脂血标本对生化检测结果的影响及对策

2016-12-23李海英冯小娟朱占兰

实验与检验医学 2016年6期

关键词：脂血生化标本

李海英，冯小娟，朱占兰

(连云港市东方医院，江苏连云港222042)

脂血标本对生化检测结果的影响及对策

李海英，冯小娟，朱占兰

(连云港市东方医院，江苏连云港222042)

目的探讨脂血标本对生化检测结果的影响及处理办法。方法分别检测不同浓度模拟脂血标本（分成A、B、C、D、E5组）聚乙二醇(PEG)处理前、后生化结果，并进行统计学处理。结果与A组血清处理前结果比较，C组GLU结果有统计学差异(P<0.01)，D组除K+、Na+、Cl-外均有统计学差异(P<0.01)；E组所有结果均有统计学差异(P<0.01)；⑵经10%PEG处理后结果与A组血清处理前比较，除K+、Na+、Cl-无统计学差异(P>0.05)，其他指标均有统计学差异（P<0.01)；经5%、40%PEG处理后检测结果与A组血清处理前比较有统计学差异(P<0.01)；20%PEG处理后检测结果与A组血清处理前比较无统计学差异(P>0.05)；⑶C组GLU指标、D组、E组所有指标经20%PEG处理前后结果比较差异均有统计学意义(P<0.01)，B组指标、C组除GLU外其他指标经20%PEG处理前后结果比较差异均无统计学意义(P>0.05)；各组血清经20%PEG处理后结果与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论当脂血浓度等于1%时，即对GLU的检测造成影响，当脂血浓度等于2%时，除对K+、Na+、Cl-的影响较少外，对其他指标均造成显著性影响；当脂血浓度达到5%时，对所有指标均有影响。20%PEG能消除脂血标本的影响，简便易行，便与推广。

脂血；聚乙二醇；生化检测

脂血是临床实验室最常见的干扰因素，患者由于进食高脂饮食或者本身的高脂血症，血浆或血清常呈浑浊状，若乳糜微粒过多可呈乳白色，也称“乳糜血”，大量的乳糜微粒对入射光产生散射，严重干扰生化结果[1-3]。如不处理，生化指标的测定将会受到干扰，如何处理脂血标本并得到正确的检验结果，很多人想出很多办法，如用高速离心法、氯仿和乙醚以及其他处理方法等[4，5]，但是目前还没有一个比较成熟的解决方案。本文通过模拟脂血标本并采用不同浓度PEG进行处理，力求解决高脂血影响临床生化测定的问题。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源随机收集新鲜健康体检者血清200份，要求无溶血、无黄疸、无脂血，标本总量至少300ml，充分混匀后备用。

1.2 标本分组将收集到的血清分成5组：⑴A组（原始血清组）；⑵B组（0．5%模拟脂血组）：原始血清49.75ml+脂肪乳0.25ml；⑶C组（1%模拟脂血组）：原始血清49.50ml+脂肪乳0.50ml；⑷D组(2%模拟脂血组)：原始血清49.00ml+脂肪乳1.00ml；⑸E组(5%模拟脂血组)：原始血清95.00ml+脂肪乳5.00ml。

1.3 模拟血清的聚乙二醇(PEG)处理方法分别配置5%、10%、20%、40%PEG溶液。按实验要求将模拟血清和不同浓度的PEG溶液按2：1比例混合，室温静置10min，4000r/min离心5min，小心吸取上清液部分检测，结果乘以稀释倍数。

1.4 仪器和试剂仪器为美国西门子公司生产RL Max全自动生化分析仪，试剂均为仪器原装配套试剂。30%脂肪乳为四川科伦药业有限公司生产，产品批号：F15080810-1。

1.5 实验方法检测前对仪器进行校准和定标，然后分别测定各组血清生化指标、不同浓度PEG处理5%模拟脂血组标本及最佳PEG浓度处理后各组血清生化指标，重复10次，并记录TBIL、TP、ALB、ALT、AST、GGT、GLU、K+、Na+、Cl-检测结果。1.6统计学处理应用SPSS 17.0软件处理，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同浓度模拟脂血处理前测定结果各组处理前结果与A组血清处理前结果比较，B组均无统计学差异(P>0.05)；C组除GLU有统计学差异(P<0.01)，其余结果均无统计学差异(P>0.05)；D组除K、NA、CL结果无统计学差异(P>0.05)，其余结果均有统计学差异(P<0.01)；E组所有结果均有统计学差异(P<0.01)。见表1。

2.2 不同浓度PEG处理5%模拟脂血后结果10%PEG处理后结果与A组血清处理前比较，除K+、Na+、Cl-无统计学差异(P>0.05)，其他指标均有统计学差异（P<0.01)；经5%、40%PEG处理后检测结果与A组血清处理前比较有统计学差异(P<0.01)；20%PEG处理后检测结果与A组血清处理前比较无统计学差异(P>0.05)。见表2。

