冯真真

妇科门诊患者人乳头状瘤病毒基因分型检测结果分析

冯真真

人乳头状瘤病毒；基因分型；宫颈癌

人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是专性感染人表皮和黏膜鳞状上皮细胞的常见DNA病毒，其中高危型人乳头状瘤病毒（high-risk human papillomavirus，HR-HPV）是导致宫颈上皮内增生和宫颈癌的主要因素［1］。防治HPV成为预防和治疗宫颈癌的关键［2］。该研究回顾性分析妇科门诊患者806例可疑宫颈病变的HPV-DNA分型检查结果，以了解本地区妇科门诊患者HPV各亚型的分布情况和感染特点，指导宫颈病变的筛查和随访。

1　资料与方法

1.1一般资料以2015年1月—2015年12月在笔者所在医院妇科门诊就诊的慢性宫颈炎、阴道异常出血和流液、白带增多及疑为HPV感染的806例为研究对象，年龄20～70岁，中位年龄48岁。

1.2方法取妇科门诊806例患者的宫颈脱落细胞使用基因芯片法进行HPV-DNA分型 （26种）检测，此检测可检测到17种高危亚型分别是HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，67，68，73和 9种低危亚型分别是 HPV6，11，40，42，43，44，54，55，57。

1.2.1标本采集所有妇科患者均用阴道窥器暴露阴道及宫颈，将宫颈刷于子宫颈外口处，轻压并依顺时针方向旋转3～4周，取得脱落细胞，并置于相应的细胞保存液中。采集的样本应尽快送检，样本4℃保存不超过24 h，-20℃保存不超过6个月，避免反复冻融。

1.2.2仪器与试剂伯乐C-1000 PCR扩增仪；HPV-GenoCam-9600基因芯片检测阅读系统；R16型高速台式冷冻离心机；K30B型干式恒温器；恒温水浴箱。HPV-DNA分型检测试剂盒（港龙生物技术有限公司）。

1.2.3HPV检测主要步骤用试剂盒对采集的脱落细胞进行样本的预处理和DNA提取；用30 L反应体系对所提取的DNA进行PCR扩增；扩增产物加到处理好的芯片上进行DNA杂交和显色。

2　结果

2.1妇科门诊患者的年龄分布及HPV感染情况

共检测妇科门诊患者806例，其中HPV感染阳性患者417例，感染率为51．7%。＜35岁组、35～50岁组、＞50岁组 HPV感染阳性分别占病例数的18．0%、23．1%、10．7%。见表1。

表1　患者的年龄分布及HPV感染情况

2.2HPV感染妇科门诊患者的各亚型分布在HPV感染的阳性样本中，HPV单一型感染占61．9%（258/417）。感染率排在前5位的高危型HPV亚型依次为16、58、68、18、59型，5种高危型占总数的69．8%（180/258），其中HPV16和HPV58为主要感染。发现感染低危型HPV 6、11、40、43、44、53、54、55、66、67型，其中常见的低危型别是6、11、55。2种以上型别的多重HPV感染占26．4%（110/417），混合感染中除了13种高危型HPV不同型别的多重感染外，高危型别与低危型别也有混合感染。

3　讨论

子宫颈癌由人乳头状瘤病毒（HPV）感染引起的，是妇女最常见的恶性肿瘤，每年全球约有46．6万的新发病例，给妇女健康造成了很大的威胁［3，4］。近年来宫颈癌发病有年轻化的趋势。原位癌高发年龄为30～35岁，浸润癌为45～55岁。而高危型HPV持续感染是宫颈内皮瘤样病变以及宫颈癌最常见的致病因素［5］。宫颈癌由初期感染经量变到质变病变成癌的病理过程约为10年，及时筛查癌前病变并使用合理的治疗方法可将癌变的发展及时扼杀，临床调查发现，早期阻断宫颈癌前病变可使其达到100%的治愈率，对宫颈癌的治疗有极其重要的意义［6］。2006年，美国阴道镜和宫颈病理学会（ASCCP），对于超过30岁妇女建立了科学的筛查方案，进行细胞学与HR－HPV联合筛查，可以有效发现宫颈癌前病变，及时进行干预［7］。

该调查研究结果中显示妇科门诊就诊的慢性宫颈炎、阴道异常出血和流液、白带增多及疑为HPV感染的806例患者中感染率排在前5位的高危型HPV亚型依次为16、58、68、18、59型，5种高危型占总数的69．8%。妇科门诊患者有临床症状时，HPV检查又是高危亚型，罹患宫颈癌的概率很大，对感染高危亚型的患者应及时进行进一步检查，并应进行及时的随访及观察。对于低危亚型的HPV6或11感染，应及时检查临床上是否出现疣状突起，及时让性伴侣也进行HPV检查。临床医师根据患者的临床症状、HPV感染的亚型及相关检查对患者进行及时的分流管理。

因此，了解妇科门诊患者HPV感染性阳性患者的年龄分布、感染亚型分布的情况，进行合理的筛查随访管理，使宫颈癌和癌前病变早期发现和及时治疗，在预防HPV感染高危人群的宫颈癌的发生具有重要意义。进行HPV检测的目的是发现有患宫颈癌高风险的人群，而非检测出单纯的HPV感染者。

［1］李华，刘利胜，宋现让，等．宫颈癌患者感染高危型人乳头状瘤病毒的基因型分析［J］．中国卫生检验杂志，2015，25（22）：3909－3910．

［2］刘永良．导流杂交基因芯片检测HPV－DNA亚型1760例结果分析［J］．诊断病理学杂志，2015，22（1）：59－60．

［3］Hospenthal DK，Crouch HK，English JF，et al．Multidrug－resistant bacterial colonization of combat－injured personnel at admission to medical centers after evacuation from Afghanistan and Iraq［J］．J Trauma，2011，21（1）：S52－57．

［4］Chua KY，Grayson ML，Burgess AN，et al．The growing burden of multidrug－resistant infections among returned Australian travelers［J］．Med J Aust，2014，200（2）：116－118．

［5］Tzenov YR，Andrew PG，Voisey K，et al．Human papilloma virus（HPV）E7－mediated attenuation of retinoblastoma（Rb）induces hPygopus2 expression via Elf－1 in cervical cancer［J］．Mol Cancer Res，2013，11（1）：19－30．

［6］Burki TK．Cervical cancer：screening and risk with age［J］．Lancet Oncol，2014，15（3）：e107．

［7］Gold MA，Thomas MA，Huh WK，et al．High－risk human papillomavirus detection in woman with low－grade squamous intraepithelial lesions or higher－grade cytology using the cervista hpv hr test［J］．J Low Genit Tract Dis，2013，17（1）：51－57．

［2016－05－14收稿，2016－06－11修回］

［本文编辑：吴蓉］

R737.33

B

10.14172/j.issn1671-4008.2016.11.009

453000河南新乡，解放军371医院检验科（冯真真）

1.2.4HPV检测结果的判读统计临床HPV阴性标本的检测结果（INS）值，按平均值加3倍的标准差确定阴性参考值为11．0。HPV分型基因芯片检测阅读系统可自动检测INS值，当INS＜11．0时，HPV阴性；当INS≥11．0时，HPV阳性，并报告HPV型别（本试剂盒检测26种HPV型中的一种或多种）。