周丽敏，马文洁，武炳瑾，张德强，杨智全，孙道杰

(西北农林科技大学农学院，陕西杨凌 712100)

小麦穗突变体 Sda1与其野生型叶片总蛋白双向电泳体系的建立

周丽敏，马文洁，武炳瑾，张德强，杨智全，孙道杰

(西北农林科技大学农学院，陕西杨凌 712100)

为探索适合小麦穗突变体 Sda1叶片蛋白的双向电泳体系，寻找Sda1与其野生型叶片的差异蛋白，以Sda1与其野生型的抽穗期叶片为材料，从蛋白质提取、双向电泳条件等方面对适合 Sda1及其野生型叶片蛋白的双向电泳体系进行探索。分析试验得到的双向电泳图谱，发现利用TCA/丙酮提取叶片总蛋白，用pH 4～7的17 cm线性胶条，采用13%浓度的分离胶，上样量为900 μg，利用改良的等电聚焦程序，能够得到背景清晰、分辨率高的电泳图谱；电泳图谱在低分子区蛋白点分布均匀，并且重复性好。利用PDQuest 8.0.1 软件分析图谱，得到27个差异点蛋白，相比于野生型植株， Sda1突变体表现为蛋白表达量下调与缺失，发现6个缺失蛋白，21个表达下调蛋白。

小麦；穗突变体；叶片；双向电泳；2-DE图谱

小麦是中国的主要粮食作物之一，产量性状的改良是目前小麦遗传改良的重要方面[1]。对小麦产量性状影响较大的是穗部性状，包括穗粒数、小穗数、千粒重等[2]。旗叶是籽粒干物质积累的重要来源[3]，研究小麦穗突变体 Sda1及其野生型叶片的蛋白质组学，对提升小麦穗粒数与叶片的“源-库”关系的认识具有重要意义。

蛋白质组技术是后基因组时代的重要工具，它是在基因表达水平上对生命活动的本质进行研究，常利用高分辨蛋白质双向电泳技术对蛋白质进行分离。……