张玉玲， 孔 杰， 梁萌青， 罗 坤❋❋， 栾 生， 曹宝祥(1.中国海洋大学海洋生命学院，山东 青岛 266003；2.中国水产科学研究院黄海水产研究所，农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室，山东 青岛 266071；3.青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，山东 青岛 266071)

饲料中添加南极磷虾粉对营养强化阶段凡纳滨对虾亲虾产卵的影响❋

为探讨饲料中添加一定比例的南极磷虾粉(Antarctic krill meal)在凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)亲虾营养强化期间的作用，以筛选出在亲虾营养强化期间适合的人工配合饲料。用3种比例不同的磷虾粉人工配合饲料(0、10%和20%，对应的编号为K0、K10和K20)和沙蚕(对照组)分别对凡纳滨对虾进行60天的营养强化。营养强化后对每个处理组的雌性亲虾进行单侧眼柄摘除手术，亲虾进入繁殖产卵阶段，通过人工授精操作使亲虾交配、产卵，收集产卵相关数据。研究表明，K10和K20组的亲虾产卵量、受精卵孵化率和无节幼体变态率与对照组无显著差异(P>0.05)；K20组的亲虾产卵率、多次产卵率和卵径大小显著高于对照组(P<0.05)，K10组的亲虾产卵率显著高于对照组(P<0.05)。脂肪酸组成分析表明，K10和K20组与沙蚕组的多不饱和脂肪酸组成相同(包括C20:5n-3、C22:6n-3、C20:4n-6等)；各处理组的卵脂肪酸组成与饲料的脂肪酸组成在一定程度上正相关。研究结果表明，添加10%～20%南极磷虾粉的人工配合饲料可作为凡纳滨对虾亲虾营养强化期间的饵料。

凡纳滨对虾亲虾；人工配合饲料；南极磷虾粉；营养强化；卵质；脂肪酸组成

凡纳滨对虾(Litopenaeusvannamei)属开放式纳精囊对虾养殖品种，具有生长迅速、抗病力强、繁殖季节长等优点，与中国对虾(Fenneropenaeuschinensis)、斑节对虾(Penaeusmonodon)并列为三大经济虾类[1]。生产上，凡纳滨对虾亲虾的繁殖培育包括两个阶段：第一个阶段是在摘除雌性亲虾单侧眼柄前的营养强化阶段，一般持续的时间为两个月左右，此阶段，凡纳滨对虾体内会积累大量的营养物质用于性腺发育；第二阶段是摘除雌性亲虾单侧眼柄后的繁殖产卵阶段。目前，亲虾的繁殖培育过程中，从营养强化阶段到繁殖产卵阶段一直投喂生物饵料，包括鲜活沙蚕(Nereididae)、冰冻的牡蛎(Ostrea)、鱿鱼(Loliginidae)等，这些生物饵料营养价值高，能够有效促进亲虾的性腺发育[2]。但在使用过程中，这些生物饵料也出现越来越多的弊端。例如，携带对虾致病源[3]、产量和质量随气候变化波动大、价格昂贵、投喂量大等。随着对虾养殖业的不断扩增，研究生产出营养搭配合理、能够有效促进亲虾性腺发育的人工配合饲料具有重大的实际意义。目前市场上虽已有商品化的亲虾配合饲料，但效果不理想，不能完全取代鲜活饵料。本实验考虑到这方面的现实问题，首先选取亲虾培育过程中的第一阶段，即营养强化阶段进行实验。

南极磷虾粉具有较高的营养价值，目前越来越多的饲料研究选择其作为饲料原料[4]，粗蛋白含量约为59.4%～62.3%[5]，粗脂肪含量约为9.3%～15.1%[6]；并且氨基酸组成适宜，多不饱和脂肪酸含量丰富[7]。楼乔明等[8]研究南极磷虾粉脂肪酸组成时发现其ΣPUFA含量占总脂肪酸含量的47.98%，其中，EPA和DHA含量高达21.42%和19.22%；并且，不饱和脂肪酸中以n-3系列脂肪酸为主，占45.41%，n-6系列脂肪酸的含量仅为2.24%。

