李钺 谢炜星 晋大祥 温龙飞 丁金勇 徐继禧

广州中医药大学第一附属医院，广东 广州 510405

骨质疏松症(osteoporosis，OP) 是以骨量减少，骨质量受损及骨强度降低，导致骨脆性增加、易发生骨折为特征的全身性骨病[1]。临床表现主要体现为骨密度降低，骨皮质发生变化变薄，髓腔逐渐增宽，骨小梁数目减少，容易发生骨折[2]。根据骨质疏松症的发病机制的不同，临床治疗药物主要分为基本补充剂、抗骨吸收药物和促骨形成药物[3]。但是西药治疗中仍然存在着药物的不良反应、患者不耐受以及一些药物疗效的不确切等问题。近年来，中药对骨质疏松治疗的研究日益增多，并且在治疗上突显其优势。巴戟天为茜草科多年生攀援木质藤本植物，肉质根入药，是我国著名的四大南药之一，始载于《神农本草经》:“巴戟天，味辛，微温。生山谷。治大风邪气，阴痿不起，强筋骨，安五脏，补中增志益气”[4]。近年来研究表明，巴戟天具有多方面的药理作用，如提高机体免疫力、抗骨质疏松、抗氧化、强壮骨骼、抗炎镇痛、补血及促进造血干细胞增殖和分化等作用[5]。近年来人们对巴戟天防治骨质疏松症进行了深入的研究，笔者在此综述了近几年来巴戟天防治骨质疏松症的研究进展，并对其作用于骨细胞、动物、临床个体水平防治骨质疏松症的疗效、作用机理进行总结与归纳。

1 巴戟天防治骨质疏松骨细胞水平的研究

1.1 对成骨细胞的影响

洪懿燚等[6]研究发现巴戟天提取物能促进成骨细胞的增殖，上调抑制凋亡基因Bcl-2及下调促进细胞凋亡基因Bax表达，从而抑制成骨细胞的凋亡，此外他们还提出巴戟天的提取物能促进Cbfα1的表达及促进成骨细胞分泌骨钙素，这在防治骨质疏松症的方向上发挥一定作用。崔可赜等[7]通过观察巴戟天多糖含药血清对体外成骨细胞活性及DKK-1表达的影响发现，巴戟天多糖含药血清可以明显增加成骨细胞的增殖和分化能力，同时，可降低DKK-1蛋白的表达，提出这可能就是巴戟天多糖防治骨质疏松的机理。

1.2 对破骨细胞的影响

何剑全等[8]观察巴戟天含药血清对原代破骨细胞RANK和CA ⅡmRNA表达的影响，他们将大鼠分为正常组，骨质疏松组，骨质疏松+雌激素组，骨质疏松+巴戟天含药血清组，最后发现巴戟天可降低骨质疏松大鼠破骨细胞RANK和CA ⅡmRNA的表达，从而达到抑制骨质疏松的作用。王青华[9]将去势大鼠原代破骨细胞并分为4组：A组为正常对照组，B组给予17β雌二醇10-6mmol/L，C组给予1.0 mmol/L巴戟天，D组给予17β雌二醇10-6mmol/L雌二醇和1.0mmol/L巴戟天进行培养，发现B组破骨细胞数量、骨吸收陷窝面积相、CA Ⅱ、RANK mRNA基因表达水平均低于A组，说明巴戟天可有效抑制骨质疏松大鼠破骨细胞CA Ⅱ、RANK mRNA基因表达，降低大鼠骨吸收，抑制骨质疏松。

1.3 对成骨-破骨细胞共育体系的影响

郑素玉等[10]取24h内新生SD乳鼠头盖骨分离培养成骨细胞，取5周龄SD大鼠四肢长骨骨髓基质细胞，诱导培养破骨细胞，体外建立成骨、破骨细胞共育体系。使用高、中、低3种浓度巴戟天含药血清组培养共育体系，干预3d后，检测共育体系中CA Ⅱ、NFAT2 mRNA的表达，发现不同浓度的巴戟天含药血清对CA Ⅱ、NFAT2 mRNA均有抑制作用，且其抑制作用表现出一定的浓度依赖性，提示巴戟天含药血清有抑制共育体系中破骨细胞成熟及其发挥骨吸收功能作用。黄慧等[11]取健康5周龄SD大鼠的四肢长骨骨髓基质细胞，诱导培养破骨细胞，用24内新生SD乳鼠头盖骨分离体外培养成骨细胞。共育2天后，分别改用不同浓度巴戟天含药血清与不含药血清的培养基培养，并设低、中、高浓度组及对照组，培养3天后提取各组总RNA，RT-PCR结果示，中、高浓度组RANKLmRNA表达量均低于对照组，而OPGmRNA表达量显著高于对照组，提示巴戟天含药血清可上调共育体系中OPGmRNA表达，并下调RANKLmRNA 表达，且中高浓度呈剂量依赖关系，以高浓度表达最明显。可以证明，巴戟天能够以OPG和RANKL作为靶点之一，调控基因表达，发挥防治骨质疏松的作用。

