艾东旭,徐宏伟，李 玮,张 晶,宋显明,李莲瑞

(1. 塔里木大学 生命科学学院，新疆阿拉尔 843300; 2. 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆阿拉尔 843300; 3.塔里木大学 动物科学学院，新疆阿拉尔 843300)



新疆多浪羊IFN-γ基因地高辛探针的标记与敏感性检测

艾东旭1,徐宏伟1，李 玮1,张 晶1,宋显明1,李莲瑞2,3

(1. 塔里木大学 生命科学学院，新疆阿拉尔 843300; 2. 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆阿拉尔 843300; 3.塔里木大学 动物科学学院，新疆阿拉尔 843300)

为获得多浪羊IFN-γ地高辛探针，并对其标记效率进行检测。将多浪羊pMD-18T-IFN-γ克隆菌进行PCR扩增，经切胶回收及目的基因浓缩后获得目的基因IFN-γ，然后用地高辛标记和检测试剂盒对IFN-γ基因进行标记，获得IFN-γ地高辛探针。IFN-γ的PCR扩增产物经8 g/L琼脂糖电泳分离后转移至Hybond N+膜，膜上显影后进行敏感性检测并计算探针质量浓度，结果显示，IFN-γ地高辛探针在杂交液中的质量浓度为30 μg/L。Southern杂交显示，Hybond N+膜上有IFN-γ基因的双链DNA，且浓缩后的DNA(2.5 μg)标记的特异性探针质量浓度较高，可以在Hybond N+膜上呈现出清晰的杂交条带，证明获得的探针质量浓度符合要求。

多浪羊；IFN-γ基因；地高辛；探针标记；检测

多浪羊主要分布在新疆喀什的麦盖提、岳普湖、巴楚、莎车等县，因其中心产区在麦盖提县，故又称麦盖提羊。其具有个体大、耐干旱、耐低营养水平以及抗逆、抗病、适应性强等优良性状，且肉质鲜嫩多汁、肉色泽纯正，营养价值高，是一个优良肉脂兼用型绵羊品种[1]。

干扰素(inerferon，IFN)是发现最早，也是第一个被克隆化并用于临床疾病治疗的细胞因子，因其基因和蛋白的结构、功能特性不同，被分为3类：Ⅰ型干扰素包括IFN-α(包括多个亚型)、IFN-β等；……