本试验参考亲虾繁殖期间的营养研究结果并结合亲虾天然饵料的营养组成，设计了3组磷虾粉比例不同的人工配合饲料(磷虾粉含量分别为0，10%和20%，相应的饲料编号为K0、K10和K20)，并以沙蚕为对照组，对凡纳滨对虾亲虾进行为期60天的营养强化培养，比较研究了配合饲料与沙蚕的脂肪酸组成以及营养强化期间的营养积累对凡纳滨对虾亲虾繁殖效果的影响，旨在为开发优质的亲虾人工配合饲料提供有价值的参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 亲虾来源 试验所用的凡纳滨对虾亲虾来源于河北省鑫海水产生物技术有限公司，12月龄，前期无营养强化处理。试验之初，雌虾平均体长(13.11±0.85) cm，平均体重(34.63±4.71) g，无性腺发育情况；雄虾平均体长(12.08±0.74) cm，平均体重(29.83±4.14) g。

1.1.2 人工配合饲料 试验饲料配方组成及常规营养成分含量见表1。所有原料粉碎后过60目筛，采用逐级放大的方法混匀后加水搅拌，进制粒机压制成规格为1.5 mm×3.0 mm的亲虾饲料。烘干后，储存于阴凉避光处保存备用。

1.1.3 养殖用水 试验用水取自渤海湾，经沉淀、沙滤、消毒后使用，营养强化期间的水温维持在27～28 ℃、盐度28～33、pH8.0～8.5、溶氧>5 mg/L、总氨氮<0.5 mg/L、亚硝酸盐<0.1 mg/L、水深50～60 cm。

繁殖产卵期间，产卵孵化用水在正常海水处理基础之上，需要加入10 mg/L的EDTA和0.5 mg/L聚维酮碘液以络合水体中的重金属离子及对水体进行消毒处理。

1.2 试验方法

试验分4个处理组，每个处理组两个平行，各平行组有40尾虾，雌雄比例1：1；分别投喂饲料K0、饲料K10、饲料K20和沙蚕(沙蚕采用活体投喂，投喂前用浓度为50 mg/L的高锰酸钾溶液浸泡2～3 min后清水洗净)。试验开始时，在每尾亲虾的一侧眼柄上套上眼标，以区分个体。营养强化结束后，对全部的雌亲虾采用镊烫法进行单侧眼柄摘除手术。鉴于目前国内外仍没有可完全替代鲜活饵料的人工配合饲料[9]，术后，全部处理组均改投喂鲜活沙蚕，采用人工授精的方法，采集繁殖和幼体发育数据。

注：复合维生素(mg/kg or g/kg饲料)：硫胺素，25mg；核黄素，45mg；盐酸吡哆醇，20mg；维生素B12，0.1mg；维生素K3，10mg；肌醇，800mg；泛酸，60mg；烟酸，200mg；叶酸，20mg；生物素，1.20mg；维生素A，32mg；维生素D，5mg；维生素E，120mg；次粉18.67 g。复合矿物质(mg/kg or g/kg饲料)：氟化钠，2mg；碘化钾，0.8mg；氯化钴，50mg；硫酸铜，10mg；硫酸铁，80mg；硫酸锌，50mg；硫酸镁，1200mg；磷酸二氢钙，3000mg；氯化纳，100mg；沸石粉，15.51g。粗蛋白、粗脂肪、灰分以干物质含量计算(水分除外)。

