□ 李 凤 李秀娟 热孜万古丽 吐鲁番市质量与计量检测所

高效液相色谱法测定葡萄干中羟甲基糠醛含量

□ 李 凤 李秀娟 热孜万古丽 吐鲁番市质量与计量检测所

葡萄干含有大量的糖和酸类物质，在其存贮和加工过程中不可避免地会发生美拉德反应和糖水解反应，产生糠醛类物质。测定葡萄干中羟甲基糠醛含量有助于对葡萄干的药用价值的体现，并评价其存贮、加工条件。但目前仍未见葡萄干中羟甲基糠醛含量检测方法的报道。

本实验建立测定葡萄干中羟甲基糠醛含量的固相萃取、反相高效液相色谱法。葡萄干样品粉碎后用水溶解提取，过0.45μm滤膜，用高效液相色谱仪在285n m测定。本方法线性范围为0.5～30m g/L，线性相关系数R2=0.99997；回收率在8 5.1%～9 4.1%，相对标准偏差为0.9%～3.4%，方法检出限为0.1 m g/k g。是一种稳定、灵敏度高、适应性好的葡萄干中羟甲基糠醛含量的测定方法。

材料与方法

仪器与试剂

高效液相色谱仪；9 8.0%羟甲基糠醛标准品；甲醇（色谱纯）；1 0%甲醇水溶液（10m L甲醇和90m L水混合）；实验用水为超纯水。

标准溶液的配制：准确称取标准品，用去离子水配制成0.5 m g/m L的储备液。分析前用流动相配制成一系列不同浓度的标准工作溶液。

样品处理

称取10g试样，精确到0.001 g，置于100 m L容量瓶中，加入50m L水于40℃水浴浸泡30mi n。取出冷却后，用水定容至刻度，摇匀，静置10mi n过滤，取上清液0.45μm滤膜过滤后，上高效液相色谱仪测定。

液相色谱条件

色谱柱：AGi leh tteeh noloGi eSC18（4.6 m m×1 50m m，5 μm），流动相：超纯水+甲醇（9 0+1 0）%；流速1.0 m L/mi n；检测波长285n m；柱温30℃；进样量10μL。

结果与分析

前处理的选择

因葡萄干的成分为葡萄糖、果糖和少量的蛋白质和酸性物质，经反复试验，加沉淀剂和不加沉淀剂的检验结果没有区别，为减少损失影响最终结果选择不加，而葡萄干的成分并不复杂，预处理净化柱的主要作用是净化样品保护柱子，为降低损耗，不用预处理净化柱，使前处理简单方便并能获得很好的提取回收率。

液相色谱柱的选择

分别选用S y m metr yCn（4.6 m m×250m m，5 μm），diAmonSi lC18（4.6 m m×250m m，5 μm），WAterSNovA-PAkCl 8。（3.9 m m×1 50m m，5 μm），|l B∞d ApAlCl 8（4.0 m m ×300 m m，10μm）四种色谱柱对葡萄干中羟甲基糠醛进行色谱条件的实验。实验发现，这四种色谱柱都可以用于对羟甲基糠醛含量的分析，只有保留时间和灵敏度有所不同，AGi leh tteeh noloGi eSC18柱灵敏度和峰型均很好，所以我们选用AGi leh tteeh noloGi eSC18（4.6 m m×1 50m m，5 μm）色谱柱进行羟甲基糠醛的测定。标准图谱与实际样品分离图谱如图1所示。

线性关系和检出限用羟甲基糠醛标准储备溶液分别配制浓度为0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、1 0.0、20.0 μm/m L和3 0.0 μm/m L标准溶液，在选定的色谱条件下测定，进样量10μL，用峰高与标准浓度作图，线性方程为Y=6 6.73X+5.12，线性相关系数R2=0.99997。当检测0.10m g／L标准浓度时，所测谱图的信噪比大于1 0。根据最终样液所代表的试样量、定容体积和进样量计算，确定本方法检出限为0.1 m g/k g。

图1 实际样品（B）测定图谱

结语

葡萄干样品基质简单，含少量蛋白质、微量元素等物质，富含碳水化合物。本实验采用简单有效的方法，称取均匀粉碎后样品，加水于40℃水浴溶解，用0.45μm滤膜过滤，有效地降低被测组分的损失。方法回收率在8 5.1%～9 4.1%，该方法具有方便、准确、灵敏度高、精密度好等优点，是一种测定葡萄干中羟甲基糠醛的有效方法。

李凤（1980-），女，检验员。研究方向：食品检验。

李秀娟（1980-），女，工程师。研究方向：食品检验。

热孜万古丽（1981-），女，工程师。研究方向：食品检验。