吴俊杰+汪宏锦+杨帅+刘杨+徐晓玉

[摘要]該研究通过观察冰片是否具有促进梓醇、葛根素透过局灶性脑缺血模型大鼠血脑屏障的作用，及其是否与激活β₂肾上腺素受体-eNOS-NO途径有关，从医学生物学作用角度阐释冰片“通窍引经”的传统功效及其机制。该研究采用大鼠大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血模型，5 d后神经功能障碍评分达5分者为造模成功。将模型成功大鼠随机分为7组，用药前经统计学检验各组间无显著性差异后，灌服给予相应药物[梓醇45 mg·kg^-1、 葛根素200 mg·kg^-1、冰片200 mg·kg^-1、布他沙明（Butoxamine，BTX）1.5 mg·kg^-1]：模型组（M组，溶剂）、梓葛组（ZG组）、梓葛冰组（ZGB组）、梓冰组（ZB组）、葛冰组（GB组）、β₂受体阻断剂+梓葛组（BTX+ZG组）、β₂受体阻断剂+梓葛冰组（BTX+ZGB组），另设假手术组（S组，溶剂），每组10只。各组给药10 min后取材，采用UPLC-MS测定脑脊液中梓醇和葛根素含量，Western blot法测定脑组织中eNOS含量、β₂受体表达，Griess法检测脑组织中NO含量。结果显示，与假手术组相比，造模大鼠神经功能得分均值均在5分以上，具有显著差异（P<0.05），显示造模成功。除假手术组外，经单因素方差分析，给药前各组之间的神经功能评分均无显著性差异。给药后与模型组相比，ZG组梓醇质量分数为26.673 μg·L^-1，葛根素含量在检测限以下，脑组织中eNOS表达和NO含量、β₂受体表达没有显著差异；与ZG组相比，ZGB组、ZB组、GB组脑脊液中梓醇质量分数增加至40～43 μg·L^-1、葛根素质量分数增加至72～75 μg·L^-1，脑组织中eNOS表达和NO含量、β2受体表达均有显著升高（P<0.05），显示冰片有促进作用；与ZG组相比，BTX+ZG组大鼠脑脊液中梓醇质量分数为21.401 μg·L^-1，葛根素检测不出，2组无显著差异，显示BTX无抑制作用；与ZGB组相比，BTX+ZGB组脑脊液中梓醇质量分数32.826 μg·L^-1、葛根素质量分数47.820 μg·L^-1，脑组织中eNOS表达和NO含量均有显著下降（P<0.05），显示BTX有抑制作用。该研究说明冰片能够显著促进梓醇、葛根素透过局灶性脑缺血大鼠血脑屏障，其作用可被β₂肾上腺素受体阻断剂布他沙明所阻断，其机制可能与上调β₂肾上腺素受体从而促进eNOS表达，进而使NO含量升高有关。……