冬小麦黄矮病毒的分子生物学鉴定试验研究
2016-12-29杜秋丽
杜秋丽
(济南大学泉城学院,山东 烟台 265600)
冬小麦黄矮病毒的分子生物学鉴定试验研究
杜秋丽
(济南大学泉城学院,山东 烟台 265600)
本研究以检测冬小麦黄矮病毒(BYDV-PAV)的分子生物学特征为目的。首先,通过电击法将3种质粒(UV1304、UV1306、UV1304rtd)转化土壤农杆菌(EHA105、4404,GV3101等)。然后,通过机械损伤使含有上述质粒的农杆菌侵染小麦(西农749、小偃6号、张氏3个品种),并将侵染后的小麦放在室外进行处理,至表现出感染病毒的症状时提取病毒RNA并进行检测。经过一段时间的处理后,只有西农749表现出症状,RNA电泳也显示出提取物中存在RNA,但是经过RT-PCR反转录然后再PCR扩增cDNA后进行电泳出现负结果。3种质粒的cDNA电泳结果出现相似现象:以CP5′+MPR1为引物得到的cDNA电泳均无条带;其他引物得到的cDNA电泳均显示相似的条带,而且因引物不同条带位置也不同。
冬小麦黄矮病毒(BYDV-PAV);土壤农杆菌(GV3101);反转录PCR(RT-PCR);聚合酶链式反应(PCR)
1 研究背景和意义
1.1 研究背景
大麦黄矮病毒(Barley Yellow Dwarf Viruses),在全世界均有分布,其寄主广泛,可侵染150多种单子叶植物,特别是大麦、小麦、燕麦、水稻等多种禾谷类作物。每年在全球范围内,此类病毒对粮食生产会造成一定程度的危害,大发生时会导致严重减产。这类病毒除了在经济上的重要性外,它们的基因表达机制、进化与传播介体和寄主的作用机制,几十年来一直吸引着人们的研究兴趣[1~4]。
1.2 研究意义
小麦黄矮病是我国北方麦区的主要病毒病,由大麦黄矮病毒 (Barley Yellow Dwarf Virus,简称BYDV)引起。该病的流行难以预测,发病后又不可治愈,被称为“小麦癌症”,一般年份减产5%~10%,流行年份减产30%以上,历史上因小麦黄矮病毒感染而导致巨大经济损失的实例普遍存在。……
