鲍 腾， 陶 奔 综述， 郜玉峰 审校

(安徽医科大学第二附属医院 肝病科， 合肥 230601)

综述

慢性乙型肝炎患者抗病毒疗效预测指标的研究进展

鲍 腾， 陶 奔 综述， 郜玉峰 审校

(安徽医科大学第二附属医院 肝病科， 合肥 230601)

如何优化慢性乙型肝炎患者的抗病毒疗效一直是临床研究的热点，近年来关于疗效预测的研究逐渐增加，主要包括HBsAg、抗-HBc、cccDNA、乙型肝炎病毒核心相关抗原和HBV RNA定量对临床疗效的预测研究，对这些指标的预测效果进行了综述。

肝炎, 乙型, 慢性； 抗病毒药； 治疗结果； 综述

目前临床上用于慢性乙型肝炎(CHB)患者抗病毒治疗的药物主要是干扰素(IFN)与核苷和核苷酸类药物(NAs)。其中NAs停药后复发率高，且很难获得持久的免疫控制；IFN不良反应较大，且疗效有限[1]。如何采取个体化治疗以提高这两类抗病毒药物的疗效，如何评估停药后的复发概率，以及如何在停药后能早期预测复发风险，一直是近年来CHB患者抗病毒治疗方面的研究热点。因此，本文对早期疗效预测及停药时机判断等方面的进展进行综述如下。

1 CHB患者抗病毒治疗的停药标准

CHB患者接受抗病毒治疗后的停药标准是长期困扰临床医师的最大难题。CHB患者接受抗病毒治疗后即使按照指南标准停药后仍具有较高复发率。Seto等[2]曾对美国肝病学会指南推荐的HBeAg阴性患者的停药标准进行了验证，结果并不理想，随停药时间延长，病毒学复发率逐渐升高，24周和48周的累积复发率分别为74.2%和91.4%。因此，各国肝病学会也在临床实践中不断修订推荐的停药标准，以尽可能的降低CHB患者停药后的复发率。中国《慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)》[1]的停药标准已经修订为：HBeAg阳性患者需要达到HBeAg血清学转换后，再巩固治疗至少3 年仍保持不变，总疗程至少4年；对HBeAg阴性患者则需要达到HBsAg消失后再巩固治疗1 年半仍保持HBsAg消失。停药复发的原因有多种，目前临床上主要的停药指标如HBV DNA、HBeAg血清学转换等尚不能准确反映机体对HBV的免疫控制程度。因此，临床医生仍需要探索灵敏度和特异度更好的监测指标来确定CHB患者抗病毒治疗后的停药时机和降低停药后复发风险。

2 CHB患者抗病毒疗效的预测和监测指标

CHB患者疗效预测和监测的传统指标主要有ALT复常、HBV DNA阴转、HBeAg血清学转换[3]等。近年来，新的指标不断出现，受到临床医生重视的主要指标有血清HBsAg和HBeAg定量、抗-HBc定量、cccDNA定量、HBV核心相关抗原(HBcrAg)定量、超灵敏HBV DNA和HBV RNA等。进一步提高了CHB患者抗病毒疗效预测和监测效果，值得扩大样本量进一步验证其价值。

