李丽华（云南省弥渡县动物疫病预防控制中心 675600）

布病是由布氏杆菌引起的一种严重危害人民健康和畜牧业发展的人、畜共患的传染病。在家畜中羊最常发生。以危害生殖系统，使母畜发生流产、公畜发生睾丸炎为临床主要特征。本病易感动物的范围很广，人有不同的易感性。羊、牛、猪易感性最强，马、骆驼次之，猫和禽极少发病。传染源是病畜及带菌动物（包括野生动物）。最危险的是受感染的妊娠母畜，在流产和分娩时将大量布氏杆菌随着胎儿、胎衣和胎水排出。流产后的阴道分泌物以及乳汁中都含有布氏杆菌。布氏杆菌可以通过体表皮肤黏膜、消化道和呼吸道侵入机体，传播媒介主要是病畜的流产物、乳、肉、内脏和被布氏杆菌污染的皮毛、水、土壤、尘埃等。人感染布病主要是经皮肤接触感染，羊是最危险的传染源，其次为牛、猪。近年来，随着养羊业的迅猛发展，引种、流通、交易频繁，加之监督管理与预防不到位，山羊布病的发病率和感染率呈逐年上升趋势，给人民群众的生命健康安全带来严重威胁，造成的经济损失也越来越大。坚持搞好监测检疫，及时检出病畜，及时扑杀病畜，消灭传染源，是控制山羊布病传播和慢延的重要措施。

1 材料

布鲁氏菌病虎红平板凝集试验抗原，由中国兽药品监察所生产，规格：15ml/瓶，保质期12个月，并由大理州动物疫病预防控制中心提供。

血清：采集自全县八乡（镇）山羊养殖户饲养的山羊的新鲜血清，且无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。

2 检疫方法

依照中华人民共和国国家标准GB/T18646—2002∶动物布鲁氏菌病诊断技术，采用虎红平板凝集试验和试管凝集试验进行。

2.1 虎红平板凝集试验

（1）首先把洁净的玻璃板划分成50个小方格 (横10格，纵5格)，然后用吸管将抗原滴加在方格内，剂量为0.03ml，接着再加入被检血清0.03ml，然后用牙签或火柴棍搅动抗原和血清，使之混合均匀。

（2）每次试验应设阴、阳血清对照。

（3）判定：在阴阳血清对照成立的条件下，方可对被检血清进行判定。

（4）受检血清在5min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性（+），无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性（-）。

2.2 试管凝集试验

2.2.1 被检血清的稀释

在一般情况下，每份血清用5支小试管 (口径8～10mm)，第一管加入2.3ml石碳酸生理盐水，第二管不加，第三、四、五管各加0.5ml，用1ml吸管吸取被检血清0.2ml，加入第一管中混匀。混匀后，用该吸管吸取第一管中血清加入第二管和第三管各0.5ml，用该吸管将第三管混匀，并吸取0.5ml加入第四管中混匀，再从第四管吸取0.5ml，弃去。如此稀释后，从第二至第五管血清稀释度分别为 1∶12.5、 1∶25、 1∶50、1∶100。

2.2.2 加入抗原

先以0.5%石碳酸生理盐水将抗原作适当稀释（一般作1∶10稀释）。稀释后的抗原加入各稀释的血清管（第一管不加，作血清对照），每管加0.5ml混匀。加入抗原后，每管总量1ml，血清稀释度从第二管至第五管分别为 1∶25、 1∶50、 1∶100、 1∶200，从第一管再吸出 0.5ml，剩 1ml。

2.2.3 对照

阴性血清对照，血清稀释后的抗原（与被检血清对照相似）。阳性血清对照，其血清稀释到原有滴度，再加抗原。抗原对照，适当稀释的抗原加石碳酸盐水。

2.2.4 判定

判定比浊管制备：每次试验须配制比浊管作为判定的依据。配制方法是取本次试验用的抗原稀释5～10ml，加入等量的0.5%碳酸盐水作倍比稀释。

全部试验管，对照管及比浊管充分振荡后置37℃温箱中20～22h，取出后放室温2h，然后以比浊管为标准判定结果。

记录结果：根据各管中上层液体的清亮度记录结果。特别是50%清亮度（++）对判定结果较大，一定要与比浊管对比判定。++++：完全凝集，上层液100%清亮。+++：几乎完全凝集，上层75%清亮。++：显著凝集，50%清亮。+：有微量凝集，25%清亮。-：无凝集，液体不清亮。

确定每份血清滴度是以出现++及以上的凝集现象的最高血清稀释度。在实际工作中，布病检疫首先用虎红平板凝集试验筛选阳性羊，然后再对初筛出的阳性羊运用试管凝集试验进行复查。

3 检疫结果

弥渡县从2012年开展山羊布病监测检疫工作，并以常规监测和重点监测两种方式进行。

3.1 常规监测

按不同规模随机采样。存栏30只以下的养殖场（户）采集血清样品5份，存栏30～50只的养殖场（户）采集血清样品10份，存栏50～100只的养殖场（户）采集血清样品15份，存栏100只以上养殖场 (户)采集血清样品20份。

3.2 重点监测

一是根据卫生部门反馈的信息，饲养员、放牧人员和有与山羊密切接触史等高危人群人员被确诊为感染布病阳性病人后的人畜同步监测；二是在常规监测中，检疫出阳性病羊后进行的监测。重点监测工作主要采取以疫点村（户）为单位，整村推进，100%检疫的策略进行。

3.3 检疫结果

2013～2017年共检疫山羊1521只，检出阳性病羊31只，阳性率2.03%。其中重点监测检疫289只，检出阳性病羊21只，阳性率7.26%。

4 扑杀净化

根据《布鲁氏菌病诊断标准及处理原则》和大理州农办发 〔2009〕28号《关于认真组织开展结核病、布病阳性畜扑杀净化的紧急通知》要求，本县坚持对历年监测检疫出的布病阳性山羊，采取了消毒、扑杀、深埋无害化处理等净化措施，2003年以来累计扑杀净化布病阳性山羊33只，其中同群畜2只。

5 防控建议

5.1 消灭传染源

疫畜是布病的主要传染源，我国大部分地区，羊是主要传染源。2014年以来，弥渡县查出的布病病人，根据流行病学调查，其传染源基本来自于感染布病的山羊。因此，及时检出病羊，及时扑杀病羊是彻底消灭传染源，控制山羊布病传播和慢延的重要措施。

5.2 加强监测检疫力度

从未发生过布病的羊群，坚持自繁自养，不从疫区引进或购买山羊。引进或购买山羊必须隔离观察，进行布病检疫，确定无感染后方可入舍或混群饲养。

5.3 认真消毒

被病畜的流产物污染的场地、用具、厩舍及尚未食用的奶制品、高危易感人群，必须进行认真消毒处理。

5.4 高危人群防护

凡与病畜、可疑畜及其流产污物、染菌的畜产品直接接触的饲养员、放牧者、兽医和从事皮毛、肉乳加工人员等高危人群，一定要做好自身防护工作，一旦出现持续数日乃至数周发热（包括低热）、多汗、肌肉和关节疼痛、乏力，兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征时，应立即到正规医疗机构进行诊断和系统治疗。平时认真做好消毒和防护，一年至少做一次包括布病筛查的健康体检。