蔡 准，陈国福，吴丽君，张雪鹏，孟祥潮

(华北理工大学附属医院 肿瘤外科，河北 唐山 063000)

论 著 doi:10.11724/jdmu.2016.06.05

shRNA沉默ADAM17基因对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响

蔡 准，陈国福，吴丽君，张雪鹏，孟祥潮

(华北理工大学附属医院 肿瘤外科，河北 唐山 063000)

目的 利用shRNA干扰沉默人乳腺癌细胞MCF-7的解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinases 17，ADAM17)基因，观察其对细胞增殖的影响。方法 针对ADAM17基因设计合成具有特异性的ADAM17-shRNA，经脂质体LipofectamineTM 2000转染MCF-7细胞。实验设对照组(空白PBS)、干扰组(转染干扰无义序列ADAM17-shNC)、实验组(转染ADAM17-shRNA)，采用Realtime PCR检测各组细胞ADAM17 mRNA的表达水平，四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞的增殖活性，流式细胞仪检测细胞周期变化。结果 实验组ADAM17 mRNA的相对表达量显著低于对照组和干扰组，差异有统计学意义(P<0.05)；实验组的MCF-7细胞增殖活性较其他两组明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)；实验组的MCF-7细胞进入S期(23.60±1.09)%和G2/M期(6.30±0.82)%的比例降低，绝大多数细胞停留在G0/G1期(65.17±1.35)%，细胞周期延缓，与对照组、干扰组相比较差异具有显著性意义(P<0.05)。结论 ADAM17-shRNA对人乳腺癌细胞MCF-7的ADAM17基因具有沉默作用，从而抑制MCF-7细胞的增殖活性，延缓细胞周期进展。

解聚素-金属蛋白酶17；短发夹RNA；乳腺癌；增殖

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤。近年来，在全球范围内，每年新增乳腺癌患者约有138万例，占女性癌症病例的23%[1]。中国成为乳腺癌发病率增长最快的国家之一[2]。解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinases 17，ADAM17)是解聚素-金属蛋白酶家族的重要成员之一。具有解聚素和金属蛋白酶的活性，ADAM17发挥蛋白剪切酶样的作用，释放或启动大量结构和功能不同的分子，在肿瘤细胞中参与多种生物学行为[3-4]。国内外研究均表明ADAM17在多种恶性肿瘤中都有高表达，而在正常组织和细胞中却表达量很少，参与肿瘤的发生、增殖、侵袭和转移的过程[5-7]。本研究利用ADAM17-shRNA转染乳腺癌细胞MCF-7，观察转染后细胞增殖能力的变化，从而揭示ADAM17与乳腺癌细胞增殖的关系。

1 材料和方法

1.1 材 料