牦牛和犏牛睾丸SAMD12基因的克隆测序及其mRNA水平比较
2016-12-22金素钰雷杰雯郑玉才
杨 乐,黄 林,金素钰,雷杰雯,郑玉才
(西南民族大学生命科学与技术学院,四川 成都 610041)
牦牛和犏牛睾丸SAMD12基因的克隆测序及其mRNA水平比较
杨 乐,黄 林,金素钰,雷杰雯,郑玉才
(西南民族大学生命科学与技术学院,四川 成都 610041)
SAMD12是新近发现的SAM结构域家族成员.为进一步探究犏牛雄性不育的分子机制,实验从健康成年牦牛(n=10)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸组织中提取总RNA,利用常规基因克隆技术,对牦牛SAMD12基因进行克隆测序,并采用实时荧光定量PCR技术,比较牦牛和犏牛睾丸中SAMD12基因mRNA水平.结果本实验克隆获得了牦牛SAMD12基因的3种变异体,分别命名为v715、v779和v852.v715与普通牛5号变异体完全对应;v779含SAM结构域但与普通牛序列存在一些差异,可能是SAMD12基因的新变异体类型;v852无结构域部分可能不表现活性.定量PCR结果显示:SAMD12基因在牦牛和犏牛睾丸中均有表达,但表达量差异不显著,推测其表达水平与犏牛雄性不育无直接关系.
牦牛;犏牛;睾丸;SAMD12基因;杂交雄性不育
犏牛是母牦牛(Bos grunniens)与普通牛(Bos taurus)的杂交后代,其体型、产肉和产乳等生产性能均显著高于牦牛,但F1~F3代为雄性不育,无法产生正常的精子[1],影响了杂种优势的利用.犏牛雄性不育的分子机制尚不清楚,已有研究推测可能涉及多种基因的异常表达[2-4].本实验室前期研究也发现,多种功能各异的基因或蛋白质,在牦牛和犏牛睾丸中表达存在显著差异,包括杂交不育基因PRDM9[5]、多种蛋白质[6]、Msh4基因和FABP5基因等[7-8].
SAM是一类新发现的结构域,为包含70个氨基酸残基……