2 巴戟天防治骨质疏松动物水平的研究

2.1 去势大鼠的骨微结构及矿物质的变化

王莹等[12]在实验中发现，切除大鼠卵巢后，模型组的骨量主要标志的骨小梁体积百分比(TBV%)显著降低，而代表骨吸收参数的骨小梁吸收表面百分比(TRS%)以及代表骨形成参数的骨小梁形成表面百分比(TFS%)、骨小梁矿化率(MAR)、类骨质平均宽度(OSW)和骨皮质矿化率(mAR)均显著增高，表明卵巢切除所造成的是一种骨吸收大于骨形成的高转换型骨质疏松模型。刘亦恒等[13]研究发现大鼠切除卵巢后，模型组的骨密度(BMD)和骨钙、骨磷含量下降，血清1,25-二羟基维生素D3水平下降。这是由于雌激素减少，骨平衡被破坏，骨转换增加，骨量及矿物质的丢失增多，从而形成骨质疏松。

2.2 巴戟天防治去势大鼠引起骨质疏松的机理

白细胞介素1和肿瘤坏死因子均为体内具有多种功能的细胞因子，可促进骨吸收，抑制骨基质胶原合成，从而影响骨的形成。朱孟勇等[14]研究表明，巴戟天多糖处理过的去势大鼠，其白细胞介素1和肿瘤坏死因子的表达水平均降低，说明巴戟天可能通过降低白细胞介素1和肿瘤坏死因子的表达水平发挥升高血清护骨素表达水平的作用，从而发挥治疗骨质疏松的作用。5-羟色胺(5-HT)是存在于骨组织内的神经递质之一，与骨代谢密切相关[15]。血管内皮生长因子(VEGF)具有双向调节作用的因子，可同时作用于成骨和破骨细胞，保持两者动态平衡，研究已经证实，VEGF促进成骨细胞的增殖和迁移，促进破骨作用[16]。刘汝银等[17]用不同剂量的巴戟天多糖干预去势大鼠，5-HT、VEGF的含量，结果显示巴戟天多糖可明显提高机体血清5-HT与VEGF水平，且呈剂量依赖性关系，这表明巴戟天多糖能明显上高血清中5-HT、VEGF含量，治疗骨质疏松。

3 巴戟天防治骨质疏松临床水平的研究

3.1 巴戟天治疗骨质疏松的临床效果

龙华等[18]选取50例肾阳虚型骨质疏松症患者，随机分两组，治疗组予单味巴戟天煎液口服，对照组给予口服阿仑磷酸钠片，6个月后，检测发现患者腰椎和髋部骨密度值、血清雌二醇和血清碱性磷酸酶水平都明显优于对照组，表明巴戟天可有效阻止骨质丢失，促进钙盐沉积，从而改善骨质疏松的症状。宋娟[19]在常规治疗基础上加用单味中药巴戟天煎液口服治疗骨质疏松症，治疗结束后，治疗组临床总有效率为85%明显好于对照组的57.1%，同时治疗组骨密度、血清骨钙素 (BGP)、尿吡啶酚 (PYD) 等也明显好于对照组，表明单味中药巴戟天煎液口服治疗骨质疏松症，疗效尚可。

3.2 巴戟天治疗骨质疏松的临床机理

陈彩英等[20]研究发现Mn是人体必需的微量元素，人体缺锰时，破骨细胞活性增强，成骨细胞活性降低，动态平衡破坏，从而出现骨质疏松。而巴戟天中锰元素含量高达559 μg/g，锰参与活化硫酸软膏素合成的酶系统，促进骨骼的形成，防止骨质疏松的发生。绝经后雌激素水平下降是骨质疏松症发病的主要原因，何剑全[4]等发现使用 E-SCREEN法，巴戟天提取物既能显著地促进 MCF-7细胞的增殖，同时在与ICll 82, 780雌激素受体拮抗剂共同作用下, 又能显著地抑制原来药物对 MCF-7细胞的增殖作用，说明了巴戟天提取物表现出了强烈的植物雌激素样作用，减缓骨质疏松的发生。

4 展望

通过文献综述，巴戟天的各种提取物都具有一定的抗骨质疏松活性，而关于其抗骨质疏松的机制和靶点，目前尚不十分清楚。所以应该加强以下各方面的研究:(1)深入研究巴戟天对骨相关细胞的代谢信号通路的作用，明确巴戟天防治骨质疏松的机理；(2)虽然关于巴戟天提取物抗骨质疏松的细胞实验已有较多报道 ,但相关药理活性的动物实验仍较少，建议多在此方向深入研究；(3)目前研究多以动物实验为主，缺少多中心、大样本的临床对照研究，建议加强临床上的互相协作，集中研究，为该药物的深入开发和利用提供参考，并期待能早日设计开发出安全、高效、低廉的抗骨质疏松新药。