小麦类钙调素TaCML79基因的克隆和表达分析
2017-01-17刘永伟董福双柴建芳吕孟雨孙果忠王海波
周 硕,刘永伟,董福双,杨 帆,赵 和,柴建芳,吕孟雨,孙果忠,王海波
(河北省农林科学院 遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,河北 石家庄 050051)
小麦类钙调素TaCML79基因的克隆和表达分析
周 硕,刘永伟,董福双,杨 帆,赵 和,柴建芳,吕孟雨,孙果忠,王海波
(河北省农林科学院 遗传生理研究所,河北省植物转基因中心,河北 石家庄 050051)
为了研究小麦类钙调素基因的功能和在植物逆境响应中的分子机制,以电子克隆结合RT-PCR的方法,在小麦中克隆到一个类钙调素基因TaCML79。该基因的开放阅读框长度为588 bp,编码的蛋白长度为195个氨基酸,推测的分子量为20.45 kDa,等电点为4.6,属于酸性蛋白,具有2个典型的和一个不完整的EF-hand结构域。多序列比对和系统进化树分析表明,TaCML79与野生稻的ObCML35和水稻的OsCML10亲缘关系较近,相似性分别为84.6%和86.8%。该基因的表达在根和地上部分受到热激、NaCl、渗透和冷胁迫的诱导或抑制,初步推断该基因可能与植物抗逆有密切的关系。
小麦;类钙调素;EF-hand结构域;基因克隆;基因表达
钙信号通路在植物的生长发育和耐受逆境胁迫中起着至关重要的作用。大多数的外界刺激都会引起植物细胞内钙离子(Calcium,Ca2+)水平发生改变,其变化的频率、幅度和胞内的位置等的不同,会形成复杂的Ca2+信号,由下游的钙离子结合蛋白感知并传导,激活下游的信号转导通路[1-5]。钙调素(Calmodulin,CaM)和类钙调素(Calmodulin-like protein,CML)是植物中重要的Ca2+感受蛋白,其本身没有酶的活性,可通过与Ca2+结合,改变自身构象,从而激活下游的靶蛋白发挥功能[6-7]。……
