黄 翀 陈艳霞 秦晓华 邹宏昌 徐承云 徐高四 房向东 涂卫平

(南昌大学第二附属医院肾内科，江西 南昌 330006)

全反式维甲酸对高糖诱导的HK-2细胞外基质合成的影响及可能机制

黄 翀 陈艳霞 秦晓华 邹宏昌 徐承云 徐高四 房向东 涂卫平

(南昌大学第二附属医院肾内科，江西 南昌 330006)

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对高糖诱导HK-2细胞外基质合成的影响及其在延缓糖尿病肾病肾间质纤维化中的可能作用机制。方法 将体外培养的HK-2细胞随机分为七组：A组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、B组(30 mmol/L D-葡萄糖)、C组(5.5 mmol/L D-葡萄糖+24.5 mmol/L甘露醇)、D组(10-7mol/L ATRA+30 mmol/L高糖)、E组(10-6mol/L ATRA+30 mmol/L高糖)、F组(10-5mol/L ATRA+30 mmol/L高糖)、G组(10 μmol/L Y-27632+30 mmol/L高糖)，各组细胞均培养48 h。应用ELISA 法检测细胞培养液结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅳ型胶原的表达水平；RT-PCR法检测细胞RhoA、ROCK1的表达水平。结果 B组RhoA mRNA及ROCK1 mRNA 的表达较A组显著升高(P<0.05)，D、E、F组RhoA mRNA 及ROCK1 mRNA 较B组均表达减少(P<0.05)，且随着ATRA浓度的升高呈现剂量依赖性。G组RhoA mRNA的表达与B组无明显差异，但ROCK1 mRNA 的表达较B组显著减少(P<0.05)；直线相关分析显示高糖组，D、E、F组RhoA mRNA 与ROCK1 mRNA 表达呈正相关(r=0.854,P=0.030;r=0.895,P=0.016;r=0.883,P=0.020;r=0.867,P=0.025)；ELISA 结果显示D、E、F组及G组CTGF、Ⅳ型胶原表达较B组显著下降(P<0.05)，且下降程度与ATRA浓度呈现剂量相关性。结论 ATRA在一定浓度范围内可抑制高糖诱导的HK-2细胞外基质的合成，延缓肾间质纤维化，其机制可能与抑制RhoA/ROCK通路有关。

高糖；全反式维甲酸；RhoA/ROCK信号通路；HK-2细胞

肾间质纤维化(RIF)是各种慢性肾脏病(CKD)发展的最终病理结果。肌成纤维细胞(MF)的产生与活化引起细胞外基质的过多沉积被认为是RIF发生的主要机制。MF主要通过肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)而来，而纤维连接蛋白(FN)、肺纤维化结缔组织生长因子(CTGF)和Ⅳ型胶原等均是EMT形成的重要生物标记物。近些年研究报道，转化生长因子(TGF)β/smad信号通路可通过促进EMT的形成触发RIF的发生，且RhoA/ROCK信号通路与TGFβ/smad信号通路在此过程中具有平行作用〔1〕。最近研究表明全反式维甲酸(ATRA)可抑制高糖诱导的HK-2细胞FN、层黏连蛋白(LN)的合成而延缓糖尿病肾病(DN)肾脏纤维化的发生〔2〕。然而，目前ATRA可否通过Rho/ROCK信号通路影响高糖诱导的RIF的报道甚少。……