2.1 血清HBsAg定量 CHB患者血清HBsAg水平与肝内cccDNA关系密切，其可以反映肝组织内cccDNA水平[4]。血清HBsAg的下降与肝内HBV DNA或cccDNA的下降速度平行，可以在一定程度上反映肝脏组织中cccDNA的清除[5]。研究[6]显示，免疫清除期的CHB患者血清HBsAg水平与肝组织中cccDNA有较好的相关性，但在免疫耐受期患者与低病毒复制期患者中两者的相关性较差。大量研究已经证实，CHB患者血清HBsAg水平在判断慢性HBV感染的自然史、预测聚乙二醇干扰素(PEG-IFN)和NAs抗病毒疗效以及确定停药时机方面具有重要价值。对于接受PEG-IFN治疗的患者，用药12周时HBsAg不下降则预示IFN抗病毒治疗应答不佳，应停止治疗[7]。另外有研究发现，CHB患者停药时HBsAg水平是预测停药后复发的强独立预测因子。Chen等[8]回顾性分析使用拉米夫定治疗52～243(89.3±35.9)周并停药后随访1年以上的初治CHB患者，Cox回归分析显示停药时HBsAg水平较高、年龄大和男性是治疗结束后乙型肝炎复发的独立预测因子，而停药时患者血清HBsAg水平是CHB患者停药复发的最强预测因子，停药时患者血清HBsAg水平<300 IU/ml时，HBeAg阳性患者中有55.6%实现HBsAg清除，而HBeAg阴性患者HBsAg<120 IU/ml时，可以预测有79.2%的HBsAg清除。另一项关于恩替卡韦初治患者停药后的研究[9]也得出类似结论，HBeAg血清转换后HBsAg<250 IU/ml且年龄<50岁的患者复发率只有5%，并且52.4%的患者可以在停用恩替卡韦后维持HBsAg<200 IU/ml。Hosaka等[10]研究显示，开始NAs治疗6个月时HBsAg快速下降的CHB患者，不论HBeAg阳性或阴性都有着较高的HBsAg消失率。国内Cai等[11]研究显示，HBsAg水平<2 log10IU/ml的患者在停止替比夫定治疗后有93%的可能维持治疗后的持续HBeAg血清学转换。

在IFN治疗方面，国内张楠等[12]研究显示，IFN治疗6个月时患者血清HBsAg下降>0.5 log10IU/ml的CHB患者ALT复常率、HBeAg阴转率和HBeAg血清学转换率均高于下降<0.5 log10IU/ml的患者，差异具有统计学意义。Piratvisuth等[13]研究显示，HBeAg阳性CHB患者接受PEG-IFNα-2a单药或联合拉米夫定治疗48周，治疗24周时HBsAg<1500 IU/ml的患者完成48周疗程后，停药随访24周时的HBeAg血清学转换率为54.4%，而治疗24周时HBsAg>20 000 IU/ml的患者，停药随访24周时的HBeAg血清转换率仅有15.4%。在NAs经治患者序贯IFN治疗方面，国内Ning等[14]在恩替卡韦治疗后序贯PEG-IFN治疗的研究中同样发现，开始序贯IFN治疗时HBsAg水平<1500 IU/ml是预测HBsAg消失和HBeAg血清学转换的最佳截断值，基线HBeAg消失且HBsAg<1500 IU/ml 的患者可实现33.3%的HBeAg血清学转换及22.2%的HBsAg消失率，而开始序贯治疗12周时HBsAg<200 IU/ml能获得77.8%的HBsAg消失率和66.7%的HBeAg血清学转换率。

