党连生 陈 宁 徐 燕

(包头医学院第一附属医院，内蒙古 包头 014010)



T淋巴细胞检测在老年肺炎患者中的临床意义

党连生 陈 宁 徐 燕

(包头医学院第一附属医院，内蒙古 包头 014010)

目的 探讨T淋巴细胞亚群在老年性肺炎中的临床意义。方法 选取老年肺炎患者50例、青年肺炎患者28例和健康体检老年人54例、健康青年人35例为研究对象，采用流式细胞术检测各组研究对象体内T淋巴细胞亚群数量。结果 老年肺炎组患者与老年对照组比较及青年肺炎组患者与青年对照组比较，CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞及CD4+/CD8+比值均有显著差异(P<0.05)；其中青年肺炎组与老年对照组CD3+T淋巴细胞比较差异显著(P<0.05)；但CD8+T淋巴细胞在老年组与青年组间无统计学差异(P>0.05)；CD4+/CD8+比值在老年肺炎组和老年对照组中均表现为随年龄增加而下降趋势。结论 老年人患肺炎可能与免疫功能下降有关。

T淋巴细胞亚群;肺炎

免疫功能的衰老受遗传及环境等多重因素的影响，从胸腺至淋巴细胞的迁移、成熟与免疫老化的特征性改变是T淋巴细胞亚群组成的变化，是老年人群免疫应答功能减弱的重要原因。随着年龄的增加，肺内感染引起的发病率和死亡率上升，已成为危害老年人健康的主要原因〔1〕。老年肺炎的临床表现不典型，并发症多，预后差，因此熟悉掌握其临床特点，早期发现、及时治疗，对于积极防治肺炎保护老年人健康有着重要的意义。究其原因可能与随年龄增长免疫系统保护能力下降有关〔2〕。本文探讨免疫功能在老年肺炎发病机制中的作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年2～12月来我院住院的肺炎患者78例为研究组，选择89例来本院门诊健康体检者作为对照组。诊断依据中华医学会呼吸病学分会所制定的标准。老年肺炎组50例，老年对照组54例，青年肺炎组28例，青年对照组35例。均需排除应用免疫抑制剂、肿瘤、意识障碍、严重肝肾功能不全、慢性阻塞性肺病(COPD)患者。研究方案通过本院临床伦理委员会批准，所有入选的患者均知情同意。

1.2 标本采集 所有病例均空腹，真空静脉采血(由 BD 公司提供)，抽取静脉血2 ml，3.8% 乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝，标本必须在 4 h内检查完毕。

1.3 检测仪器及试剂 仪器:美国 Beckman Coulter XL4-MCL 型流式细胞仪。试剂:均由 Beckman Coulter 公司提供。

1.4 检测方法 采用三色流式细胞术、SSC/FSC 淋巴细胞分析总 T 细胞(CD3+)、T4细胞(CD3+CD4+)、T8 细胞(CD3+CD8+)及CD4+/CD8+比值，具体操作方法参见文献〔3〕。

1.5 统计学方法 应用SPSS17.0统计学软件行t检验及相关分析。

2 结 果

2.1 各组T细胞亚群比较 老年肺炎组患者CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞及CD4+/CD8+比值与老年对照组差异显著(P<0.05)；青年肺炎组与青年对照组比较CD3+T淋巴细胞、CD4+T淋巴细胞也明显下降(P<0.05)；其中青年肺炎组与老年对照组CD3+T淋巴细胞比较差异显著(P<0.05)；但CD8+T淋巴细胞在老年组与青年组组间比较无明显差异(P>0.05)。见表1。

2.2 年龄与 CD4+/CD8+比值的相关性 老年肺炎组和老年对照组年龄与 CD4+/CD8+比值呈显著负相关(r=-0.437、r=-0.287，P<0.05)。

