动物间H7N9流感疫情流行情况和查明疫情来源，永定区动物疫病预防控制中心会同区动物卫生监督所抽调技术人员立即开展紧急流行病学调查，采取现场调查与实验室相结合的方式，对全区家禽养殖场和城区活禽交易市场进行了调查和监测。现将有关情况报告如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品的来源及数量

检测样品均来自市城区活禽交易市场。3月29-30日在4个活禽交易市场进行随机采样，共采集血清样品51份、口腔和泄殖腔拭子51份、环境拭子106份。详见下表1

表1 城区部分活禽交易市场采样情况

1.1.2 主要试剂

荧光RT-PCR试剂为达安基因公司西安天隆核酸提取试剂盒（批号：E0111201A1）。血清学检测试剂生产单位为哈尔滨维科生物技术开发有限公司(诊断抗原批号为2016004，阳性血清批号为2016002)。

1.2 方法

1.2.1 实地调查法

3月29日至4月6日对全区家禽养殖场和市城区所有活禽交易市场通过现场询问、填写调查表、查阅销售台帐、检疫证明的方式进行调查，主要调查养殖场和市场家禽临床健康状况，活禽交易市场家禽来源，三清市场周边情况等。

1.2.2 实验室检测方法

血清学检测采用血凝抑制（HI）试验，血清学样本由桑植县兽医实验室检测血清中H7亚型禽流感病毒血凝素抗体，病原学检测采用荧光RT-PCR检测方法，口腔和泄殖腔拭子及环境拭子样本由长沙市兽医实验室运用荧光PCR进行H7N9病毒核酸检测。

1.2.3 结果判定

检测血清中H7亚型流感抗体，HI抗体水平≥24，判定为阳性。病原学检测采用荧光RT-PCR检测方法，结果判定按照试剂（盒）的使用说明进行。

2 结果

2.1 现场调查总体情况

患者胡某，男性，现年50岁，西溪坪街道办事处人，患者在三清农贸市场上从事蔬菜零卖。三清市场共有家禽经营户2户，一户是李某，一户是陈某，患者胡某的蔬菜摊位位于两个家禽经营户之间，距南边的李某约15米左右，与北边的陈某相毗邻。现场调查时李某存笼鸡45羽、鸭32羽，陈某存笼鸡60羽、鸭25羽，销售的家禽临床上没有发病死亡现象，主要销售给零散的市民，市民购买后现场宰杀。

全区24个乡镇58个家禽养殖场和14个活禽交易市场经走访调查，临床上未发现家禽流感症状和异常死亡现象。

2.2 病源追溯调查情况

永定城区共有农贸市场14个，家禽经营户37户，每月销售家禽近12万羽，通过查阅家禽批发商的检疫证明和销售台帐发现，市城区的家禽主要来自湖北监理、宁乡、桃源、石门等地，从外地调入家禽约占城区市场的90%左右。三清市场李某和陈某的家禽主要来自奇峰市场批发商邓和某、邓学某。家禽来源追溯情况见图1。

图1 永定区三清市场家禽来源追溯情况

2.3 实验室检测

3月29日到桑植县兽医实验室做血清学检测，所采样品检测结果均为阴性，3月31日将157份拭子(咽喉、泄殖腔拭子51份，环境拭子106份)送长沙市兽医实验室进行病原学检测，结果经营户李某摊位的11份环境拭子全部为阳性，其余146样品为阴性。详见表2。

表2 市城区部分家禽经销摊点抽样检测情况

3 分析与讨论

3.1 从实验室检测来看，李某摊位的11份环境拭子检测均为阳性，表明李某摊位存在H7N9流感病毒且环境污染严重。

3.2 本次疫源很有可能是从外地调运传播而来，调查发现，全区规模养殖场经排查没有发现疫情和异常死亡现象，同时调查发现3月31日永定区疾控中心在奇峰市场邓和某的环境拭子中检测到H7N9病毒核酸阳性，说明病源来自奇峰市场邓和某。而李某采购的家禽来自奇峰市场家禽批发商邓和某与邓学某，邓和某主要是从宁乡温氏集团和湖北监理温氏集团等地购进，故本次疫源很有可能是邓和某从外地调运引入的。

3.3 感染来源可能与活禽交易市场外环境病毒有关，患者胡某虽然没有直接接触家禽，但处在两个家禽经销摊位之间，暴露于致病因素之中。同时检测结果显示，本次H7N9流感疫情病原学阳性主要出现在市场环境中，市场活禽中并未检测到H7N9流感病毒阳性，这与永定区疾控中心监测的结果是一致的，因此，这表明患者的感染可能与市场环境暴露有关，外环境病毒可能是本次人感染H7N9流感病例的传染来源，这与韩光跃等[4]、戴梦[5]等研究结果一致。但患者感染的H7N9毒株与市场环境中检测到的H7N9毒株基因是否具有同源性有待于进一步研究。

3.4 疫情发生后，永定区人民政府采取了关闭全区活禽交易市场，并严格的清洗和消毒；对三清市场的家禽进行了扑杀和无害化处理，污染场所和用具进行彻底消毒，后来未发现家禽和人员感染情况。关闭城区内活禽交易市场、加强活禽交易市场的清洗消毒和监测等措施，是控制人感染H7N9流感疫情的有效措施。□

[1] 林源，王卫国，何世成，等.2016年湖南省活禽市场禽流感和新城疫监测与分析[C]//2016年湖南省动物疫病监测与分析.长沙：湖南省动物疫病预防控制中心，2017：40-47.

[2] 田召芳，李春蕾，党安坤，等.H7N9流感紧急流行病学调查中发现病毒抽样方案的制定与体会[J].中国动物检疫，2017，34（7）：25-27.

[3] 余平，熊英，李辉，等.江西省首例人感染H7N9流感病例的流行病学调查[J].现代预防医学，2014，41（8）：1351-1353.

[4] 韩光跃，李岩，刘艳芳，等.河北省人感染H7N9流感病例的流行病学调查与病原学分析[J].中国病原生物学杂志，2015，10（5）：435-438.

[5] 戴猛，蔡亚辉，黄一伟，等.岳阳市2例人感染H7N9禽流感病例的流行病学调查与外环境监测结果分析[J].实用预防医学，2015，22（2）：52-54.