王军军， 王雅楠， 徐大勇， 蒋伶活

(江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122)



白念珠菌CaGDT1基因的功能研究

王军军， 王雅楠， 徐大勇， 蒋伶活*

(江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122)

人类跨膜蛋白TMEM165与酿酒酵母ScGdt1均属于阳离子/钙离子交换器家族的成员，在本研究中，通过序列比对在白念珠菌中发现了ScGDT1的同源基因CaGDT1，表型互补实验显示CaGDT1基因的表达能够抑制ScGDT1基因缺失所造成的钙离子敏感性，证明CaGDT1是ScGDT1的同功基因。此外，通过同源重组原理敲除了CaGDT1的2个等位基因。表型筛选结果表明gdt1/gdt1缺失株对钙离子、细胞壁和内质网3种胁迫均不敏感，而对酮康唑和特比萘芬2种抗真菌药物具有耐受性。

白念珠菌；CaGDT1；基因敲除；耐药性

白念珠菌是一种免疫力低下人群的条件致病菌，寄生于正常人体的皮肤黏膜，与其宿主免疫系统维持平衡的状态[1]。在免疫缺陷病人体内，它能够入侵组织，引起严重的组织感染[2]。它能以不同的形态生长，包括酵母态、假菌丝和真菌丝3种形态[3]。在有血清的条件下，白念珠菌细胞由酵母态转变成菌丝态细胞，这种转变提升了其入侵宿主细胞的能力[4]。在真核生物细胞中，钙离子是最普遍且最重要的信号传导分子。钙离子不仅参与细胞内多种基础代谢反应，而且作为一种多功能的信号载体，调节细胞内各种生命活动[5-6]。在酿酒酵母的细胞质中，通过细胞质膜以及细胞器膜上的钙转运蛋白和钙离子交换器将胞内钙离子含量调节在一个最佳的钙浓度，维持胞内钙稳态[7-9]。……