张　迁，韩　磊，尤文斌

（1.宣化县人民医院普外科，河北宣化 075100；2.河北北方学院附属第一医院普通外科）

结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平的变化及意义

张迁1，韩磊2，尤文斌1

（1.宣化县人民医院普外科，河北宣化 075100；2.河北北方学院附属第一医院普通外科）

目的：探讨结直肠癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）水平的变化和意义。方法：采用双抗体夹心法检测72例结直肠癌患者（术前、术后3个月、术后1年）、30例结直肠腺瘤患者和30例健康体检者血清VEGF和MMP-2的水平。结果：结直肠癌组患者术前血清VEGF和MMP-2水平明显高于结直肠腺瘤组和正常对照组（P＜0.05）；术后3个月，72例结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平明显低于术前（P＜0.05），与正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平与年龄、性别、组织类型、大体分型、肿瘤部位无关（P＞0.05）；与Dukes分期、分化程度、淋巴结转移、浸润深度、肿瘤大小有关（P＜0.05）。术后随访1年时，复发者血清VEGF和MMP-2水平明显高于未复发者（P＜0.05）。结论：血清VEGF和MMP-2水平可能在结直肠癌的早期诊断、病情评估及预后评价中具有重要作用。

结直肠癌；血管内皮生长因子（VEGF）；基质金属蛋白酶-2（MMP-2）

结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤之一，据统计其发病率在男性居第四位、在女性居第三位，严重威胁着人们的生命健康［1］。因此，结直肠癌的早期诊断、正确治疗决策及预后备受关注。血清肿瘤标记物检测是一种无创、有效的检查方法，在辅助结直肠癌的诊断、预后评价中具有重要的临床意义［2］。本文旨在探求血清血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在结直肠癌早期诊断，病情程度及预后评价中的临床意义。

1　对象与方法

1.1研究对象

1.1.1结直肠癌组：以2012年9月-2013 年8月于我科行根治手术的72例结直肠癌患者为研究对象，女性32例、男性40例，年龄28-86岁，平均58.6岁。Dukes分期：A期6例、B期24例、C期42例。全部病例均经病史、查体、实验室有关肿瘤标记物，上、下腹部CT，盆腔MRI，盆腹腔淋巴结彩超，电子结肠镜及病理等检查确诊为结直肠癌且经术后病理证实，全部病例术前均未接受放、化疗等治疗。入选条件：结直肠癌患者不合并高血压、糖尿病以及血栓性疾病等影响VEGF水平者；无严重心、脑、肾功能不全者；不合并其它部位恶性肿瘤；无免疫性疾病。

1.1.2结直肠腺瘤组：同期于我科住院治疗的结直肠腺瘤患者30例，其中女性12例、男性18例，年龄26-80岁，平均53.5岁，全部病例均经电子结肠镜及病理确诊。

1.1.3正常对照组：同期来我院经健康体检证实为健康者30例，其中女性16例、男性14例，年龄24-70岁，平均49.3岁。

以上三组性别构成、年龄等一般情况比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法与试剂 全部受检者均于晨起采集空腹静脉血4ml（结肠癌组患者分别于术前、术后3个月、随访1年时采集静脉血），3000r/min离心10min，分离血清，-20℃冰箱中冻存待测。血清VEGF和MMP-2水平的测定采用双抗体夹心法，实验过程严格按照试剂盒（晶美生物工程公司）说明书进行，测定值按标准曲线换算成VEGF和MMP-2的含量。

1.3统计分析 使用SPSS 17.0统计软件包进行分析，实验数据以均数±标准差表示。采用t检验和方差分析比较组间差异。

2　结果

2.1血清VEGF和MMP-2水平 结直肠癌组患者术前血清VEGF和MMP-2水平明显高于结直肠腺瘤组和正常对照组（P＜0.05）；术后3个月，72例结 直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平明显低于术前（P＜0.05），与正常对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1：

表1　三组血清VEGF和MMP-2水平检测结果（）

表1　三组血清VEGF和MMP-2水平检测结果（）

与正常对照组、结直肠腺瘤组、结肠癌术后3个月比较：*P＜0.05

2.2血清VEGF和MMP-2水平与结直肠临床病理特征的关系 结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平与年龄、性别、组织类型、大体分型、肿瘤部位无关（P＞0.05）；与Dukes分期、分化程度、淋巴结转移、浸润深度、肿瘤大小有关（P＜0.05）：Dukes C期患者明显高于A期和B期患者，低、未分化患者明显高于高、中分化患者，有淋巴结转移者明显高于无淋巴结转移者，肿瘤浸润浆膜层或全层者明显高于未及浆膜者，肿瘤直径≥5cm者明显高于＜5cm者。见表2：

表2　血清VEGF和MMP-2水平与结直肠癌临床病理特征的关系（n=72）

2.3结直肠癌患者随访1年时血清VEGF和MMP-2水平 复发组患者血清VEGF和MMP-2水平明显高于未复发者（P＜0.05）。见表3：

表3　随访1年时结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平（）

表3　随访1年时结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平（）

组别　例数　VEGF（ng/L）　MMP-2（mg/L）复发组　8　380.6±88.5　262.8±35.3未复发组　64　132.3±41.0　178.6±27.8 P＜0.05　＜0.05