2.2 血清抗-HBc定量 HBcAg是HBV的结构蛋白，存在于病毒Dane颗粒的核心，具有高度的免疫原性，感染HBV的患者几乎均会产生抗-HBc。随着双抗原夹心法检测试剂的应用，慢性HBV感染者血清中总的抗-HBc水平已经可以定量检测。Song等[15]通过对HBV感染康复者、隐匿性HBV感染者和CHB患者的检测发现，慢性HBV感染者的抗-HBc水平显著高于HBV感染康复患者和隐匿性感染者，说明HBV抗原是刺激和维持抗-HBc水平的重要因素，HBV感染康复者因为体内已经无抗原存在，因此抗体水平较低，而慢性HBV感染者因为病毒抗原的持续存在使得免疫应答持续存在，致抗-HBc的水平随之持续升高，另外，该研究还发现，ALT升高的慢性HBV感染者血清抗-HBc水平显著高于ALT正常的慢性HBV感染者，提示抗-HBc水平能反映机体的抗病毒免疫状态。抗-HBc水平除可以反映HBV 感染在体内自然史和肝脏炎症活动度以外，最新研究[16-17]进一步证实，基线抗-HBc 水平有助于预测HBeAg阳性患者NAs及IFN疗效，是CHB患者接受抗病毒治疗后是否发生HBeAg血清学转换的最佳预测因子，从而达到对患者进行优化抗病毒治疗的目的。王贵强教授等[16]开展了一项多中心双盲HBeAg阳性患者接受PEG-IFN治疗48周并随访24 周的随机对照研究，发现多个基线指标预测72周治疗应答的多变量logistic回归分析显示，唯有基线抗-HBc水平与HBeAg血清学转换、病毒学应答及联合应答独立相关。同时发现基线抗-HBc水平≥30 000 IU/ml者HBV DNA及HBeAg水平抑制更显著。采用基线抗-HBc定量联合ALT预测疗效，结果发现无论ALT是否>5倍正常值上限，基线抗-HBc水平越高，血清学及病毒学应答率越高。Hou等[17]研究同样发现，基线抗-HBc水平对IFN和NAs的疗效有预测价值，超过一些传统指标，使用IFN治疗的HBeAg阳性患者，如果基线抗-HBc水平>4.4 log10IU/ml且HBV DNA水平<9 log10拷贝/ml，那么有65.8%的患者可以实现HBeAg血清学转换。对于使用替比夫定、恩替卡韦治疗的HBeAg阳性CHB患者，基线抗-HBc水平高，HBV DNA水平低，有37%的患者实现HBeAg血清学转换。血清抗-HBc定量有望成为CHB患者接受抗病毒治疗后判断停药时机及停药后是否易于复发的疗效预测指标[18]。

2.3 cccDNA 定量 cccDNA的形成是HBV复制周期中的最关键环节。只要肝细胞中仍存在cccDNA，在病毒抑制状态被解除后就有可能再次复制活跃，因此，被认为是CHB患者停用抗病毒治疗药物后复发的最主要原因[19]。只有完全清除肝细胞内cccDNA才会使患者停药后复发的几率降到最低，因此，在停药前明确患者体内的cccDNA水平对减少停药后复发具有重要意义。另外，大量研究[20-21]表明，肝细胞内的cccDNA水平与血清cccDNA及HBsAg水平具有显著相关性，这与目前研究显示HBsAg水平越低的患者停药后复发概率越低相一致。近年来，随着以选择性实时荧光PCR 技术为代表的cccDNA定量检测技术的发展，cccDNA检测已经逐渐具备开展条件。监测肝细胞内HBV cccDNA能更好的反映机体免疫状态对病毒的真实控制情况，为抗病毒治疗终点的选择提供客观和准确的依据，但目前主要受限于检测需要通过肝组织检查提供样本，患者接受度不高[22]。

2.4 HBcrAg定量 研究[23]显示通过化学发光酶免疫分析技术检测HBcrAg能有效间接反映肝内cccDNA水平变化，对CHB患者抗病毒治疗后病毒反弹及耐药情况监测有重要价值。Matsumoto等[24]发现，HBcrAg<3.0 log10U/ml的CHB患者停用NAs 1年后HBcrAg水平逐渐升高，HBV复制水平也逐渐增高。Chuaypen等[25]研究显示，在接受PEG-IFN 48周治疗的患者中，治疗12周时HBcrAg下降迅速的患者在24周时出现HBeAg清除的比例高于下降缓慢的患者，以8.0 log10U/ml为截断值，24周HBeAg清除的阴性预测值可以达到100%。国内Ma等[26]的研究结果也显示，与治疗前相比，在48周治疗结束时HBcrAg下降>0.565 log10kU/ml，随访24周结束时HBeAg血清学转换的阴性预测值为100%。HBcrAg水平可以间接反映肝组织内cccDNA水平，有助于减少肝穿刺的风险和创伤，因此，HBcrAg可以作为一项针对CHB患者接受抗病毒治疗后动态观察病情变化实用而有效的监测手段。

