张俊龙，罗艳梅

（沈阳中化农药化工研发有限公司，新农药创制与开发国家重点实验室，沈阳 110021）

4种杀线虫剂对南方根结线虫的室内活性测定

张俊龙，罗艳梅

（沈阳中化农药化工研发有限公司，新农药创制与开发国家重点实验室，沈阳 110021）

通过藏红T染色法，确定线虫染色时间，并测定4种常规药剂对南方根结线虫的室内活性。结果显示，染色1 h后，线虫的染色率达到100%。1.8%阿维菌素EC和40%灭线磷EC对南方根结线虫具有良好的活性，LC50值分别为14.926 3 mg/L和15.306 8 mg/L；40%辛硫磷EC和200 g/L丁硫克百威EC活性较差。

杀线虫剂；根结线虫；染色；室内活性；阿维菌素

根结线虫是一类非常重要的植物病原线虫，广泛分布于世界各地，在我国尤为严重［1］。其主要危害番茄、茄子、芹菜、菜豆、黄瓜、苦瓜、菠菜等［2］。随着种植业结构的调整，蔬菜保护地栽培面积迅速扩大，根结线虫病的发生逐年加重，产量损失在30%～50%之间，严重的高达75%，甚至造成绝产［3］。线虫侵染到土壤中，可以在土壤和寄主中快速繁殖并生存，一旦侵染便难以控制，已然成为危害保护地作物最为重要的有害生物之一。

现阶段生产中防治根结线虫的主要手段是化学防治，用于防治根结线虫的化学药剂多为毒性高、残留期长、用量大、成本高的品种，不仅对人和其他非靶标生物造成伤害，而且效果也不理想［4］。本文采用染色法，拟对阿维菌素、灭线磷、辛硫磷和丁硫克百威防治南方根结线虫的生物活性进行研究，为混剂的开发及田间防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试药剂

1.8%阿维菌素EC，山东邹平农药有限公司；200 g/L丁硫克百威EC，陕西省西安西诺农化有限责任公司；40%灭线磷EC，山东省淄博市周村穗丰农药化工有限公司；40%辛硫磷EC，山东埃森化学有限公司；藏红T，国药集团化学试剂有限公司。

1.2 试验对象

南方根结线虫（Meloidogyne incognita），2龄幼虫，沈阳中化农药化工研发有限公司农药基地试验田番茄根结中分离得到，在温室及试验田中培育和繁殖。

1.3 试验方法

1.3.1 药剂配制

将1.8%阿维菌素EC配成1 000 mg/L母液，再用清水稀释成5个质量浓度梯度50，25，12.5，6.25，3.125 mg/L；同样方法，将200 g/L丁硫克百威EC用水稀释为600，300，150，75，37.5 mg/L；将40%辛硫磷EC稀释成200，100，50，25，12.5 mg/L；将40%灭线磷EC稀释成100，50，25，12.5，6.25 mg/L。

1.3.2 根结线虫悬浮液的制备

制作孵化池，取2个直径5 cm的塑料培养皿，将底部去掉，中间夹1张100目的纱网，上下粘牢，放入直径9 cm的培养皿中待用。

孵化池中加入清水，直至刚好没过纱网。取经根结线虫侵染并生长成熟的番茄根部，用清水洗净，在显微镜下用镊子挑取卵囊，放于纱网上，每个纱网放100个卵囊。线虫孵化后进入清水中，形成线虫悬浮液，每2 d收集1次线虫悬浮液。

1.3.3 线虫染色

称取0.5 g藏红T染料，用100 mL蒸馏水配成0.5%染色液［4］。

将线虫悬浮液加热直至线虫全部死亡，取1 mL线虫悬浮液加入到24孔板中，自然沉淀后，将上清液废弃，并加入同体积染色液，分别于10，20，30 min、1 h和2 h后，用清水清洗线虫，记录各处理染色率。未经加热处理的线虫悬浮液为对照。

