熊亚琴

（江苏省淮安生物工程高等职业学校，江苏 淮安 223200）

乒乓菊属菊科植物有黄、绿、白3种颜色，常作为鲜切花或者盆花使用，黄色乒乓菊造型讨巧、可爱，而且保鲜时期较长，一般可有20d以上的赏花期深受大众喜爱。由于圆形的乒乓菊象征着“圆满”，而黄色乒乓菊能搭配许多不同花材，具有较好的市场前景。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试材料取自淮安生物工程高等职业学校菊花黄乒乓栽培基地，剪取当年生健壮枝条的顶芽或者腋芽。

1.2 材料处理

黄乒乓栽培过程中，植株表面杂菌较多，外植体表面灭菌起到至关重要的作用。剪取母株中上部带有腋芽或顶芽的茎段作为外植体，茎段长0.5～1cm，在自来水下冲洗干净，放于操作台上消毒备用。消毒材料75%的酒精、0.1%升汞、马克吐温，采用茎段接种。

1.3 诱导分化

经表面灭菌的外植体接种在含有不同浓度KT、IAA的MS 培养基上：（1）MS+KT 4.0mg/L+IAA0.2mg/L；（5）MS+KT 5.0mg/L+IAA0.2mg/L；（3）MS+KT6.0mg/L+IAA0.2mg/L；（4）MS+KT7.0mg/L+IAA0.3mg/L；（2）MS+KT 8.0mg/L+IAA0.3mg/L。每组接种30个带芽茎段，并置于121℃高压蒸汽灭菌锅灭菌25min。培养条件：光照 10～12h/d，温度（25±1）℃，20d左右观察统计不同处理对不定芽诱导的影响，并筛选出最佳诱导培养基。

2 结果与分析

2.1 消毒时间对外植体灭菌效果的影响

表1 消毒时间外植体灭菌效果的影响

由表1可以看出，不同的消毒时间对外植体灭菌效果不同，3号灭菌效果最好。但由于酒精消毒时间稍长，有部分外植体没能正常分化生长，导致成活率较低，因此，综合来看2号效果最好。将处理过的外植体先用75%酒精灭菌30s后冲洗2遍，然后用0.1%升汞+1滴马克吐温灭菌7min，同时不停搅拌，冲洗5～6遍备用。

2.2 不定芽的诱导

表2 不同激素浓度对不定芽诱导的影响

由表2可以看出，KT浓度的高低对不定芽的形成有一定的影响，但一定范围内诱导率较高，IAA浓度在一定范围内对生长速度有一定影响。同时，1号培养基能够较好诱导不定芽，形成愈伤组织且诱导率较高，外植体接种后1周便有愈伤组织发生，随着进一步的培养，形成较多的绿色丛生芽且比较疏松，生长状态良好。

1 李秀霞，李艳波，岳中辉.植物组织培养[M].哈尔滨：哈尔滨出版社，2002

2 建德锋，赵文若，赵海锋等.菊花组织培养技术研究[J].北方园艺，2007

3 牟宁宁.组织培养新技术在菊花组织培养中的应用研究[D].北京：北京林业大学，2007