3　讨论

VEGF是Ferrara等1989年从牛正常垂体滤泡星型细胞中分离纯化的一种特异性蛋白质，主要作用是参与血管内皮细胞增殖、血管形成以及肿瘤的浸润、转移［3-4］。VEGF是目前所知的促肿瘤血管生成活性最强、最特异的血管生长因子，可以直接作用于内皮使微血管的通透性增高。研究发现，肿瘤细胞VEGF表达水平升高，并且肿瘤细胞表达VEGF是肿瘤具有侵袭性的基础［5］。结直肠癌患者血清VEGF水平升高已被大量研究所证实，目前认为主要是癌细胞分泌、血小板激活或破坏释放以及侵入肿瘤组织的巨噬细胞释放癌细胞分泌的VEGF随穿过血管壁的血液细胞进入血液循环，或是VEGF使血管壁通透性增加，从而弥散到循环血液中。

细胞外基质和基底膜降解是恶性肿瘤局部浸润、转移的必要条件，MMPs是降解细胞外基质蛋白最主要的水解酶。MMPs可促进生长因子分泌，进而加速结肠癌的生长、侵袭以及转移；同时，MMPs还可诱导结肠癌细胞凋亡耐受，使癌细胞逃避免疫监视；MMPs还能促进结肠癌血管生成，丰富的血管可为肿瘤的迅速增殖提供营养和氧分。MMP-2是MMPs家族的重要成员，在肿瘤浸润转移的过程中起重要作用，主要降解Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型胶原、明胶弹性蛋白和层黏蛋白等。

本研究发现，结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平明显高于结肠腺瘤和健康体检者，并且结直肠癌患者血清VEGF和MMP-2水平与Dukes分期、分化程度、淋巴结转移、浸润深度和肿瘤大小有关。本研究提示，血清VEGF和MMP-2水平在结直肠癌发生、发展过程中随恶性程度的增加呈上升趋势，且与结直肠癌病情有关，说明VEGF和MMP-2能较敏感地反应结直肠的恶变过程，在结直肠癌早期诊断、病情判断上有重要意义；并且，VEGF和MMP-2水平升高是结直肠癌获得高侵袭和转移能力的重要因素，在某种程度上可以预测病情的恶化程度。本研究亦发现，结直肠癌患者术后3个月血清VEGF和MMP-2水平接近正常，随访1年时复发组患者血清VEGF和MMP-2水平明显高于未复发组，说明二者能较敏感地反映结直肠癌患者病情和预后的变化，对评估病情具有重要的临床意义。

综上所述，VEGF和MMP-2在结直肠癌的生长、浸润、转移中发挥重要作用，检测血清中VEGF和MMP-2水平对结直肠癌的早期诊断、病情评估和预后评价具有重要的临床价值。

［1］Parkin DM， Bray F， Ferlay J， et al. Global cancer statistics，2002［J］. CA Cancer J Clin， 2005， 55（2）: 74-108.

［2］蔡三军.结直肠肛管癌［M］.北京：北京大学医学出版社，2006.177-178.

［3］吴胤瑛，李恩孝.VEGF在恶性肿瘤中的研究进展［J］.现代肿瘤医学，2005，13（5）：附18-21.

［4］龚丽明，林世杰，王忠明，等.巢式RT-PCR扩增CK20、MMP-7诊断大肠癌淋巴结微转移的初步研究［J］.肿瘤防治研究，2005，32（6）：346-349，345.

［5］Zafirellis K，Agrogiannis G，Zachaki A，et al.Prognostic significance of VEGF expression evaluated by quantitative immunohistochemical analysis in colorectal cancer［J］.J Surg Res， 2008，147（1）:99-107.

CHANGES AND SIGNIFICANE OF SERUM VEGF AND MMP-2 LEVEL OF COLORECTAL CANCER PATIENTS

ZHANG Qian， HAN Lei， YOU Wen-bin
(Department of General Surgery, Xuanhua People’s Hospital, Hebei Xuanhua 075100, China)

Objective: To investigate the changes and signifi cance of the vascular endothelial growth factor （VEGF）and matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） level in serum of colorectal cancer patients. Methods: Double antibody sandwich method was used to detect the serum VEGF and MMP-2 level of 72 colorectal cancer patients （before operation， 3 months and 1 year after operation）， 30 colorectal adenomas patients and healthy controls. Results: The serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients before operation were obviously higher than that of colorectal adenomas patients and healthy controls（P＜0.05）； 3 months after operation， the serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients were signifi cantly lower than that before operation （P＜0.05）， and had no statistical signifi cance compared with healthy controls （P＞0.05）. The serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients were not related to age， sex， histological type， gross classifi cation and tumour location （P＞0.05）； but related to Dukes stage， differentiated degree， lymph node metastasis， depth of infi ltration and tumour size （P＜0.05）. 1 year after operation， the serum VEGF and MMP-2 level of relapsed patients were obviously higher than that of no relapsed patients （P＜0.05）. Conclusions: The serum VEGF and MMP-2 level may play important role in early diagnosis， severity assessment and prognostic evaluation of colorectal cancer.

Colorectal cancer；Vascular endothelial growth factor（VEGF）；Matrix metalloproteinase-2（MMP-2）

R735.3

A

1004-6879（2016）01-003-03

2015-08-12）