李淑红,葛俊伟

(东北农业大学动物医学学院，黑龙江 哈尔滨 150030)



优化鸭病毒性肝炎弱毒活疫苗(CH60株)的生产工艺参数

李淑红,葛俊伟

(东北农业大学动物医学学院，黑龙江 哈尔滨 150030)

鸭肝炎病毒属于小核糖核酸病毒，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个血清型。目前，我国只发现鸭病毒性肝炎病毒I型。鸭病毒性肝炎弱毒活疫苗(CH60株)可用于预防I型鸭肝炎。根据制苗用毒液的制备工艺环节中，不同的鸡胚接种日龄、毒种不同的稀释倍数对鸡胚死亡的高峰时间、每胚的平均收获单产结果都不同。目前存在鸡胚的死亡时间靠前，收率低等问题，为了得到更稳定的产品质量，还需要进一步优化疫苗的生产工艺参数。

鸭；病毒性肝炎弱毒活疫苗(CH60株)；鸡胚接种日龄；毒种稀释倍数

1 材料

毒种：鸭病毒性肝炎鸡胚化弱毒株(CH60株)，由哈药集团生物疫苗有限公司提供，符合毒种标准要求。鸡胚：选用哈药集团生物疫苗有限公司SPF鸡场提供的SPF种蛋，分别孵化成9日龄、10日龄和11日龄的鸡胚。0.85%生理盐水：由哈药集团生物疫苗有限公司配制、灭菌。

2 方法

分组:将鸡胚接种日龄和毒种稀释倍数交叉做试验。鸡胚按孵化日龄分为9日龄、10日龄、11日龄。每个日龄的SPF鸡胚450枚。9日龄、10日龄、11日龄鸡胚均来源于同一批次SPF种蛋。毒种稀释倍数分别为50倍、100倍、5000倍。

接种:将鸭病毒性肝炎鸡胚化弱毒株(CH60株)用0.85%灭菌生理盐水分别做50倍、100倍、5000倍稀释，分别接种9日龄、10日龄、11日龄SPF鸡胚，经绒毛尿囊腔接种0.2mL/胚。先用75%的消毒酒精喷洒于蛋壳气室部位进行消毒，作用30s，然后用蛋锥在气室正上方中间部位打孔，接种后封蜡，放37℃继续孵育，不必翻蛋。……