1.3.4 试验及统计方法

1.8%阿维菌素EC、200 g/L丁硫克百威EC、40%辛硫磷EC和40%灭线磷EC分别设计5个浓度梯度，设清水空白对照。每个处理重复3次。取1 mL药液，分别加入等体积的线虫悬浮液，空白对照加入等量清水。处理72 h后染色，调查死亡率和校正死亡率。

根据死亡率及处理质量浓度进行线性回归，得到毒力回归方程。并依此计算LC50、LC90值。

2 结果与分析

2.1 染色时间分析

随着染色时间的延长，染色率逐渐增高。染色30 min后，染色率接近100%，而染色1 h后，处理后死亡的线虫全部染色（如图1）。

图1 藏红T对南方根结线虫的染色时间

染色后的线虫呈较深的紫红色（如图2），而未经加热的线虫虫体没有被染色，依然呈白色透明状。

图2 藏红T对南方根结线虫染色效果

2.2 不同药剂对南方根结线虫的毒力测定

各药剂对南方根结线虫的毒力测定结果见表1。由表1可知，4种供试药剂对南方根结线虫2龄幼虫的毒力大小依次为：1.8%阿维菌素EC、40%灭线磷EC、40%辛硫磷EC、200 g/L丁硫克百威EC。阿维菌素和灭线磷对根结线虫的活性较高，LC50值分别为14.926 3 mg/L和15.306 8 mg/L；辛硫磷LC50值为34.207 1 mg/L；而丁硫克百威的活性最低，LC50值为75.478 4 mg/L。

表1 不同药剂对南方根结线虫的毒力

3 讨论

室内染色试验中，经藏红T染色处理过的虫体，染色效果理想，染色时间以1 h为宜。试验中各参试药剂均对南方根结线虫表现出一定的活性，其中1.8%阿维菌素EC、40%灭线磷EC对南方根结线虫均表现出较好的室内活性。200 g/L丁硫克百威EC和40%辛硫磷EC表现较差。

目前市场上防治根结线虫的药剂主要有有机磷类和阿维菌素，已登记用于防治根结线虫的药剂也较少，并伴有乱用药的情况。由于开发新杀线虫剂具有成本高，周期长等缺点，因此开发混剂是当下需解决的问题。本实验为室内试验结果，可为复配制剂的研究提供理论参考，如要得到准确结果，需进一步进行田间试验。

［1］刘维志.植物病原线虫学［M］.北京：中国农业出版社，2000，281-304.

［2］赵鸿，彭德良，朱建兰.根结线虫的研究现状［J］.植物保护，2003，29（6）：6-9.

［3］朱卫刚，胡伟群，陈定花.阿维菌素对南方根结线虫的生物活性［J］.现代农药，2008，7（4）：38-39.

［4］万树青.杀线虫剂活性测定中线虫死活鉴别的染色方法［J］.农药，1993（3）：37.

Biological Activity of Four Nematicides on Meloidogyne incognita

ZHANG Jun-long，LUO Yan-mei
（State Key Laboratory of the Discovery and Development of Novel Pesticide，Shenyang Sinochem Agrochemicals Research and Development Co.，Ltd.，Shenyang 110021，China）

Laboratory experiment was conducted with four selected nematicides for Meloidogyne incognita，the dying time and toxic activity were determined by Safranine-T staining method. The results showed that the staining rate of Safranine-T reached 100%. Abamectin 1.8%EC and ethoprophos 40%EC had higher biological activities on Meloidogyne incognita，with LC50values of 14.926 3 mg/L and 15.306 8 mg/L. Phoxim 40%EC and carbosulfan 200 g/L EC had less activities on Meloidogyne incognita.

nematicide；Meloidogyne incognita；stain；biological activity；abamectin

TQ 450.2+1

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2016.02.012

2015-11-04；

2016-02-17

张俊龙（1987—），男，沈阳市人，助理工程师，主要从事杀虫剂创制与开发及应用研究工作。Tel：024-62353364；E-mail：zhangjunlong@sinochem.com

顾林玲）

◆农药应用◆