金属还原酶FreB2对烟曲霉铁吸收及氧化压力应答的影响
2016-12-21王伟伟吴翠娇张姗姗
王伟伟 , 吴翠娇*, 赵 巍, 张姗姗, 王 斌
(1.青岛大学医学院 组织学与胚胎学教研室,山东 青岛 266071;2.青岛大学医学院 微生物学教研室,山东 青岛 266071)
金属还原酶FreB2对烟曲霉铁吸收及氧化压力应答的影响
王伟伟1, 吴翠娇1*, 赵 巍2*, 张姗姗1, 王 斌2
(1.青岛大学医学院 组织学与胚胎学教研室,山东 青岛 266071;2.青岛大学医学院 微生物学教研室,山东 青岛 266071)
利用构建的烟曲霉金属还原酶基因(AFUA-1G00350,FreB2)缺失突变株,对烟曲霉金属还原酶基因FreB2功能进行初步研究,为揭示该基因与烟曲霉的致病关系提供依据。比较野生株和基因缺失突变株在AMM和无铁AMM液体培养基中生长时高铁还原酶的活性,绘制不同时间野生株和基因缺失突变株在AMM和无铁AMM液体培养基中生长时高铁还原酶活性曲线。利用Real-Time PCR方法分析SreA、SidA、FetC、FtrA和FreB这些与铁的吸收相关基因的mRNA的表达量变化。测定野生株和基因缺失突变株对氧化压力的敏感性及胞内活性氧物质含量。不论在AMM液体培养基中还是在无铁AMM液体培养基中培养时,突变株高铁还原酶的活性都明显高于野生株高铁还原酶活性。与野生株相比培养60 h时,突变株SreA、SidA、FetC、FtrA和FreB这些与铁的吸收相关基因的表达量出现明显上调。氧化压力敏感性实验显示,基因缺失突变株对H2O2的敏感性显著增强,同时胞内活性氧物质含量明显增多。金属还原酶基因FreB2在烟曲霉铁吸收及氧化压力应答过程中发挥作用;烟曲霉与铁吸收相关基因之间存在功能互补效应。
烟曲霉;金属还原酶;Real-Time PCR;活性氧物质……p>
