安先霞林学仕

(1.永靖县川城镇畜牧兽医站,甘肃永靖 731600; 2.永靖县动物疫病预防控制中心,甘肃永靖 731600)

实验室检测奶牛结核病的方法比较

安先霞1林学仕2

(1.永靖县川城镇畜牧兽医站,甘肃永靖 731600; 2.永靖县动物疫病预防控制中心,甘肃永靖 731600)

奶牛结核病属于人畜共患传染病，该病严重危害奶牛养殖业和公共卫生安全，是由牛结核分枝杆菌引起，奶牛是家畜中最易感染该病的动物。多年来，奶牛结核病已成为制约奶牛养殖业发展和危害人类健康的重要因素。为了更好地防控奶牛结核病，用两种方法检测结核病：牛型提纯结核菌素（PPD）皮内变态反应和γ-干扰素检测技术检测比较，分析其优劣，为以后的检测工作提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂盒

瑞士Prionics公司Bovigam牛结核分枝杆菌γ-干扰素ELISA检测试剂盒，购买于北京测迪科技有限公司。

1.1.2 主要试剂

牛结核菌素由哈药集团生物疫苗有限公司生产，Bovigam牛型提纯结核菌素（BoPPD）和Bovigam禽型提纯结核菌素（AvPPD）购买于北京测迪科技有限公司。

1.1.3 试验牛群

选择全县饲养的531头奶牛，从2014年开始到2016年，每年3～4月份和9～10月份，进行结核病检测。

1.2 方法

1.2.1 牛型提纯结核菌素（PPD）皮内变态反应试验

依据国家标准《动物结核病诊断技术（GB/T18645-2002）》，在奶牛颈部用牛型PPD进行皮内变态反应试验，剂量为2000IU/头，分别在注射前和注射后72h测量皮肤厚度，并计算出皮厚差，对于皮厚差在2.0mm以上的（包括2.0mm）疑似阳性牛再进行对侧重复检查，依据国家标准判断结果。

1.2.2 牛结核γ-干扰素检测试验

皮内试验第3d采集单侧阳性牛的血液（每头6ml），放入肝素抗凝管中，轻轻颠倒3～5次，使肝素和血液充分混匀，放入22℃恒温箱中，运送到实验室，并在采血后第20h进行培养。……