表1 各组T细胞亚群比较

与青年对照组比较:1)P<0.05；与老年对照组比较:2)P<0.05 ；与青年肺炎组比较:3)P<0.05

3 讨 论

T淋巴细胞是体内重要的免疫细胞,在胸腺中发育成熟后进入外周血，其介导的细胞免疫在机体免疫方面起着核心作用。T淋巴细胞亚群中CD3+是所有T细胞的表面标志,是机体细胞免疫的基础；CD4+是辅助T细胞(Th)和效应T细胞的表面标志。Th细胞根据产生的细胞因子和生物学功能不同,将其分为 Th1和Th2细胞。激活后的 Th1细胞分泌 γ干扰素(IFN)-γ、白细胞介素2(IL)-2、肿瘤坏死因子-α等细胞因子,介导强烈的细胞免疫应答、迟发性超敏反应和器官特异性自身免疫性疾病,在宿主抗胞内病毒感染中起重要作用。激活后的Th2细胞还可分泌许多白介素因子，这些因子均可介导体液免疫应答、参与抗感染免疫、抗自身免疫性疾病、抗肿瘤等多种疾病的病理过程〔4〕。CD8+抗原是细胞毒T细胞(Tc)和抑制T细胞 (Ts)的表面标志 ；CD8+T 淋巴细胞中的 Ts 细胞的主要功能是通过分泌抑制因子来抑制免疫应答的活化阶段，其靶细胞是 B 细胞和抗原特异性 Th 细胞；Tc细胞的主要功能是参与抗肿瘤免疫、抗病毒免疫、移植排斥反应有关。

机体中各个T 细胞亚群网的相互作用维持着机体正常的免疫功能，当不同淋巴细胞亚群网的数量和功能发生异常时，就可导致机体免疫功能紊乱〔5〕。CD4+/CD8+反映宿主T淋巴细胞亚群的紊乱状态,且在一定程度上可间接了解机体细胞免疫功能情况〔5〕。老年人免疫功能减退主要是细胞免疫功能减退，外周血 T 淋巴细胞数量减少，其增殖能力减低，表型及亚群的比例改变，CD4+/CD8+比值下降，单个细胞上 CD4+或 CD8+密度减少，T 细胞接受抗原刺激时免疫应答能力减弱，产生IL-2 及表达膜 IL-2 受体的能力、产生其他细胞因子及发挥免疫效应的能力都明显降低〔6〕。本研究发现老年肺炎组与老年对照组及青年肺炎组与青年对照组结果比较表现，T 淋巴细胞和CD4+T 淋巴细胞计数的均明显降低、CD4+/CD8+比值明显下降，说明患病组人群存在明显的细胞免疫功能紊乱，CD4+T细胞下降明显，可能因为 CD4+T细胞不仅参与细胞免疫，还参与体液免疫的介导，因消耗量大而下降明显。CD8+T细胞计数在青年与老年组间比较无统计学意义，可能与CD8+T细胞有免疫记忆功能及其具有较强的增殖能力有关〔7,8〕,并且已有研究结果表明CD4+T细胞在感染过程中对记忆CD8+T细胞的分化和形成起着十分关键的辅助作用〔9〕。在青年肺炎组与老年对照组组间T淋巴细胞总数比较发现，即使青年人患病其淋巴细胞数也较健康老年人高，可能与随着增龄细胞老化而凋亡有关，同时也说明了老年人免疫功能衰退，产生免疫应答能力的下降。老年肺炎组与老年对照组及青年对照组比较发现，CD4+/CD8+比值明显偏离正常值，其下降幅度可反映老年人免疫功能失调的程度〔10,11〕。本研究观察到无论肺炎组和对照组均有随着年龄增长而出现CD4+/CD8+比值下降的趋势。但肺炎组与对照组相比 CD4+/CD8+比值下降更加明显。

