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亚麻花蕾发育中MS2-F基因的原位杂交

2016-12-24伊六喜斯钦巴特尔侯建华张辉高风云周宇

中国麻业科学 2016年6期

伊六喜,斯钦巴特尔,侯建华,张辉,高风云,周宇

(1.内蒙古农业大学农学院,呼和浩特010019;2.内蒙古农牧业科学院,呼和浩特010031)

亚麻花蕾发育中MS2-F基因的原位杂交

伊六喜1,2,斯钦巴特尔2,侯建华1,张辉2,高风云2,周宇2

(1.内蒙古农业大学农学院,呼和浩特010019;2.内蒙古农牧业科学院,呼和浩特010031)

本研究采用常规石蜡切片方法和原位杂交技术,以雄性可育株和雄性不育株亚麻为材料,利用T7和SP6引物对体外转录合成地高辛标记的MS2-F基因特异cRNA探针,并与亚麻花蕾切片进行原位杂交,观察MS2-F mRNA在亚麻花蕾内的时空表达信号。结果发现:亚麻MS2-F在四分体时期和小孢子发育早期的花蕾绒毡层中有杂交信号,而在四分体时期之前的绒毡层细胞中,没有MS2-F杂交信号;该基因从四分体时期开始到形成小孢子早期的绒毡层细胞中表达,进一步证明了该基因在亚麻花蕾发育过程中起着非常重要的作用,但是否具有关键性的作用需要进一步的深入研究。

亚麻;花蕾;基因;原位杂交

亚麻(Linum musitatissimum)MS2-F基因是亚麻中首次克隆的核雄性不育相关基因。该基因与玉米、油菜、小麦、甜菜等多种植物雄性不育基因具有同源性,其中同源性最高是油菜的基因MS2Bnap和拟南芥MS2(male sterility 2),分别为59.65%、59.16%。另外水稻和小麦等作物的脂酞辅酶A还原酶的基因具有较高的同源性。诸多研究报道该基因具有脂酞辅酶A还原酶的作用[1]。其cDNA大小为1709 bp,该基因开放阅读框架为1608 bp,编码535个氨基酸,5′端非编码区为70 bp,3′端非编码区为3l bp。MS2-F基因含有两个雄性不育保守区:NAD结合区的氨基酸序列从第52到第354;……

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