李海利，易秀玲，郎利敏，徐引弟，焦文强，张立宪，张青娴，游 一，王克领⋆，李 奎

（1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南 郑州 450002；2.河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州 450002）

鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测方式的建立和应用

李海利1，易秀玲2，郎利敏1，徐引弟1，焦文强1，张立宪1，张青娴1，游 一1，王克领1⋆，李 奎2

（1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南 郑州 450002；2.河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州 450002）

根据GenBank传染性喉气管炎病毒（ILTV）基因序列，设计合成了1对特异性引物。以ILTV DNA为模板，建立了检测ILTV的PCR检测方法。通过优化PCR反应条件，成功扩增出一条约690 bp的目的基因片段。而鸡传染性法氏囊病病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、禽流感病毒基因组均未扩增为出相应的片段。敏感性试验检测出其DNA最小检出量为10-2μg。重复性试验中对3份检测为传染性喉气管炎病毒阳性病料进行检测，发现3次重复检测的结果完全一致。临床应用中运用上述优化的PCR反应条件进行PCR检测临床送检的16份疑似鸡传染性喉气管炎病毒感染病料，结果显示检出阳性样品6份，将阳性样品的PCR扩增产物克隆后序列分析显示均为鸡传染性喉气管炎病毒。结果表明，建立的PCR方法具有良好的特异性，敏感性和稳定性，可应用于传染性喉气管炎病毒鉴定和临床诊断。

鸡传染性喉气管炎病毒；PCR；检测

鸡传染性喉气管炎（AILT）是由传染性喉气管炎病毒（infectious laryngotracheitis virus， ILTV）引起的一种急性、接触性上呼吸道传染病[1-6]，该病传播快速，自1925年在美国洛岛发现该病以来，现已遍及世界各地养鸡区域[7-13]。……