Note: Vitamin premix(mg/kg or g/kg diet):thiamine 25mg,riboflavin 45mg,pyridoxine 20mg,vitamin B120.1mg,menadione 10mg,inositol 800mg,pantothenate 60mg,tocopherol acetate 200mg,folic acid 20mg,biotin 1.2mg,vitamin A 32mg,vitamin D 5mg,vitamin E 120 mg,wheat flour 18.67g. Mineral premix(mg/kg or g/kg)diet: NaF 2mg;KI 0.8mg;CoCl2·6H2O 50mg;CuSO4·5H2O 10mg;FeSO4·7H2O 80g;ZnSO4·7H2O 50mg;MnSO4·4H2O 1200mg; Ca(H2PO4)2·H2O 3000g;NaCl 100g;Mordenzeo15.51g. The percentage compositions of crude protein,crude fat and ash are the dry matter content(without the moisture).

本试验中，经过60天的营养强化培养后，雌性亲虾在10月13日接受单侧眼柄摘除手术，术后的第一天即10月14日，4个处理组均有性腺发育完全的雌性亲虾，即各处理组雌性亲虾性腺发育完全同步。考虑到刚剪眼柄，性腺发育可能不稳定，14日当天没有进行人工授精操作，人工授精是从10月15日一直持续到11月7日，共计24天。

1.3 样品采集及分析方法

人工授精后，统计各处理组产卵量、受精卵孵化率及无节幼体变态率；计算各处理组的雌性亲虾产卵率、多次产卵率、平均产卵次数。从每个处理组的前10次产卵中各取50粒左右受精卵，保存在浓度为4%的甲醛溶液中，用于测量受精卵的卵径；同时从每个处理组的前10次产卵中，每次收集大约0.2 g的受精卵保存在液氮中，用于卵脂肪酸测量。其中，

雌性亲虾产卵率=产卵的雌性亲虾数量/受精产卵期间存活的雌性亲虾总数量×100%；

多次产卵率=多次(两次及以上)产卵的雌性亲虾数量/产卵的雌性亲虾数量×100%；

平均产卵次数=受精产卵期间各平行组总产卵次数/产卵的雌性亲虾数量；

卵径=(长径+短径)/2。

饲料常规成分分析：干物质含量的测定参照国家标准GB/T 6435-1986，饲料样品在105 ℃下烘干至恒重，采用失重法测定干物质含量；粗蛋白含量测定参照国家标准GB/T 6432-1994采用凯式定氮法，用意大利VELP半自动凯氏定氮仪——UDK129测定；粗脂肪含量测定参照国家标准GB/T 6433-1994，以石油醚为抽提液，用丹麦FOSS脂肪测定仪SOXTEC 2050测定；灰分的测定参照国家标准GB/T6438-1992，在550℃马福炉中灼烧至恒重后测定。

饲料和受精卵中的脂肪酸含量测定参考 Mourente等[10]，采用气相色谱法(GS，HP6890，USA)，各种脂肪酸的定性采用与标准样品保留时间比较的方法，定量采用面积归一化法计算。

利用SPSS 19.0统计分析软件对数据进行ANOVA单因素分析和Duncan's多重比较(P<0.05)分析。

2 结果

2.1 各处理组产卵量、受精卵孵化率和无节幼体变态率

不同处理组的亲虾产卵繁殖情况如表2所示，从表中可以看出，对照组的产卵量最大，显著高于K0组(P<0.05)，但与K10、K20组不存在显著性差异(P>0.05)，K10与K20组比较，K20组的产卵量显著高于K10组(P<0.05)。

4个处理组的受精卵孵化率在45.02%～49.26%之间，其中对照组最高，但各处理之间不存在显著差异(P>0.05)。无节幼体变态率在对照组最高，显著高于K0组(P<0.05)，但与K10和K20组差异不显著(P>0.05)。

注：不同的上标字母代表差异显著(P<0.05)，下同。

Note: Different superscript letters mean significant difference(P<0.05).The same as the following.

