熊林波 白 洁 刘 双

（绵阳市中心医院康复医学科，四川绵阳 646000）

骨关节炎（Osteoarthritis，OA），曾被命名为肥大性骨节炎，萎缩性关节炎，骨关节病等，后随着认识的加深又称其为退化性关节炎[1]。引起OA的因素一般认为跟年龄，性别，遗传，发育，代谢以及一些创伤有关。老年人群中发病较多，女性多于男性[2]。OA主要累及滑膜关节，临床以膝关节OA多见。细胞因子作为生理活动的直接参与者和调控者自然成为了研究的热点，转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）就是其中备受关注的细胞因子之一。本实验通过对比治疗前后关节液中TGF-β1浓度变化探讨电针对膝关节OA的治疗机制，结果如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

40名患者均来自本院康复针灸门诊，其中男17例，女23例，年龄44～68岁，病程最短5个月，最长8年，平均3.2年。采用随机数字表发分为对照组及电针治疗组。

1.2 诊断标准

参照1995年美国风湿病协会骨关节炎诊断标准：（1）近1月大多数时间有膝关节疼痛；（2）X摄片有骨赘形成；（3）关节液检查符合骨关节炎；（4）年龄≥38岁；（5）晨僵≤ 30 min；（6）有骨摩擦音。具备（1）（2）或（1）（3）（5）（6）或（1）（4）（5）（6）即可诊断为骨关节炎。

1.3 纳入标准

符合上述骨关节炎诊断标准，患者最近3月内未进行过膝关节针灸治疗及其他针对OA的对症治疗。

1.4 排除标准

（1）合并有感染或发热的患者；（2）关节明显畸形或出现关节强直的患者；（3）合并其他关节疾病或关节损伤的患者；（4）合并严重心脑血管疾病患者；（5）年龄＞70岁，病程＞10年；（6）不能耐受针灸及治疗依从性差者；（7）精神异常者。

2 方法

2.1 关节液抽取

两组患者均在入选后即抽取关节灌洗液。抽出的关节灌洗液分别注入EP管，编号对应，于-70℃冰冻保存待测。

2.2 电针治疗

电针治疗组取“梁丘”、“内膝眼”、“血海”、“犊鼻”、“阿是穴”进针后，连上电针仪，选择4 Hz疏波，20 Hz密波，脉冲宽度0.5 ms，1次/d，每次20 min，连续治疗10天。除此之外不行其他治疗。对照组不行任何治疗，仅作为疗效对照。10 d治疗后，再次行关节液冲洗液的抽取。

2.3 TGF-β1的检测

本实验采用双抗夹心ABC-ELISA法检测关节液中的TGF-β1浓度。具体实验步骤按照试剂盒说明标准ELISA进行，检测记录吸光值（OD值）

2.4 计算结果

所有OD值减除去空白值后再计算结果。以标准品2 000、1 000、500、250、125、62.5、31.2、0 pg/mL 为横 坐标，OD值为纵坐标，画出标准曲线。再根据所测样品的OD值在标准曲线上查出相应TGF-β1浓度。所得数据进行组间t检验。

2.5 数据分析

所有数据以均数±标准差（x±s）表示，用SPSS 17.0对治疗前后两组患者膝关节液中TGF-β1浓度数据进行t检验。

3 结果

对治疗后两组数据进行t检验差异有统计学意义（P＜0.05），各组治疗前后数据进行t检验分析，对照组治疗前后TGF-β1含量差异无统计学意义（t=0.86，P＞0.05）。电针治疗组治疗前后TGF-β1含量差异有统计学意义（t=22.70，P＜ 0.05），见表1。