目前分析老年人之所以易患肺炎,可能原因还有以下几种〔12〕：随年龄的增长呼吸系统趋于老化，支气管壁上皮萎缩、杯状细胞增生、纤毛运动减弱，咳嗽反射差，肺组织弹性减退等导致呼吸道清除功能降低，易于引起呼吸道感染，加之口腔卫生不良或原有咽喉、口腔内的慢性病灶，病原体易在上呼吸道定植，并且繁殖，发生支气管-肺部吸入性感染。老年人胸腺退化，由于T淋巴细胞减少，表现为细胞免疫功能下降，以及抗体产生能力下降，B细胞功能亦呈减少倾向，若用激素、抗癌药物等免疫抑制剂，则更易使寄生于上呼吸道或外来之细菌繁殖，老年人IgA减少，又是易致呼吸道病毒感染的因素；老年人常患慢性呼吸道疾病或全身慢性疾病(如糖尿病、脑血管病、慢性肾脏病、贫血、营养不良、长期卧床或肿瘤等)，易于并发肺炎； 喉、咽腔黏膜萎缩，感觉减退所引起的吞咽障碍，使食物容易呛入下呼吸道，引起细菌感染。最新实验研究表明〔13〕，对大鼠体内细胞因子和肺组织病理切片的分析后发现年老的大鼠易患肺部炎症。免疫印迹的表明，老年人类和老年大鼠在他们的肺部与青年对照组比较增加了抑癌基因P16蛋白 和Rb蛋白这些衰老标志物的水平。细菌黏附宿主蛋白角蛋白10(K10),层黏连蛋白受体(LR)和血小板活化因子受体(PAFR)也在衰老细胞中相应增加。这些结果均表明，细胞衰老有利于细菌黏附到肺部细胞，并提供额外的分子机制，为老年人患肺炎的发生率增加了机会。

综上所述，T 淋巴细胞亚群参与了老年肺炎的病理过程，在其发生、发展中起着十分重要的作用。因此，监测肺炎患者外周血 T 淋巴细胞亚群，可对其疗效做出评估并为增强免疫力提供理论依据，设法提高老年人的免疫功能，对提高老年人的抗感染能力将会起一定的作用。

1 Laut K,Benfield T.Lung infections are frequent in elderly persons〔J〕.Ugeskr Laeger，2013;175(47):2864-7.

2 Dorrington MG,Bowdish DM.Immunosenescence and vaccinations in the elderly〔J〕.Front Immunol，2013；28(4):171.

3 吴丽娟.临床流式细胞学检验技术〔M〕.北京:人民军医出版社，2010:1，78-88，119-22，124-7.

4 Korn T,Bettelli E,Oukka M,etal.IL-17 and Th17 cells 〔J〕 Ann Rev Immunol,2009;27(4):485-517.

5 Kim JE,Bauer S,La KS,etal.CD4+/CD8+T lymphocytes imbalance in children with severe 2009 pandemic influenza〔J〕.A Korean J Pediatr，2011;54(5):207-11.

6 Pawdec G，Barnett Y，Forsey R，etal.T cells and aging〔J〕.J Front Bio-sci，2002;7(5):1056-83.

7 Church SE,Jensen SM,Antony PA,etal.Tumor-specific CD4+T cells maintain effector and memory tumor-specific CD8+T cells〔J〕.Eur J Immunol，2014;44(1):69-79.

8 Sun J,Braciale TJ.Role of T cell immunity in recovery from influenza virus infection〔J〕.J Curr Opin Virol，2013;3(4):425-9.

9 Sun JC,Bevan MJ.Defective CD8 T cell memory following acute infection without CD4 T cell help〔J〕.Science,2003;300(5617):339-42.

10 Kim JE,Bauer S,La KS,etal.CD4+/CD8+T lymphocytes imbalance in children with severe 2009 pandemic influenza A (H1N1) pneumonia〔J〕.Korean J Pediatr，2011;54(5):207-11.

11 Read AJ,Erickson S,Harmsen AG,etal.Role of CD4+and CD8+T cells in clearance of primary pulmonary infection with Coxiella burnetii〔J〕.Infect Immun，2010;78(7):3019-26.

12 董碧蓉.老年肺炎现代诊治与预防策略〔J〕.中国实用内科杂志，2011;31(1)：22-4.

13 Shivshankar P,Boyd AR,Le Saux CJ,etal.Cellular senescence increases expression of bacterial ligands in the lungs and is positively correlated with increased susceptibility to pneumococcal pneumonia 〔J〕 Aging Cell,2011;10(5):798-806.

〔2015-02-05修回〕

(编辑 苑云杰)

党连生(1965-)，男，主任医师，教授，硕士生导师，主要从事老年病诊治研究。

R592

A

1005-9202(2016)19-4822-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2016.19.068