刘 玉，柴俊雯，陈红刚，陆国弟，杜 弢*,2,3

（1.甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃省中药质量与标准研究重点实验室，甘肃 兰州 730000；3.甘肃中医药大学药用植物遗传育种研究所，甘肃 兰州 730000）

不同基源党参种子冰冻切片技术探讨

刘 玉1，柴俊雯1，陈红刚1，陆国弟1，杜 弢*1,2,3

（1.甘肃中医药大学药学院，甘肃 兰州 730000；2.甘肃省中药质量与标准研究重点实验室，甘肃 兰州 730000；3.甘肃中医药大学药用植物遗传育种研究所，甘肃 兰州 730000）

以不同基源的党参为试材进行冰冻切片，种子经过前处理、冷台固定、冷冻切片、展片、染色、观察并拍照等步骤，结果表明，当冷台温度为-20℃、OCT包埋剂冷冻5～8 min、切片厚度为8～12 μm时，可以获得较清晰的种子横（纵）切面图，切片组织完整性和图片清晰度效果较好。

党参；川党参；素花党参；种子；冰冻切片；技术

冰冻切片是一种在较低温条件下使组织快速冷冻到一定的硬度，然后进行切片的一种方法，且不经过脱水和透明、浸蜡等一系列的繁琐前期实验步骤，组织形态不会收缩，具有简便、快速、易操作、环境污染小等特点[1]。常用于组织化学、免疫定位及原位杂交等研究，在动物和人体的研究、临床手术中已被广泛应用[2]，近年来也逐渐应用于药材的根、茎、花、果实和种子研究[3～5]。

本试验以不同基源的党参为主要试材，在最短时间内制作出高质量的切片，试图建立一种适合于党参种子快速、简便、高效的冰冻切片技术。

1 仪器与材料

1.1 仪器

德国产Leica-CM 1950型恒冷切片机；日本产Feather一次性刀片；尼康80i显微成像系统。……