2.2 各处理组产卵率、多次产卵率和平均产卵次数

雌性亲虾产卵率、多次产卵率和平均产卵次数如表3所示，从表中可以看出，K0组、K10组、K20组3组亲虾的产卵率不存在显著差异(P>0.05)，且均显著高于对照组(P<0.05)。K20组的多次产卵率最大，达(55.00±7.07)%，显著高于对照组(P<0.05)，其余各组间差异不显著(P>0.05)。

平均产卵次数在K20组最大，为2.00±0.28，显著高于对照组和K0组(P<0.05)，与K10组差异不显著(P>0.05)，K0组、K10组与对照组相比也未产生显著性差异(P>0.05)。

2.3 各处理组受精卵卵径大小

各处理组受精卵卵径测量结果如表4所示。从表中可以看出，卵径最大的是K20组，为(267.84±7.19) μm，显著高于对照组和K0组(P<0.05)，但K0、K10与对照组之间未产生显著性差异(P>0.05)。

2.4 不同配方饲料及沙蚕体内的脂肪酸组成

3组人工配合饲料及沙蚕的脂肪酸组成测量结果如表5所示。从表中可以看出，总多不饱和脂肪酸(ΣPUFA)含量在沙蚕体内最高，为(46.68±0.68)%；饲料K10和饲料K20的ΣPUFA分别为(37.31±1.13)%和(38.23±0.15)%，饲料K0的含量最低，仅为(28.94±0.60)%，单因素方差分析表明，饲料K10与饲料K20差异不显著(P>0.05)，其余各组差异显著(P<0.05)。EPA(C20:5n-3)、DHA(C22:6n-3)和AA(C20:4n-6)含量在沙蚕体内的含量均高于3组人工配合饲料，但饲料K10和饲料K20的EPA、DHA和AA含量与沙蚕更接近。

n-6和n-3系列PUFA的含量均在沙蚕体内最高，分别为(13.63±0.01)%和(33.05±0.67)%，且均显著高于其余各组(P<0.05)。但，Cn-3/Cn-6数值K20最大，为(3.17±0.02)，显著高于K10、沙蚕和K0(P<0.05)。

续表5

注：脂肪酸含量以各脂肪酸甲酯占总脂肪酸甲酯的比例表示。下同。

Note: Ratios of fatty acid methyl ester to total fatty acid methyl esters.The same as the following.

2.5 各处理组受精卵脂肪酸组成

各处理组受精卵脂肪酸组成如表6所示。凡纳滨对虾卵中的主要饱和脂肪酸是软脂酸(C16:0)，主要单不饱和脂肪酸是油酸(C18:1n-9)和棕榈油酸(C16:1n-7)。对照组卵中的ΣPUFA含量最高，为(24.59±1.18)%，其次是K10组，(23.62±0.48)%，2组之间差异不显著(P>0.05)；K20组ΣPUFA为(22.93±1.01)%，与K10组间不存在显著性差异(P>0.05)，K0组ΣPUFA含量最低，为(19.14±0.07)%，与其余3组差异显著(P<0.05)。对照组卵中EPA含量最高，为(9.16±1.03)%，K10组、K20组中的含量分别为(8.37±0.02)%、(8.88±0.04)%，3组间不存在显著差异(P>0.05)；K0组的EPA含量为(7.60±0.38)%，与对照组差异性显著(P<0.05)。AA含量在对照组受精卵里的含量低于K10组和K20组，但高于K0组，K20组含量最高，为(1.48±0.28)%。DHA含量在K0组的受精卵中含量最低，并且与其余3组存在显著差(P<0.05)，K10组、K20组和对照组之间差异不显著(P>0.05)。4个处理组中Cn-3/Cn-6比值介于(1.21±0.14)～(1.36±0.25)之间，4组间不存在显著差(P>0.05)，K20组最大，为1.36±0.25，K10组次之。