2.5 HBV RNA定量 研究[27]发现，在慢性HBV感染者的血清中可以检测到HBV RNA，而且血清HBV RNA和肝组织中的cccDNA水平密切相关，可以用来判断NAs和IFN的疗效。在NAs治疗期间，HBV RNA的下降是HBeAg血清学转换的独立预测因子[28]。Hatakeyama等[29]对接受恩替卡韦和拉米夫定治疗的患者分析发现：在1年内发生YMDD变异的患者血清HBV RNA水平的中位数显著高于治疗1年后发生或从未发生过YMDD变异的患者。表明在拉米夫定治疗过程中，HBV RNA水平是一个有价值的预测病毒变异的因子。van Bömmel等[30]收集了62例慢性HBV感染者，其中HBeAg阳性50例，接受抗病毒治疗的平均时间为30个月。研究结果显示，相比于HBV DNA、HBsAg、ALT、HBV 基因型、年龄和性别，治疗3个月和6个月后的HBV RNA下降水平最能预测HBeAg血清学转换。验证了在使用聚合酶抑制剂治疗的乙型肝炎患者中，早期的HBV RNA下降与随后的HBeAg血清学转换相关，即血清HBV RNA的动态变化可预测治疗效果。

3 展望

随着CHB患者抗病毒药物的广泛使用，临床医生需要更精确的临床实验室检测指标来评估患者的临床疗效和判断如何安全停药，因此，这些新应用于临床的实验室检测指标需要进一步研究以更好的改善其敏感性和特异性。只有临床上有更好的疗效预测和监测指标，才能更好的为CHB患者提供更精确的个体化抗病毒方案。

[1] Chinese Society of Hepatology and Chinese Society of Infectious Diseases, Chinese Medical Association. The guideline of prevention and treatment for chronic hepatitis B: a 2015 update[J]. J Clin Hepatol, 2015, 31(12): 1941-1960. (in Chinese)

中华医学会肝病学分会, 中华医学会感染病学分会. 慢性乙型肝炎防治指南(2015年更新版)[J]. 临床肝胆病杂志, 2015, 31(12)： 1941-1960.

[2] SETO WK, HUI AJ, WONG VW, et al. Treatment cessation of entecavir in Asian patients with hepatitis B e antigen negative chronic hepatitis B: a multicentre prospective study [J]. Gut, 2015, 64(4): 667-672.

[3] ZHAO SQ, YANG XW, LIU B, et al. Analysis of clinical characteristics between HBeAg-negative and HBeAg-positive patients with chronic hepatitis B[J]. Int J Virol, 2016, 23(1): 29-31. (in Chinese)

赵树巧, 杨宪武, 刘冰, 等. HBeAg阴性与阳性慢性乙型肝炎患者的临床特征对比分析[J]. 国际病毒学杂志, 2016, 23(1): 29-31.

[4] LI WJ, LI BA, ZHAO JM, et al. Quantitative analyses of intrahepatic HBV cccDNA and serum HBsAg in 54 patients with chronic hepatitis B[J]. Chin J Hepatol, 2011, 19(11): 815-817. (in Chinese)

李韦杰, 李伯安, 赵景民, 等. 54例慢性乙型肝炎患者肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA与血清HBsAg定量检测结果分析[J]. 中华肝脏病杂志, 2011, 19 (11): 815-817.

[5] NIU ZL, ZHU X, SHEN WQ, et al. Study on influence of interferon on changes of HBV cccDNA in hepatocytes and serum HBsAg and HBV DNA of patients with chronic hepatitis B [J]. Chin J Nosocomio, 2014, 24(4): 792-795. (in Chinese)

钮志林, 朱翔, 沈伟强, 等. 干扰素对慢性乙型肝炎患者肝细胞内HBV cccDNA、血清HBsAg、HBV DNA的影响研究[J]. 中华医院感染学杂志, 2014, 24(4): 792-795.

[6] LI W, ZHAO J, ZOU Z, et al. Analysis of hepatitis B virus intrahepatic covalently closed circular DNA and serum viral markers in treatment-naive patients with acute and chronic HBV infection[J]. PLoS One, 2014, 9(2): e89046.

[7] SONNEVELD MJ, RIJCKBORST V, BOUCHER CA, et al. Prediction of sustained response to peginterferon alfa-2b for hepatitis B e antigen-positive chronic hepatitis B using on-treatment hepatitis B surface antigen decline [J]. Hepatology, 2010, 52: 1251-1257.