表 1 两组患者膝关节液中TGF-β1浓度比较（x±s）

4 讨论与结论

4.1 骨关节炎

OA是机械性和生物性因素相互作用，使关节软骨细胞、细胞外基质和软骨下骨合成与降解的正常进行失去平衡的结果，病理学上则主要表现为滑膜的炎症，软组织的纤维化，软骨的侵蚀以及软骨下骨硬化，骨赘形成等[3]。引起OA的因素太多，其中涉及到许多细胞类型，细胞外基质，细胞因子，信号通路，基因表达的改变，比如受体配体途径：TGF-β1，WNT3a等；信号肽分子：转化生长因子-β信号蛋白（Smads），β-catenin，HIF-2a等；酶类：基质金属蛋白酶13（MMP13），ADAMTS4/5等[4]。有研究指出关节软骨细胞是OA发病的主要细胞介质，这也是导致OA关节软骨退化明显而滑膜炎症相对局限的主要原因[5]。

4.2 电针治疗对膝关节OA的作用

从生理学上来看，电针通过低频脉冲电流刺激穴位，使肌肉一收一缩，起到泵的作用，从而改善局部血液循环，有利于渗出液的吸收，有利于关节面软骨的修复[6]。本实验采用的是G9805-C型低频电子脉冲治疗仪，参数选择4 Hz疏波，20 Hz密波，脉冲宽度0.5 ms，每天治疗一次，每次20 min，总共治疗10 d。这也是目前临床电针治疗各种疼痛性疾病常采用的方案之一。

4.3 TGF-β1表达的变化

TGF-β1是一种同源二聚体蛋白，分子量约为25 kD，有耐热，抗酸，碱的特性。在OA关节中，滑膜的衬里细胞分泌的TGF-β1比其他部位要多[7]，在骨赘中，TGF-β1则过度表达[8]。在生理状态下，TGF-β1的表达很少，在OA中TGF-β1则过度表达。造成TGF-β1过度表达的原因很多，一方面是软骨损伤的生理需求增加，另一方面是OA中的一些炎性细胞因子能刺激TGF-β1过度表达。有实验就证实IL-1β能通过激活与TGF-β1基因启动子连接的AP-4，AP-1而使TGF-β1过度表达[9]。

本实验在治疗前对照组和电针组的TGF-β1表达无差异，治疗后对照组TGF-β1的表达与治疗前相比未出现明显变化（P＞0.05）。电针组治疗后，与本组治疗前及对照组比较均有统计学差异（P＜0.05），说明电针确实能降低膝OA关节液中TGF-β1的异常表达，达到了治疗目的。

[1] 张静，张为.骨关节炎的诊断与治疗进展[J].现代康复，2001；5（3）：14-16.

[2] 李儒军，林剑浩.骨关节炎流行病学的研究进展[J].中国临床医生，2010；38（7）：6-10.

[3] Anna Plaas，Jun Li，Julie Riesco，et al. Intraarticular injection of hyaluronan prevents cartilage erosion，periarticular fibrosis and mechanical allodynia and normalizes stance time in murine knee osteoarthritis[J].Arthritis Res Ther，2011；13（2）：R46.

[4] Wang M，Shen J，Jin H，et al. Recent progress in understanding molecular mechanisms of cartilage degeneration during osteoarthritis[J]. Ann N Y Acad Sci，2011；1240：61-69.

[5] Goldring MB，Goldring SR. Osteoarthritis[J]. J Cell Physiol，2007；213（3）：626-634.

[6] 周光辉.电针疗法缓解膝关节骨关节炎疼痛的疗效[J].中国临床康复，2004；8（20）：4082.

[7] Bakker AC，van de Loo FA，van Beuninqen HM，et al.Overexpression of active TGF-beta-1 in the murrine knee joint：evidence for synovial-layer-dependent chondroosteophyte formation[J]. Osteoarthritis Cartilaqe，2001；9（2）：128-136.

[8] Verdier MP，Seité S，Guntzer K，et al. Immunohistochemical analysis of transforming growth factor beta isoforms and their receptors in human cartilage from normal and osteoarthritic femoral heads[J]. Rheumatol Int，2005；25（2）：118-124.

[9] Andriamanalijaona R，Felisaz N，Kim SJ，et al. Mediation of interleukin-1 beta-induced transforming growth factor beta 1 expression by activator protein 4 transcription factor in primary cultures of bovine articular chonrocytes：possible cooperation with activator protein1[J]. Arthritis Rheum，2003；48（6）：1569-1581.