3 讨论

3.1 不同南极磷虾粉配比饲料进行营养强化对亲虾产卵量、孵化率和无节幼体变态率的影响 Palaeios等[11]研究表明，在一定饲料蛋白含量之内，凡纳滨对虾亲虾的产卵量与饲料蛋白含量正相关，本试验的结果与此基本一致。南极磷虾粉中蛋白含量较高，约为64.44%[12]，未添加南极磷虾粉的饲料K0比添加了南极磷虾粉的饲料K10、饲料K20蛋白含量低，仅为(48.64±0.27)%，K0组的产卵量在3组中也最低，为(18.06±0.68)万；饲料K10和饲料K20的蛋白含量分别为(51.62±0.14)%和(52.26±0.02)%，其产卵量分别为(22.53±0.70)万和(21.74±2.86)万；沙蚕的平均粗蛋白含量为58.65%[13]，其产卵量在4个处理组间也是最高的，达(23.45±0.63)万。Wouters等[14]的研究结果表明，性腺发育期间的凡纳滨对虾亲虾需从饵料中摄食大量的营养物质用于性腺发育和成熟，性腺指数在此期间急剧增长，甚至能在3天内增加8倍。凡纳滨对虾亲虾产卵次数多、性腺再次发育速度快，更需要充足的、营养丰富的饵料。

脂类对受精卵的正常孵化与变态极为重要。Lytle等[15]研究表明，幼体在开口前无外源性营养的摄入，只能依靠受精卵中已有的脂肪作为能源来实现受精卵的孵化以及无节幼体的变态。Wouters等[16]研究发现，受精卵中的脂肪是由亲虾性腺发育过程中的饵料所提供，因此，提供营养丰富的饵料有利于受精卵质量的提高，并且能够促进无节幼体成活率。加工之后的南极磷虾粉其粗脂肪含量约为(9.3～15.1)%[6]，本试验中，饲料K10和饲料K20其粗脂肪含量分别为(16.69±0.22)%和(16.59±0.31)%，略高于饲料K0粗脂肪含量(15.06±0.37)%，3组的受精卵孵化率维持在(45.02±1.20)%～(48.97±3.66)%之间。沙蚕体内的粗脂肪含量为7.48%[13]，小于3组配合饲料中的粗脂肪含量，但对照组的孵化率为(49.26±0.82)%。可能的解释有两点：一是沙蚕体内的粗脂肪含量已经达到凡纳滨对虾亲虾产卵孵化期间的脂肪需求量；二是沙蚕体内的粗脂肪含量虽然较人工配合饲料低，但其脂肪酸组成合理，有效促进亲虾受精卵孵化的脂肪酸含量高。另外，K10组、K20组的变态率与对照组的变态率也没有显著性差异(P>0.05)。结果说明，用饲料K10和饲料K20进行前期营养强化的凡纳滨对虾亲虾，在繁殖产卵期间可以基本满足受精卵孵化与无节幼体变态的需求。

3.2 不同南极磷虾粉配比饲料进行营养强化对亲虾产卵率、多次产卵率和平均产卵次数的影响 雌性亲虾产卵率指产卵雌性亲虾数量占总雌性亲虾数量的比例，反映出雌性亲虾的性腺成熟能力；而多次产卵率指多次(2次及以上)产卵的雌性亲虾数量占产卵雌性亲虾数量的比例，反映出雌性亲虾性腺再成熟的能力，雌性亲虾的产卵率和多次产卵率与其性腺发育过程中的营养供给有关。Lim[19]的研究发现，凡纳滨对虾亲虾产卵中的磷脂含量占总脂肪含量的50%时，凡纳滨对虾的产卵频率会增加，他建议亲虾饲料中的磷脂含量为2%，我们设计的3组人工配合饲料中的磷脂含量均为2%，与之相符。