[8] CHEN CH, LU SN, HUNG CH, et al. The role of hepatitis B surface antigen quantification in predicting HBsAg loss and HBV relapse after discontinuation of lamivudine treatment [J]. J Hepatol, 2014, 61(3): 515-522.

[9] QIU YW, HUANG LH, YANG WL, et al. Hepatitis B surface antigen quantification at hepatitis B e antigen seroconversion predicts virological relapse after the cessation of entecavir treatment in hepatitis B e antigen-positive patients [J]. Int J Infect Dis, 2016, 43: 43-48.

[10] HOSAKA T, SUZUKI F, KOBAYSHI M, et al. Clearance of hepatitis B surface antigen during long-term nucleot(s)ide analog treatment in chronic hepatitis B: results from a nine-year longitudinal study [J]. J Gastroenterol, 2013, 48: 930-941.

[11] CAI W, XIE Q, AN B, et al. On-treatment serum HBsAg level is predictive of sustained off-treatment virologic response to telbivudine in HBeAg-positive chronic hepatitis B patients[J]. J Clin Virol, 2010, 48(1): 22-69.

[12] ZHANG N, YAN XB, HAO JG, et al. Changes and clinical significance of quantitative hepatitis B surface antigen in patients with chronic hepatitis B receiving interferon therapy[J/CD]. Chin J Exp Clin Infect Dis： Electronic Edition, 2016, 10(2): 146-150. (in Chinese)

张楠, 颜学兵, 郝俊贵, 等. HBsAg定量在慢性乙型肝炎患者干扰素抗病毒治疗中的变化及临床意义[J/CD]. 中华实验和临床感染病杂志： 电子版, 2016, 10(2): 146-150.

[13] PIRATVISUTH T, MARCELLIN P, POPESCU M, et al. Hepatitis B surface antigen: association with sustained response to peginterferon alfa-2a in hepatitis B e antigen-positive patients[J]. Hepatol Int, 2013, 7(2): 429-436.

[14] NING Q, HAN M, SUN Y, et al. Switching from entecavir to PegIFN alfa-2a in patients with HBeAg-positive chronic hepatitis B: a randomised open-label trial (OSST trial) [J]. J Hepatol, 2014, 61(4): 777-784.

[15] SONG LW, LIU PG, LIU CJ, et al. Quantitative hepatitis B core antibody levels in the natural history of hepatitis B virus infection[J]. Clin Microbiol Infect, 2015, 21(2): 197-203.

[16] YUAN Q, SONG LW, LIU CJ, et al. Quantitative hepatitis B core antibody level may help predict treatment response in chronic hepatitis B patients[J]. Gut, 2013, 62(1): 182-184.

[17] HOU FQ, SONG LW, YUAN Q, et al. Quantitative hepatitis B core antibody level is a new predictor for treatment response in HBeAg positive chronic hepatitis B patients receiving peginterferon [J]. Theranostics, 2015, 5(3): 218-226.

[18] FAN R, SUN J, YUAN Q, et al. Baseline quantitative hepatitis B core antibody titre alone strongly predicts HBeAg seroconversion across chronic hepatitis B patients treated with peginterferon or nucleos(t)ide analogues[J]. Gut, 2016, 65(2): 313-320.

[19] LU HY, ZHUANG LW, YU YY, et al. Effects of antiviral agents on intrahepatic cccDNA in HBeAg-positive chronic hepatitis B[J]. Chin J Hepatol, 2008, 16(3): 198-202. (in Chinese)

陆海英, 庄立伟, 于岩岩, 等. 抗病毒药物对肝组织乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA的影响 [J]. 中华肝脏病杂志, 2008, 16(3): 198-202.

[20] WERLE-LAPOSTOLLE B, BOWDEN S, LOCARNINI S, et al. Persistence of cccDNA during the natural history of chronic hepatitis B and decline during adefovir dipivoxil therapy [J]. Gastroenterology, 2004, 126(7): 1750-1758.

