黄 菁， 虞 玲，隋 俊， 张永臣

南京市第二医院检验科，南京 210003



靶向Survivin siRNA对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达的影响*

黄 菁， 虞 玲△，隋 俊， 张永臣

南京市第二医院检验科，南京 210003

目的 探讨靶向Survivin siRNA对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达的影响。方法 构建靶向Survivin siRNA载体，按照质粒类型分为空白对照组、阴性对照组和阳性实验组，空白对照组仅加入Lipofectamine 2000，阴性对照组加入空载质粒，阳性实验组加入靶向Survivin siRNA质粒，采用RT-PCR检测Survivin、ER mRNA表达水平，采用Western blot检测细胞Survivin、ER蛋白表达水平，并采用MTT法检测各组对MCF-7细胞增殖抑制率。结果 以β-actin作为内参照，空白对照组Survivin、ER mRNA表达量分别为(1.17±0.14)和(0.79±0.11)，阴性对照组分别为(1.15±0.12)和(0.80±0.09)，阳性实验组分别为(0.43±0.03)和(1.94±0.41)，阳性实验组Survivin mRNA表达显著低于空白对照组、阴性对照组，ER mRNA表达显著高于空白对照组、阴性对照组(均P<0.05)；空白对照组、阴性对照组Survivin、ER mRNA表达量比较差异无统计学意义(均P>0.05)。Western blot结果显示，阳性实验组Survivin蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组，ER蛋白表达显著高于空白对照组和阴性对照组。细胞增殖实验结果显示，阳性实验组接种12、24、48 h后MCF-7细胞增殖的抑制率逐渐升高，并显著高于同时段空白对照组和阴性对照组(均P<0.05)。结论 通过siRNA技术干扰Survivin表达能够显著提高MCF-7细胞雌激素受体表达水平，靶向Survivin siRNA在ER阳性乳腺癌的基因治疗中具有潜在的临床价值。

雌激素受体； 小干扰RNA； 乳腺癌； 细胞增殖； Survivin

Survivin属于凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis protein，IAP)家族成员之一[1-2]，在调节细胞凋亡和有丝分裂中扮演着重要角色。国外研究[3]证实Survivin高表达与肿瘤细胞凋亡、放化疗敏感性等生物学行为密切相关。Survivin特异性较高，在正常组织中不表达或仅少量表达，而在肿瘤细胞中呈高表达，因此被认为是肿瘤基因治疗的理想靶点[4-5]。小干扰RNA[6](small interfering RNA，siRNA)能够介导双链RNA转录后基因沉默，因其具有高度特异性和靶向性，而成为基因功能研究的主要工具。……