试验结果显示，4个处理组的产卵率介于(59.17±1.18)%～(74.16±1.18)%之间，K10组的产卵率最高，为(74.16±1.18)%，对照组的产卵率最低，为(59.17±1.18)%。用人工配合饲料进行营养强化的亲虾产卵率均比用沙蚕进行营养强化的亲虾产卵率高，并且差异性显著(P<0.05)。可能的解释是：人工配合饲料营养配比较完善，在营养强化期间较有效的促进亲虾积累营养物质，加之繁殖产卵期间又改投鲜活饵料，达到了营养互补的效果；而对照组一直投喂单一活饵，缺少其他饵料的营养互补。董超等[20]在研究克氏原螯虾摄食的过程中也发现，单一投喂鱼肉丸对克氏原螯虾的生长并没有利处，反而采用鱼肉丸和配合饲料混合间隔投喂会取得更好的结果。产卵率和多次产卵率方面的结果表明，凡纳滨对虾亲虾营养强化期间投喂人工配合饲料比单一投喂沙蚕要起到更好的培养效果，这方面的内容还需进一步的试验加以验证。

值得注意的一点是，随着饲料中南极磷虾粉添加比例的增加，凡纳滨对虾亲虾的多次产卵率从(38.18±2.57)%增加到(55.00±7.07)%，相应的平均产卵次数从(1.48±0.71)次增加到(2.00±0.28)次。可见配合饲料中添加一定含量的南极磷虾粉有利于促进亲虾的性腺再成熟能力，这方面的结果可能与南极磷虾粉特定的营养组成相关，比如磷脂。南极磷虾粉的脂肪酸多以磷脂的形式存在[8]，而磷脂能够增加凡纳滨对虾的产卵频率[19]，这方面的内容还需要更加深入的研究。

3.3 不同南极磷虾粉配比饲料进行营养强化对受精卵卵径的影响 凡纳滨对虾亲虾所产受精卵卵径的大小，反映出了性腺发育期间用于卵巢发育的营养与能量的多少。凡纳滨对虾性腺发育期间，亲虾摄入的营养物质通过肝胰腺往性腺进行输送，用于性腺发育。卵径越大，说明亲虾体内的消化酶活力越高，也会有更多的营养与能量用于卵巢发育。本试验中，K0组卵径最小，对照组的卵径小于K10组和K20组的卵径，且与K20组的卵径存在显著差(P<0.05)。结果说明，凡纳滨对虾亲虾用添加一定磷虾粉含量的配合饲料进行营养强化培养能取得较好的卵子质量。

3.4 饲料脂肪酸组成与卵脂肪酸组成的分析

饵料中的脂肪酸组成对于亲虾的生殖活动具有重要意义，亲虾的性腺成熟及繁殖产卵过程中需要大量的PUFA，但虾类无法自行合成PUFA，只能从所食饵料中获取[17,21]，Lim[19]的研究结果表明PUFA在饲料里的含量不仅影响亲虾的产卵率，同样也影响受精卵的孵化率及无节幼体的变态率；Bray等[22]的研究表明，斑节对虾的产卵率和孵化率随着亲虾饲料中∑n-3/∑n-6比值的增加而提高。Wouters等[14]的研究结果也发现，亲虾饲料中∑n-3/∑n-6比值的提高及较高的∑n-3含量更有利于凡纳滨对虾受精卵的孵化和无节幼体的变态。黄建华等[23]在斑节对虾亲虾性成熟过程中脂肪酸需求的研究中发现，斑节对虾亲虾在性腺发育过程中，需要大量的DHA、EPA、AA、LA(C18:2n-6)等n-3系列、n-6系列PUFA。Xu等[24]的研究发现，饵料EPA含量与中国对虾亲虾产卵量正相关，而DHA与孵化率正相关。

