miR-7对胃癌细胞SGC7901增殖、迁移及侵袭能力的影响及其与黏着斑激酶相关性研究
2016-11-26王建国史春云王建飞
王建国, 史春云, 王建飞, 曹 丽, 钟 理
1河北大学附属医院检验科,保定 0710002保定市儿童医院小儿内科,保定 0710513河北大学生命科学院,保定 071000
miR-7对胃癌细胞SGC7901增殖、迁移及侵袭能力的影响及其与黏着斑激酶相关性研究
王建国1, 史春云2△, 王建飞3, 曹 丽3, 钟 理3
1河北大学附属医院检验科,保定 0710002保定市儿童医院小儿内科,保定 0710513河北大学生命科学院,保定 071000
目的 探讨miR-7对胃癌细胞SGC7901增殖、迁移及侵袭能力的影响及其与黏着斑激酶(FAK)相关性。方法 培养人胃癌SGC7901细胞,将细胞分为miR-7 mimics组、miR-阴性对照组和空白对照组,分别转染miR-7模拟物(miR-7 mimics)、miR-阴性序列和不做任何处理。Real-time PCR检测miR-7表达,MTT法检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移能力和细胞侵袭能力,Western blot检测FAK和FAK Tyr397蛋白表达,利用Pearson相关分析对变量间相关关系进行分析。结果 miR-7 mimics组细胞中miR-7相对表达量(2.86±0.47),显著高于miR-阴性对照组(1.03±0.15)和空白对照组(1.06±0.17),差异有统计学意义(F=635.985,P<0.01);miR-7 mimics组24、48、72和96 h细胞生长抑制率均高于miR-阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);迁移实验中,miR-7 mimics组平均迁移细胞数[(159.52±5.94)/视野],显著低于miR-阴性对照组[(315.42±7.59/视野]和空白对照组[(307.53±8.16)/视野],差异有统计学意义(均P<0.05);侵袭实验中,miR-7 mimics组平均侵袭细胞数[(29.85±4.52)/视野],显著低于miR-阴性对照组[(85.42±5.59)/视野]和空白对照组[(88.53±6.16)/视野],差异有统计学意义(均P<0.05);miR-7 mimics组细胞中FAK、FAK Tyr397蛋白表达量均低于miR-阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);Pearson相关分析显示,细胞中miR-7表达量与FAK和FAK Tyr397蛋白表达量均呈负相关(r=-0.724和-0.874,均P<0.01)。结论 过表达miR-7可显著抑制胃癌SGC7901细胞增殖、迁移及侵袭过程,可能与负性调控FAK蛋白表达有关。
miR-7; 人胃癌SGC7901细胞; 迁移; 侵袭; 黏着斑激酶
胃癌作为我国高发病率的恶性肿瘤,早期多无特异性临床症状或体征,临床确诊时多已处于中晚期,导致患者预后不佳,具有较高病死率[1],目前,该病发生机制尚未完全明确。微小RNA(micro RNA,miRNA)作为具有多种生物学功能的高度保守短小非编码RNA,在细胞增殖、分化、凋亡,以及肿瘤发生中发挥重要作用[2],研究表明,胃癌组织中miRNA表达谱发生改变。miR-7作为miRNA重要类型[3],在肿瘤组织中发挥抑癌因子作用,与多种恶性肿瘤发生、进展及转移过程有关[4-5]。miR-7在胃癌中存在多种信号通路调控不同的靶基因抑制胃癌的发生及进展[6]。……