低氧对大鼠视网膜Müller细胞低氧诱导因子1α和促红细胞生成素蛋白表达的影响
2017-02-13曲虹厉泉
曲 虹 厉 泉
(千佛山医院,山东 济南 250014)
低氧对大鼠视网膜Müller细胞低氧诱导因子1α和促红细胞生成素蛋白表达的影响
曲 虹 厉 泉
(千佛山医院,山东 济南 250014)
目的 探讨低氧对大鼠视网膜Müller细胞低氧诱导因子(HIF)-1α和促红细胞生成素(EPO)蛋白表达的影响。方法 体外传代培养大鼠视网膜Müller细胞,分为正常对照组(N组)、氯化钴浓度:50,100,150,200,300 μmol/L(C50、C100、C150、C200、C300组),MTT检测不同浓度氯化钴对Müller细胞活力的影响。免疫细胞化学、细胞免疫荧光检测、Western印迹和酶联免疫吸附试验检测HIF-1α、EPO蛋白表达的情况。结果 氯化钴浓度低于200 μmol/L时,细胞活力不受氯化钴浓度的影响。从200 μmol/L开始,细胞活力随氯化钴浓度增高而下降。氯化钴浓度高于50 μmol/L时,HIF-1α、EPO蛋白免疫染色可见阳性表达。酶联免疫吸附试验检测,从50 μmol/L 开始HIF-1α蛋白的表达随氯化钴浓度升高而增加。Western印迹检测,EPO蛋白表达从50 μmol/L开始增高,在150 μmol/L时达到高峰,以后逐渐下降。结论 低氧可引起细胞活性改变并诱导视网膜Müller细胞HIF-1α和EPO蛋白表达的变化。
低氧诱导因子1α;促红细胞生成素;视网膜;Müller细胞
缺氧性视网膜病变引起神经细胞损伤是视力丧失的重要原因,Müller细胞是视网膜重要的支持营养细胞,对维持视网膜神经功能具有重要意义。研究低氧对视网膜Müller细胞的影响,不仅对缺氧性视网膜病变发病机制有重要意义,同时也为视网膜神经保护提供新的思路。本文探讨低氧对视网膜Müller细胞功能的影响。
1 材料与方法
1.1 主要试剂和仪器 新生牛血清,DMEM培养基,胰蛋白酶,乙二胺四乙酸购自Gibco公司,氯化钴购自Sigma公司;……