本试验中，ΣPUFA含量在4组饲料中差异较大，沙蚕体内的ΣPUFA含量最高，达(46.68±0.68)%，显著高于3组人工配合饲料ΣPUFA含量(P<0.05)；而人工配合饲料中的ΣPUFA含量随南极磷虾粉添加比例的增加，依次为(28.94±0.60)%、(37.31±1.13)%和(38.23±0.15)%。楼乔明等[8]研究南极磷虾粉体内脂肪酸组成发现其ΣPUFA含量占总脂肪酸含量的47.98%，其中，EPA和DHA含量高达21.42%和19.22%；并且，不饱和脂肪酸中以n-3系列脂肪酸为主，占45.41%，n-6系列脂肪酸的含量仅为2.24%。由此可以发现，南极磷虾粉中含有较高比例的ΣPUFA，进而导致饲料K10和饲料K20的ΣPUFA含量显著高于K0饲料(P<0.05)。另外，比较4组的产卵量和无节幼体变态率可以看出，随着投喂饵料内ΣPUFA含量的升高，产卵量和变态率也相应的增加，但是饵料ΣPUFA含量对受精卵的孵化率无明显的影响。EPA和DHA在沙蚕体内含量最高，分别达到了(14.43±0.26)%和(17.87±0.46)%；比较3组人工配合饲料的EPA和DHA含量可以发现，随着南极磷虾粉添加比例的增加，饲料内的EPA((8.55±0.36)%、(11.04±0.23)%、(11.53±0.02)%)、DHA((11.10±0.13)%、(15.47±0.24)%、(16.99±0.07)%)和AA((0.12±0.00)%、(0.80±0.08)%、(0.81±0.02)%)含量也相应的增大。∑n-3/∑n-6比值方面，饲料K20最大，3.17±0.02；饲料K10次之，2.85±0.10；沙蚕2.42±0.04，饲料K0最小，2.20±0.03。∑n-3/∑n-6比值的不同可能是由磷虾粉内高比值的∑n-3/∑n-6引起，且随着磷虾粉添加量的增加，饲料中∑n-3/∑n-6比值急剧增大。分析发现，饲料内∑n-3/∑n-6比值与凡纳滨对虾亲虾产卵受精卵卵径正相关，并且与凡纳滨对虾亲虾的平均产卵次数也有一定的相关性。

本试验中，卵脂肪酸组成与所投喂饵料的脂肪酸组成正相关。4组受精卵中，对照组的ΣPUFA含量最高，(24.59±1.18)%，其次依次为K10组、K20组和饲料K0组，分别为(23.62±0.48)%、(22.93±1.01)%和(19.14±0.07)%。分析表明，受精卵中的EPA含量与饲料中的EPA含量绝对正相关，DHA和AA含量也近乎正相关；∑n-3/∑n-6比值也遵从饲料中的比值，即K10组、K20组∑n-3/∑n-6比值大于K0组和对照组∑n-3/∑n-6比值。在幼体发育的早期，开口摄食之前，幼体无外源性营养的摄入，只能依靠卵脂肪中的脂肪酸提供能源来满足孵化和无节幼体变态的需求，因此卵脂肪酸对幼体发育极为重要。而卵脂肪酸组成模式又受饵料脂肪酸组成模式的影响，因此饵料脂肪酸组成是亲虾饲料的重点。

4 结语

凡纳滨对虾亲虾营养强化期间，饲料中添加10%～20%的南极磷虾粉可较好的促进亲虾体内的营养积累，提高繁殖产卵水平。

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责任编辑 朱宝象

Effect of Antarctic Krill Meal in Diet on the Fecundity ofLitopenaeusvannameiBroodstocks in Nutrient Enrichment Phase

ZHANG Yu-Ling1,2，KONG Jie2,3，LIANG Meng-Qing2,3，LUO Kun2,3，LUAN Sheng2,3，CAO Bao-Xiang2,3
(1. Collage of Marine Life Sciences, Ocean University of China, Qingdao 266003, China;2. The Key Laboratory for Sustainable Utilization of Marine Fisheries Resources of Ministry of Agriculture, Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Qingdao 266071, China;3. Laboratory for Marine Fisheries Science and Food Production Processes, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology, Qingdao 266071, China)