[21] LARAS A, KOSKINAS J, DIMOU E, et al. Intrahepatic levels and replicative activity of covalently closed circular hepatitis B virus DNA in chronically infected patients[J]. Hepatology, 2006, 44(3): 694-702.

[22] ZHONG Y, HAN J, ZOU Z, et al. Quantitation of HBV covalently closed circular DNA in micro formalin fixed paraffin-embedded liver tissue using rolling circle amplification in combination with real-time PCR [J]. Clin Chim Acta, 2011, 412(21-22): 1905-1911.

[23] KIMURA TA, ROKUHARA Y, SAKAMOTO S, et al. Sensitive enzyme immunoassay for hepatitis B virus core-related antigens and their correlation to virus load[J]. J Clin Microbiol, 2002, 40(2): 439-445.

[24] MATSUMOTO A, TANAKA E, SUZUKI Y, et al. Combination of hepatitis B viral antigens and DNA for prediction of relapse after discontinuation of nucleos(t)ide analogs in patients with chronic hepatitis B[J]. Hepatol Res, 2012, 42(2): 139-149.

[25] CHUAYPEN N, POSUWAN N, PAYUNGPORN S, et al. Serum hepatitis B core-related antigen as a treatment predictor of pegylated interferon in patients with HBeAg- positive chronic hepatitis B[J]. Liver Int, 2016, 36(6): 827-836.

[26] MA H, YANG RF, LI XH, et al. HBcrAg identifies patients failing to achieve HBeAg seroconversion treated with pegylated interferon alfa 2b[J]. Chin Med J, 2016, 129: 2212-2219.

[27] HUANG YW, CHAYAMA K, TSUGE M. Different effects of interferon and lamivudine on serum HBV DNA inhibition in patients with chronic hepatitis B[J]. Antiviral therapy, 2010, 15: 177-184.

[28] JANSEN L, KOOTSTRA NA, VANDORT KA, et al. Hepatitis B Virus pregenomic RNA is present in virions in plasma and is associated with a response to pegylated interferon alfa-2a and nucleos(t)ide analogues[J]. J Infect Dis, 2016, 213(2): 224-232.

[29] HATAKEYAMA T, NOGUCHI C, HIRAGA N, et al. Serum HBV RNA is a predictor of early emergence of the YMDD mutant in patients treated with lamivudine[J]. Hepatology, 2007, 45(5): 1179-1186.

[30] van BÖMMEL F, BARTENS A, MYSICKOVA A, et al. Serum hepatitis B virus RNA levels as an early predictor of hepatitis B envelope antigen seroconversion during treatment with polymerase inhibitors[J]. Hepatology, 2015, 61(1): 66-76.

ResearchadvancesinpredictiveindicesforantiviraleffectinpatientswithchronichepatitisB

BAOTeng,TAOBen,GAOYufeng.

(DepartmentofHepatology,TheSecondAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniversity,Hefei230601,China)

Optimization of antiviral effect in patients with chronic hepatitis B has always been a hot topic of clinical research. In recent years, more and more studies have focused on the prediction of antiviral effect, including the values of HBsAg, anti-HBc, covalently closed circular DNA, HBcrAg, and HBV RNA quantitation in predicting antiviral effect. This article reviews the predictive values of these markers.

hepatitis B, chronic； antiviral agents； treatment outcome； review

R512.62

A

1001-5256(2017)10-1997-04

10.3969/j.issn.1001-5256.2017.10.032

2017-05-02；

2017-06-03。

安徽省自然科学基金(1608085MH164)

鲍腾(1994-)，男，主要从事病毒性肝炎的临床研究。

郜玉峰，电子信箱： aygyf@126.com。

引证本文：BAO T, TAO B, GAO YF. Research advances in predictive indices for antiviral effect in patients with chronic hepatitis B[J]. J Clin Hepatol, 2017, 33(10): 1997-2000. (in Chinese)

鲍腾, 陶奔, 郜玉峰. 慢性乙型肝炎患者抗病毒疗效预测指标的研究进展[J]. 临床肝胆病杂志, 2017, 33(10): 1997-2000.

(本文编辑：朱 晶)