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毛细管电泳差异性检测尿液蛋白方法初探

2016-12-20姚远景换利高卫平

天津医科大学学报 2016年4期
关键词:差异检测方法

姚远,景换利,高卫平

(天津医科大学生物医学工程学院,天津 300070)

论著

毛细管电泳差异性检测尿液蛋白方法初探

姚远,景换利,高卫平

(天津医科大学生物医学工程学院,天津 300070)

目的:使用毛细管电泳(CE)与二极管阵列检测(DAD)联用技术(CE-DAD)的差异检测方法,优化膀胱癌患者尿液特异性蛋白的检测条件。方法:对5例膀胱癌患者及5例健康志愿者尿液蛋白中的低丰度蛋白进行含量的差异检测,并使用电解质添加剂对原缓冲体系进行优化,对电渗流进行有效控制,提高低丰度蛋白的分离效率。结果:确立了使用毛细管电泳与二极管阵列检测联用技术对正常人组与非肌层浸润性膀胱癌患者组尿液蛋白的差异检测最佳条件,并经ELISA法平行试验,显示两组低丰度蛋白存在差异相关性。结论:对CE-DAD的差异检测条件进行了初步的探索,为未来标准化检测方法的建立奠定了基础。

毛细管电泳;尿液蛋白;差异检测;电渗流

膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,患病男女比例为4∶1,其中70%~80%的患者为非肌层浸润性膀胱癌,20%~30%为肌层浸润性膀胱癌[1]。对于膀胱癌的临床筛查,检测效率尤为重要。毛细管电泳(CE)这一分离手段,因其成本低、操作简便、耗时短等独特的优点而广泛的应用到相关检测研究中[2-3]。本文拟探讨优化一种毛细管电泳与二极管阵列检测器联用技术(CE-DAD)的差异检测方法的条件,使用超滤离心管对低丰度蛋白质进行有效提取,并使用电解质添加剂提高分离过程中缓冲溶液的离子强度;……

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