To study the function of Antarctic krill meal toLitopenaeusvannameibroodstocks in their nutrient enrichment phase, we designed three kinds of artificial formula diets with different krill meal content (0, 10%, 20%), which were numbered Diet K0, Diet K10and Diet K20, respectively, in this study. Three kinds of artificial formula diets were used to feedL.vannameibroodstocks in their nutrient enrichment phase for 60 days, while the fresh bait,Nereididae, was used as the control. After 60 days’ nutrient enrichment phase, the females were subjected to unilateral eyestalk ablation, then mature females were subjected to artificial fertilization. The number of eggs (fecundity) was estimated, as well as the egg hatchability and metamorphism rate. In addition, the egg diameter and fatty acids profile were also measured. Fatty acids profile of the three kinds of artificial formula diets was analyzed, so did the fresh bait. The spawning rate, continuous spawning rate and average spawning times in four treatment groups were calculated. The results showed that the female broodstocks in control group had the highest fecundity, but had no significant difference (P>0.05) with Diet K10and Diet K20group. There was no significant difference (P>0.05) between the four groups about egg hatchability. As to metamorphism rate, the control group, Diet K10and Diet K20group had no significant difference (P>0.05) with each other, and had significant difference (P<0.05) with Diet K0group. Diet K0, Diet K10and Diet K20groups had higher spawning rate, continuous spawning rate and average spawning times than the control group. Diet K20group had the maximal egg diameter, had no significant difference (P>0.05) with Diet K10group, and had significant difference (P<0.05) with Diet K0group and control group. Fatty acids profile analysis showed that there was a positive correlation between the fatty acids profiles in eggs and in diets partly. Furthermore, the egg fatty acids profiles in Diet K10and Diet K20groups had the similar even superior status than that in control group. We concluded that Diet K10and Diet K20which contained certain content krill meal (10%～20%) could be the excellent artificial formula diets inL.vannameibroodstocks’ nutrient enrichment phase.

Litopenaeusvannameibroodstock; antarctic artificial formula feed; krill meal; nutrient enrichment; fertilized quality; fatty acids profiles

中国水产科学研究院黄海水产研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(20603022016006)；山东省重点研发计划项目“凡纳滨对虾耐盐碱品种选育及健康养殖技术研究”(2016GSF115030)资助 Supported by Central Public-interest Scientific Institution Basal Research Fund，YSFRI,CAFS(20603022016006)and Key Research and Development Project of Shandong Province“Study on Breeding and Healthy Cultivation Techniques ofLitopenaeusvannameiin Saline-alkali Water”(2016GSF115030)

2016-11-02；

2017-01-20

张玉玲(1992-)，女，硕士生，研究方向为水产动物营养及育种。E-mail：chenxiyuling@126.com

❋❋ 通讯作者：E-mail：jakmail@163.com

张玉玲1，2， 孔 杰2，3， 梁萌青2，3， 罗 坤2，3❋❋， 栾 生2，3， 曹宝祥2，3
(1.中国海洋大学海洋生命学院，山东 青岛 266003；2.中国水产科学研究院黄海水产研究所，农业部海洋渔业资源可持续利用重点开放实验室，山东 青岛 266071；3.青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，山东 青岛 266071)

S963

A

1672-5174(2017)06-069-09

10.16441/j.cnki.hdxb.20160370

张玉玲，孔杰，梁萌青，等. 饲料中添加南极磷虾粉对营养强化阶段凡纳滨对虾亲虾产卵的影响[J]. 中国海洋大学学报(自然科学版), 2017, 47(6): 69-77.

ZHANG Yu-Ling，KONG Jie，LIANG Meng-Qing, et al. Effect of Antarctic krill meal in diet on the fecundity ofLitopenaeusvannameibroodstocks in nutrient enrichment phase[J]. Periodical of Ocean University of China, 2017, 47(6): 69-77.