苍小鑫，赵小明，钟润涛，王文霞，尹 恒，朱靖博，丁 燕



基于液滴微流控的壳寡糖植物免疫诱导剂荧光检测

苍小鑫1,2，赵小明2，钟润涛3，王文霞2，尹 恒2，朱靖博1，丁 燕1※

（1. 大连工业大学食品学院，大连 116034；2. 中国科学院大连化学物理研究所，大连 116023；3. 大连海事大学环境科学与工程学院，大连 116026）

为了建立基于液滴微流控芯片平台的植物免疫诱导剂的荧光信号检测技术，该文设计制作了具有液滴生成结构的芯片，制备包裹烟草（BY-2）细胞的液滴，并对包裹了细胞的液滴数目进行统计分析。将包裹细胞的液滴孵育一氧化氮探针后使用质量浓度为50g/mL壳寡糖处理，在荧光显微镜下观测其产生的荧光，利用荧光酶标仪对比采用96孔板和液滴承载的细胞的荧光变化趋势。结果显示，水相流速为100L/h，油相流速为300L/h时，微流控芯片产生的液滴尺寸适合包裹细胞，其中液滴包裹单细胞的比例达22.9%。经壳寡糖处理后的细胞在生成的液滴中产生了明显的荧光，且用96孔板和液滴承载的细胞的荧光变化趋势一致。研究结果为开发基于液滴微流控技术的植物免疫诱导剂的高通量筛选平台提供参考。

微流控；包裹；荧光；植物免疫诱导剂；烟草细胞；壳寡糖

0 引 言

植物免疫诱导剂是通过激发植物自身的防卫反应，进而达到控制植物病害效果的新型生物农药。国际上已经应用于农业生产商品化的植物免疫诱导剂有烯并异噻唑、过敏蛋白、壳寡糖等[1]。植物免疫诱导剂不仅能够激发农作物的免疫抗病性，还可以诱导其抗寒、抗旱，增加产量并改善品质[2]。……