表1 不同浓度模拟脂血标本经20%PEG处理前后结果（x±s）

2.3 20%PEG处理各组模拟脂血检测结果C组GLU指标和D组、E组所有指标经20%PEG处理前后结果比较差异均有统计学意义(P<0.01)，B组指标和C组除GLU外其他指标经20%PEG处理前后结果比较差异均无统计学意义(P>0.05)；各组血清经20%PEG处理后结果与A组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

3 讨论

高脂血对临床生化指标测定的主要干扰机制包括光散射、血液标本中物质极性或非极性增加等，同时大量不可溶物质不断增加，也可使血浆标本出现混浊。通常情况下，密度较大的脂血不会对临床生化测定结果产生较大影响，但中度和较高密度脂血可对检测结果产生严重影响[6]。目前全自动生化分析仪多采用双试剂、双波长来避免或减少来自试剂空白和样品空白对测定光吸收的干扰，提高测定的特异度与灵敏度[7]。这样虽然可以消除轻、中度脂血对大部分生化指标的检测干扰，但严重脂血时，大部分生化指标的测定仍会受到脂质颗粒的严重干扰，甚至无法测定[8]。本文发现当脂血浓度等于1%时，即对GLU的检测造成影响，当脂血浓度等于2%时，除对K+、Na+、Cl-的影响较少外，对TBIL、TP、GLU的检测造成正干扰，对ALB、ALT、AST、GGT的结果造成负干扰；当脂血浓度达到5%时，对所有指标均有严重影响，尤其是ALT、AST的检测出现负值，造成检测失败。这与一些研究是一致的[9]。分析原因可能与TBIL、TP、ALB、GLU采用终点法有关，TP、ALB由于采用单试剂，抗干扰能力减弱，影响显著，研究认为脂血对TP的影响是正干扰，对ALB的影响说法不一，可能与ALB采用方法有关。脂血对TBIL的干扰可能与其影响重氮化进程有关，但具体机制尚待进一步研究。ALT、AST虽然采用速率法检测，但在严重脂血时出现负值可能与波长（主波长340nm、副波长700nm）的选择有关。中度脂血虽然对K+、Na+、Cl-的检测未造成影响，但由于脂类物质沉积于电极表面，将影响检测准确性和寿命，因此对脂血标本进行处理具有一定意义。

表2 不同浓度PEG处理5%模拟脂血结果（x±s）

PEG属于高分子化合物，具有良好的化学稳定性，且无毒性和刺激性，被广泛应用在医学临床实际工作中。将PEG配制成5%、10%、20%和40%不同浓度，分别处理5%模拟脂血标本后发现，5% PEG和10%PEG处理5%高脂血清不够彻底，效果不好，40%PEG处理高脂血清虽然彻底，但对检测结果影响较大。只有20%PEG处理的高脂血清结果与原始血清结果差异无统计学意义(P>0.05)，为首选的PEG浓度。这与一些研究也是一致的[11，12]。脂血标本能够对临床生化测定结果产生严重不良影响，但通过实验笔者认为使用20%PEG溶液处理标本，简便易行，能消除脂血对测定结果的影响，值得推广。

[1]林景涛，翟锬，代艳杰，等.高脂血对血清酶类活性测定影响及处理方法[J].检验医学与临床，2010，7(15)：1542-1546.

[2]张正云，何清.高脂血标本对血红蛋白的干扰及校正方法[J].实验与检验医学，2014，32(5)：64-645.

[3]高杰.检验科应重视分析前标本因素对检验结果的影响[J].实验与检验医学，2012，30(5)：461-462.

[4]黄琨波.消除脂血对生化测定干扰的对比实验研究[J].海峡药学，2014，26(12)：193-194.

[5]甄广怀，周玉萍，陈达富.不同方案消除血脂对生化测定干扰的研究[J].检验医学与临床，2015，12(16)：2406-2407.

[6]钱建平，熊怀民，蒋廷旺.消除脂血对临床生化检验常用指标干扰的方法比较[J].北华大学学报(自然科学版)，2013，14(5)：576-577.

[7]朱征，丁显平，杨敏，等.高脂血对临床生化测定影响及处理方法的临床研究[J].国际检验医学杂志，2012，33(20)：2533-2560.

[8]胥华猛.3种方法消除脂血对生化测定干扰的对比研究[J].国际检验医学杂志，2013，34(14)：1813-1817.

[9]隆维东，黄冬悦，李坚，等.脂质清除剂Lipolear消除脂血对常规生化项目检测干扰的效果评价[J].国际检验医学杂志，2014，35 (1)：72-74.

[10]董立杰.标本脂血对临床生化检测结果的评估及其对策[J].实用医技杂志，2010，17(4)：344-346．

[11]刘万彬，隆维东.聚乙二醇4000处理脂血后对生化结果的影响[J].国际检验医学杂志，2012，，33(4)：504-506.

[12]靳四海.高脂血对临床生化测定的影响探讨[J].中国实用医药，2015，10(23)：57-59.